丝裂霉素-RGD肽偶联物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种丝裂霉素

【技术实现步骤摘要】
丝裂霉素
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RGD肽偶联物及其制备方法


[0001]本专利技术属于药物化学领域，更具体涉及一种丝裂霉素
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RGD肽偶联物及其制备方法。

技术介绍

[0002]整合素是一类介导哺乳动物细胞黏附与信号转导的异二聚体跨膜糖蛋白受体，参与细胞迁移、细胞侵袭、细胞和细胞间的信号传导、细胞黏附及血管新生过程等多种细胞活动的调节。整合素在所有肿瘤组织、新生血管内皮细胞膜均高表达。研究发现，多种整合素能与RGD肽特异性结合，RGD肽为整合素的受体拮抗肽，以RGD肽独特的靶向作用作为治疗肿瘤的新靶点已成为肿瘤治疗研究的一个热点。
[0003]多肽偶联药物(PDC)由靶向肽、细胞毒性药物和连接子(Linker)三部分构成，是将靶向肽作为靶向给药载体，与毒性药物分子共价偶联，来增强药物的靶向性。
[0004]丝裂霉素是一种国内外常用抗肿瘤药物，它对多种实体肿瘤具有非常好的抵抗效果，是常用的周期非特异性药物。丝裂霉素在细胞内通过还原酶活化后作用于脱氧核糖核酸(DNA)，对DNA的复制有拮抗作用，还可以使得 DNA解聚。使用高浓度的丝裂霉素可以抑制RNA和蛋白质的合成。这个药物主要用于G1晚期和S早期的实体肿瘤。
[0005]丝裂霉素药物的使用对正常细胞也有较大的毒副作用。因此，有必要研究一种丝裂霉素
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RGD肽偶联物及其制备方法，增加丝裂霉素靶向性。

