一种用于卵巢癌早期诊断的生物标志物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种可用于卵巢癌早期诊断的生物标志物组合，所述的代谢标志物组合包括酪氨酸(tyrosine)、苯丙氨酸(phenylalanine)、丙氨酸(beta

【技术实现步骤摘要】
一种用于卵巢癌早期诊断的生物标志物及其应用


[0001]本专利技术涉及医学诊断领域，更为具体的，本专利技术涉及一种用于卵巢癌早期诊断的生物标志物及其应用。

技术介绍

[0002]由于卵巢癌在发生的早期大多没有明显症状，加上缺乏有效筛查和早期诊断的手段，所以诊断时往往已经是晚期，因此多数患者预后较差，死亡率高。80%的患者确诊时已处于晚期，这些患者的5年生存率仅为39%，而早期卵巢癌患者的5年生存率可达71%
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93%。所以实现卵巢癌的早期诊断对于改善卵巢癌患者的预后和提高其生存质量具有重大意义。
[0003]目前临床上应用的卵巢癌筛查诊断方法主要有血清CA125检测和超声检查。但是近期的一项英国的大型随机对照临床试验(UKCTOCS)显示这些手段并没有明显改善卵巢癌患者的死亡率，其中原因之一就是因为血清CA125等传统标志物缺乏足够的灵敏度和特异度，无法满足早期诊断的需要，所以开发准确、敏感、可用于早期诊断卵巢癌的标志物对于推进实现卵巢癌的早期诊断具有巨大价值。
[0004]代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后发展起来的一项组学新技术，通过对小分子代谢物进行全局分析，可以提供有关疾病代谢状态的关键信息。作为基因表达的最终产物，代谢物会放大基因和蛋白这些上游物质的微小变化，能够更灵敏地反映生物体在病理生理状态下的改变及表型变化。代谢组学目前越来越多地应用于疾病筛查诊断、动态监测和精准化治疗等方面。肿瘤的主要特征之一就是代谢重编程，所以早期癌症具有其特征性的代谢表型，因此特定代表性的代谢物可用于早期癌症的诊断和疗效监测。
[0005]现有的技术方案主要有传统的卵巢癌诊断生物标志物，包括血清糖类抗原125（CA125）和人类附睾蛋白4（HE4）等。CA125是一种提取自卵巢浆液性囊腺癌的糖蛋白抗原，其在上皮性卵巢癌细胞中高度表达，并能够分泌到血液中，血清CA125监测对卵巢恶性肿瘤特别是上皮性癌的诊断价值较高。HE4是一种分泌型糖蛋白，最早在人附睾上皮中发现，其水平在卵巢癌患者血清中高。
[0006]CA125虽然是目前在卵巢癌的筛查诊断方面应用最多的生物标志物，对晚期卵巢癌的辅助诊断是毋庸置疑，但是有研究显示CA125仅在50%早期患者中升高(> 35U/ml)，并有1%的健康女性、3%的卵巢良性肿瘤患者和6%卵巢外的良性疾病也会出现CA125水平的升高，可见CA125的灵敏度和特异度均不够高。HE4在卵巢癌中的表达会因肿瘤的不同组织学亚型而差距很大，在几乎所有的卵巢子宫内膜样腺癌中高表达，但对于黏液性癌则几乎不表达，并且在子宫内膜癌中也会有高表达，所以HE4的灵敏度受组织学类型的限制，而且特异度也不高。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供了一种代谢标志物组合应用于卵巢癌的早期诊断，所述的代谢标志物组合包括酪氨酸(tyrosine)、苯丙氨酸(phenylalanine)、丙氨酸(beta
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alanine)、去甲肾
上腺素(norepinephrine)、香草扁桃酸(VMA)、12
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羟基十七碳三烯酸(12S
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HHT)和海茴香烯炔二醇(crithmumdiol)。本专利技术中通过检测受试者的宫腔液代谢标志物的水平来判断其是否患有早期卵巢癌。本专利技术中诊断试剂基于质谱法来检测宫腔液代谢标志物的水平。相比于良性卵巢肿瘤患者，早期卵巢癌患者的宫腔液中酪氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、去甲肾上腺素、12
