一种应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片及其制备方法，涉及生物细胞组织染色检测技术领域。所述的多孔位载玻片，防脱层由聚酰胺蜡30

【技术实现步骤摘要】
一种应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物细胞组织染色检测
，尤其涉及一种应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片及其制备方法。

技术介绍

[0002]在载玻片上对生物细胞和/或组织进行化学染色（HE、巴氏、瑞氏，银染
……
）和/或生物、免疫学染色（免疫组织化学染色、原位杂交、免疫荧光染色
……
）检测，是最常见的研究和检测手段之一。随着检测量的攀升，对于高通量的检测需求越来越大。目前，绝大多数情况下，每张载玻片仅能执行单样本检测，无论是自动化仪器还是手工操作，均无法实现检测的高通量，而高通量可以大幅度降低人力、试剂和时间成本。另外，由于细胞和组织的观察分析多数时候需要在同一结构水平对多种检测进行对比。比如，免疫组织化学染色有时需要相邻切面的HE染色伴随。但目前单一载玻片仅能执行一种检测，同一样本的多种检测需要观察不同的载玻片，影响效率并且增加错误机率。
[0003]此外，液基细胞学检查是脱落细胞学的一部分，是把按传统方式难以处理的脱落细胞学标本放入一种固定保存液体中，保证目标细胞形态结构清晰及避免生物分降解，同时以去除血液、粘液等影响诊断的干扰成分，达到提高诊断率的目的。其中以自然沉降法为主流，该法沉降细胞时，须要把载玻片固定于特制的卡槽上并压入沉降仓，染色完成后须拆除沉降仓。该过程须手工完成，繁琐费时，沉降仓与玻片贴合要求高，不然易漏液，而且沉降仓为一次性塑料制品，其使用产生医疗废物，不够环保。
[0004]现有的载玻片，一般是通过物理吸附或化学吸附两种方式对生物细胞或组织进行吸附。
[0005]物理吸附是通过在载玻片的表面形成静电，通过静电对生物细胞和/或组织进行吸附，但是这种载玻片表面的静电容易消散，因此，存储过久会出现生物细胞或组织无法吸附在载玻片上的情形。
[0006]化学吸附是在载玻片的表面先覆盖一层粘覆层或防脱层，用于吸附细胞或组织，再在粘覆层或防脱层表面制作疏水层，并在疏水层上形成孔位（工作区域），疏水层上的孔位用于约束检测试剂局限于孔位（工作区域）内不外溢。化学吸附的载玻片相对于物理吸附的载玻片具有更长久的有效期，但是，现有化学吸附的载玻片依然存在以下问题：1）粘覆层或防脱层对于细胞或组织的吸附效果不理想，理想状态为2
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3层细胞平铺粘覆在粘覆层或防脱层上，吸附效果不理想会导致显微观测结果不准确甚至无法观测，如粘覆层或防脱层对细胞或组织的吸附力太强则会出现团聚现象，粘覆层或防脱层对细胞或组织的吸附力太弱则会出现游离现象。2）疏水层的疏水效果不理想，孔位（工作区域）的承载容量（即容纳检测试剂不外溢的最大体积）有限，无法约束更多检测试剂于孔位（工作区域）内；而且，载玻片的尺寸有限，如需在载玻片上制作形成多个孔位，孔位的孔径就受到限制，孔位的承载容量可能无法达到显微观测要求。3）粘覆层或防脱层与疏水层的结合效果差，主要表现在孔位添加检测试剂后，粘覆层或防脱层与疏水层分离，出现浮层现象。