技术实现思路

[0006]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种丝裂霉素
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RGD肽偶联物及其制备方法，把丝裂霉素运输到肿瘤组织，增加丝裂霉素靶向性，在保有丝裂霉素的抗肿瘤活性的同时，降低对正常细胞的毒副作用。
[0007]一方面，本专利技术公开了一种丝裂霉素
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RGD肽偶联物，其包括丝裂霉素、连接子和RGD肽；通过连接子把丝裂霉素和RGD肽偶联。
[0008]丝裂霉素
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RGD肽偶联物的结构如式(I)所示：
[0009][0010]式(I)中的A为丝裂霉素，B为连接子丁二酸酐，C为RGD环肽。
[0011]另一方面，本专利技术还公开了上述丝裂霉素
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RGD肽偶联物的制备方法，该方法包括如下步骤：
[0012]S1.RGD环肽与丁二酸酐在碱的作用下反应得到中间体1；
[0013]S2.中间体1与丝裂霉素在缩合剂作用下反应得到丝裂霉素
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RGD环肽偶联物。
[0014]在一些实施方式中，步骤S1和S2中反应的反应液分别为二氯甲烷、氯仿、丙酮、四氢呋喃、二氧六环、DMSO、DMF中的一种，反应温度为0℃
ꢀ‑
60℃。
[0015]在一些实施方式中，步骤S1中的碱为碳酸钾、碳酸钠、DMF、三乙胺、 N，N
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二异丙基乙胺中的一种。
[0016]在一些实施方式中，步骤S2中的缩合剂为DCC和DMAP的混合物或者 EDCI和HOBT的混合物。
[0017]本专利技术还公开了上述丝裂霉素
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RGD肽偶联物在制备治疗肿瘤疾病药物中的应用，肿瘤包括胃癌、肺癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、结直肠癌、食管癌和卵巢癌。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0019]本专利技术公开的丝裂霉素
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RGD肽偶联物，通过RGD肽把丝裂霉素运输到肿瘤组织，增加丝裂霉素靶向性，在保有丝裂霉素的抗肿瘤活性的同时，降低了对正常细胞的毒副作用；
[0020]本专利技术中将丝裂霉素与RGD环肽偶联，其在体内的稳定性好，生物利用度高。
具体实施方式
[0021]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。
[0022]本实施例公开了丝裂霉素
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RGD肽偶联物的制备方法，该方法包括如下步骤：
[0023]S1.RGD环肽与丁二酸酐在碱的作用下反应得到中间体1；
[0024]S2.中间体1与丝裂霉素在缩合剂作用下反应得到丝裂霉素
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RGD环肽偶联物。
[0025]实施例1
[0026]根据本专利技术公开的制备方法制备丝裂霉素
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RGD肽偶联物。
[0027]中间体1的合成
[0028]3.33g丝裂霉素溶于50ml DMF中，室温搅拌，加入丁二酸酐1.5g，继续反应过夜，加入冰水萃灭，搅拌继续30min，分液，二氯甲烷萃取水层3次，合并二氯甲烷层，先后使用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，有机层使用无水硫酸镁干燥过夜，抽滤，滤饼少量二氯甲烷洗涤，滤液浓缩后甲醇重结晶，得到白色固体2.85g，MS m/z：535.1(M+H)+。
[0029]丝裂霉素
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RGD环肽偶联物
[0030]2.85g中间体1溶于20ml无水四氢呋喃，室温搅拌，加入HOBT 1.5g和 EDCI 2g,继续搅拌30min，滴加含有RGD环肽4.5g的四氢呋喃溶液，继续搅拌反应过夜，加入冰水搅拌30min，萃取，有机层使用无水硫酸镁干燥过夜，抽滤，滤饼少量四氢呋喃洗涤，滤液浓缩后甲醇/水处理，得到半固体溶于水后冻干机冻干即得到丝裂霉素
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RGD环肽偶联物冻干粉6.2g，MS m/z：1009.5(M+H)+。
[0031]实施例2
[0032]利用实施例1制得的丝裂霉素
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RGD肽偶联物进行体外抗肿瘤试验。
[0033]消化肿瘤细胞，调整细胞悬液浓度至1x105cells/ml，将细胞液加入到无标记细胞功能检测板，每孔加入0.3ml，37℃二氧化碳培养箱培养24h。检测孔分为3组，分别加入丝裂霉素，RGD环肽和丝裂霉素
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RGD肽偶联物，6h 后统计NCI值，计算各样品对肿瘤细胞的抑制活性，数据见下表1。
[0034]表1：各样品对肿瘤细胞的抑制活性
[0035][0036][0037]从试验结果可知，RGD多肽基本不影响肿瘤细胞的活性，丝裂霉素与丝裂霉素
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RGD肽偶联物对于大部分肿瘤细胞活性的抑制优于丝裂霉素。证明本专利技术公开的丝裂霉素
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RGD肽偶联物，在体内的稳定性好，生物利用度高。另一方面，丝裂霉素
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RGD肽偶联物通过RGD肽把丝裂霉素运输到肿瘤组织，增加丝裂霉素靶向性，在保有丝裂霉素的抗肿瘤活性的同时，降低了对正常细胞的毒副作用。
[0038]以上所述的仅是本专利技术的一些实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术的创造构思的前提下，还可以做出其它变形和改进，这些都属于本专利技术的保护范围。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.丝裂霉素
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RGD肽偶联物，其特征在于，所述丝裂霉素
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RGD肽偶联物包括丝裂霉素、连接子和RGD肽；通过所述连接子把丝裂霉素和RGD肽偶联。2.根据权利要求1所述的丝裂霉素
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RGD肽偶联物，其特征在于，所述RGD肽为RGD多肽或RGD环肽。3.根据权利要求2所述的丝裂霉素
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RGD肽偶联物，其特征在于，所述连接子为丁二酸酐、戊二酸酐、己二酸酐中的一种。4.根据权利要求3所述的丝裂霉素
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RGD肽偶联物，其特征在于，所述RGD肽为RGD环肽，所述连接子为丁二酸酐。5.根据权利要求4所述的丝裂霉素
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RGD肽偶联物，其特征在于，所述丝裂霉素
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RGD肽偶联物的结构如式(I)所示：所述式(I)中的A为丝裂霉素，B为连接子丁二酸酐，C为RGD环肽。6.根据权利要求5所述的丝裂霉素
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RGD肽偶联物的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：S1.RGD环肽与丁二酸酐...

【专利技术属性】
技术研发人员：王涛，王庆林，王彬彬，游本加，
申请(专利权)人：无锡福祈制药有限公司，
类型：发明
国别省市：