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羟基十七碳三烯酸和海茴香烯炔二醇的水平均显著升高，香草扁桃酸的水平显著降低。和现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：基于本专利技术的宫腔液代谢标志物，可以从良性对照中诊断出早期卵巢癌；并且联合7个代谢标志物基于支持向量机(SVM)方法建立的代谢物组合对早期卵巢癌具有优于CA125的诊断效果，在训练组中代谢物组合的受试者工作特征曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)为0.956，显著高于CA125的0.806，二者的差异具有统计学意义(P=0.006)，在验证组中代谢物组合的AUC为0.957，显著高于CA125的0.817，差异也具有统计学意义(P=0.004)。
[0008]具体的，本专利技术提供如下的技术方案：本专利技术的第一个方面，提供一种用于卵巢癌早期诊断的生物标志物，其中，所述生物标志物包括酪氨酸(tyrosine)、苯丙氨酸(phenylalanine)、丙氨酸(beta
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alanine)、去甲肾上腺素(norepinephrine)、香草扁桃酸(VMA)、12
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羟基十七碳三烯酸(12S
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HHT)和海茴香烯炔二醇(crithmumdiol)在内的代谢物的组合。
[0009]本专利技术的第二个方面，提供一种用于卵巢癌早期诊断的试剂盒，其中，所述试剂盒包含检测如上所述的生物标志物水平的试剂。
[0010]本专利技术的第三个方面，提供一种生物标志物在制备用于早期诊断或检测卵巢癌的试剂盒中的应用，其中，所述试剂盒包含检测如上所述的生物标志物水平的试剂。
[0011]在一种实施方式中，所述试剂盒针对的检测样品为受试体的宫腔液。
[0012]在一种实施方式中，所述试剂盒用于质谱检测。
[0013]本专利技术相对于现有技术获得了如下突出的进步：1、宫腔液更接近卵巢癌微环境，因此在样品来源上，通过宫腔液获得的代谢标志物能有效对卵巢癌的早期进行诊断；2、宫腔液样品的获取方式具有无创和简便的优点；宫腔液中的代谢物作为标志物使用灵敏度更高，可以放大上游的基因和蛋白的改变的情况；3、本专利技术建立的7个代谢物联合对卵巢癌早期进行诊断的效果比临床上常用的CA125更好，灵敏度和特异性分别高达89%和87%，说明了该代谢组合对于卵巢癌早期具有极佳的诊断能力。
附图说明
[0014]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1为训练组良性卵巢肿瘤和早期卵巢癌患者的OPLS
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DA得分图；图2为训练组良性卵巢肿瘤和早期卵巢癌患者的差异代谢物水平的热图；图3为训练组良性卵巢肿瘤和早期卵巢癌患者的差异代谢物KEGG通路富集分析图；图4为训练组良性卵巢肿瘤和早期卵巢癌患者的代谢标志物的水平的比较；
图5为验证组良性卵巢肿瘤和早期卵巢癌患者的代谢标志物的水平的比较；图6为训练组代谢物组合区分良性卵巢肿瘤和早期卵巢癌的ROC曲线；图7为验证组代谢物组合区分良性卵巢肿瘤和早期卵巢癌的ROC曲线。
具体实施方式
[0015]以下结合附图对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0016]实施例1 诊断标志物的筛选本次研究共招募了219名患者，包括良性卵巢肿瘤、早期卵巢癌患者、晚期卵巢癌患者和子宫内膜癌患者。96名训练集患者的宫腔液标本于2018年4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于卵巢癌早期诊断的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物包括酪氨酸(tyrosine)、苯丙氨酸(phenylalanine)、丙氨酸(beta
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alanine)、去甲肾上腺素(norepinephrine)、香草扁桃酸(VMA)、12
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羟基十七碳三烯酸(12S
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HHT)和海茴香烯炔二醇(crithmumdiol)。2.一种用于卵巢癌早期诊断的试...

【专利技术属性】
技术研发人员：李默，郭红燕，吴郁，王攀，姜月宁，岳威，马稷红，肖依楠，顾晓阳，
申请(专利权)人：北京大学第三医院北京大学第三临床医学院，
类型：发明
国别省市：