技术实现思路

[0007]本专利技术针对现有化学吸附载玻片存在的问题，提供一种性能优异的多孔位载玻片，具体方案如下。
[0008]一种应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片，包括载玻片、防脱层以及疏水层，所述的防脱层覆盖在载玻片的表面，所述的疏水层覆盖在防脱层表面，所述的疏水层上设有多个孔位；按质量份数，所述的防脱层由聚酰胺蜡30
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34份、氨基硅烷21
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25份、聚醚胺10
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15份、正丙醇40
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50份、纯水20
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30份组成。
[0009]按质量份数，所述的疏水层由苯丙乳液100～150份、丙烯酸酯乳液50～100份、硅丙乳液30～50份、纳米二氧化硅1～10份、无机抗菌剂1～5份、增稠剂2～5份、分散剂5～8份、润湿剂1～3份、消泡剂0.5～2份、填料80～110份组成。
[0010]优选的，所述的聚醚胺选自端氨基聚氧化丙烯醚和端氨基聚氧化乙烯醚中的至少一种。
[0011]优选的，所述纳米二氧化硅的平均粒径为2
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20nm。
[0012]优选的，所述的无机抗菌剂选自沸石载银、活性炭载银、磷酸铜载银、磷酸钙载银中的至少一种。
[0013]优选的，所述的增稠剂选自阿拉伯胶、明胶、羟甲基纤维素、丙二醇藻蛋白酸酯中的至少一种。
[0014]优选的，所述的分散剂选自三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠中的至少一种。
[0015]优选的，所述的润湿剂选自磺化油、大豆卵磷脂中的至少一种。
[0016]优选的，所述的消泡剂为聚二甲基硅氧烷。
[0017]优选的，所述的填料选自沉淀碳酸钙、硅酸盐中的至少一种。
[0018]上述应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片的制备方法，包括以下步骤：按重量份，将聚酰胺蜡、氨基硅烷、聚酰胺醚、正丙醇、纯水进行混合，制成防脱液；按重量份，将苯丙乳液、丙烯酸酯乳液、硅丙乳液、纳米二氧化硅、无机抗菌剂、增稠剂、分散剂、润湿剂、消泡剂和填料进行混合，制成疏水剂；将清洁的载玻片置于防脱液中浸泡10分钟以上，取出静置20分钟以上，在载玻片表面形成防脱层；将疏水剂通过丝印印刷在载玻片其中一面的防脱层的表面，形成具有多个孔位的疏水层，干燥后即可得到应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片。
[0019]优选的，将清洁的载玻片置于防脱液中浸泡12
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15分钟，取出静置20
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24分钟，在载玻片表面形成防脱层。需要说明的是，浸泡时间过长防脱液会在载玻片上沉降，一般浸泡时间超过一个小时，静置后形成的防脱层会出现表面不均匀，降低载玻片的透光性。
[0020]本专利技术应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片，包括载玻片、防脱层以及疏水层；用于形成防脱层的防脱液由聚酰胺蜡、氨基硅烷、聚酰胺醚、正丙醇、纯水按一定配比组成，形成的防脱层可将平铺展开的2
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3层细胞吸附在载玻片上，吸附效果好；且防脱层透光性好，防脱层覆盖在载玻片表面后，透光率依然在83%
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85%，不会影响显微观测；用于形成疏水层的疏水剂由苯丙乳液、丙烯酸酯乳液、硅丙乳液、纳米二氧化硅、无机抗菌剂、增稠剂、分散剂、润湿剂、消泡剂和填料按一定配比组成，疏水层的疏水能力更强，与现有载玻片的疏水
层相比，相同大小的孔位可约束更多检测试剂，同时，采用本专利技术疏水剂的载玻片，即使检测试剂的添加量超过孔位的容量而溢出孔位，检测试剂仍会以孔位为中心形成珠状，不会发生不规则溢流，可避免多孔位载玻片上的多种检测试剂因溢流而造成的交叉污染；此外，本专利技术中的防脱层与疏水层结合效果好，适用于多种染色检测试剂，不会造成浮层现象。
[0021]本专利技术的多孔位载玻片可应用于医学检测和生物学研究。在载玻片疏水层上留有各种形状和数量的工作区域，由于疏水层的强力疏水作用，可以约束检测试剂局限于工作区域内不外溢，保证各样本和各种不同类型的检测互本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片，其特征在于，包括载玻片、防脱层以及疏水层，所述的防脱层覆盖在载玻片的表面，所述的疏水层覆盖在防脱层表面，所述的疏水层上设有多个孔位；按质量份数，所述的防脱层由聚酰胺蜡30
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34份、氨基硅烷21
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25份、聚醚胺10
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15份、正丙醇40
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50份、纯水20
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30份组成；按质量份数，所述的疏水层由苯丙乳液100～150份、丙烯酸酯乳液50～100份、硅丙乳液30～50份、纳米二氧化硅1～10份、无机抗菌剂1～5份、增稠剂2～5份、分散剂5～8份、润湿剂1～3份、消泡剂0.5～2份、填料80～110份组成。2.根据权利要求1所述的应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片，其特征在于，所述的聚醚胺选自端氨基聚氧化丙烯醚和端氨基聚氧化乙烯醚中的至少一种。3.根据权利要求2所述的应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片，其特征在于，所述纳米二氧化硅的平均粒径为2
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20nm。4.根据权利要求3所述的应用于免疫细胞染色的多孔位载玻片，其特征在于，所述的无机抗菌剂选自沸石载银、活性炭载银、磷酸铜载银、磷酸钙载银中的至少一种。5.根据权利要求4所述的应用于免疫...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱峻，黄小军，
申请(专利权)人：深圳市森盈智能科技有限公司，
类型：发明
国别省市：