一种纳米酶-益生菌复合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗阴道炎、有效降低对阴道粘膜组织和细胞损伤、提高阴道抵御各类病原微生物感染能力、降低阴道炎复发率、有较高安全性的纳米酶

【技术实现步骤摘要】
一种纳米酶
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益生菌复合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种治疗阴道炎的药物，尤其涉及一种纳米酶
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益生菌复合物及其制备方法和应用，属于医药卫生领域。

技术介绍

[0002]健康女性阴道微环境的优势菌以乳酸菌为主，一旦乳酸菌的数量改变或者占比下降就会破坏阴道微环境，从而引发各类阴道感染性疾病，包括细菌性阴道炎、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎、老年性阴道炎、幼女性阴道炎、混合型阴道炎等。其中，念珠菌性阴道炎是一种常见多发的、真菌感染的外阴阴道炎症性疾病，通常是由白色念珠菌引起的。据统计，全世界约75％的妇女在一生中至少患过一次念珠菌性阴道炎；更严重的是，5
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8％妇女会经历念珠菌性阴道炎的复发。因此，念珠菌性阴道炎造成女性身体病理性改变和不适的同时，也严重影响女性的精神健康。
[0003]目前临床上治疗念珠菌性阴道炎的抗真菌药物主要包括克霉唑、氟康唑、咪康唑和制霉菌素。然而，这其中的一些药物只能抑制真菌生长，而不能杀死真菌。此外，长期使用这些抗真菌药物不仅会损伤阴道粘膜的正常组织和细胞，而且会破坏阴道微环境，导致阴道局部的菌群失调、酸碱平衡紊乱、防御体系受损、二重感染，甚至造成耐药，增加复发率，从而増加了临床治疗的难度。
[0004]由于念珠菌性阴道炎为大量雌激素导致白色念珠菌大量繁殖、阴道pH升高和阴道菌群失衡的，念珠菌性阴道炎的发生与阴道微环境失衡有一定的相关性，因此，维持阴道微环境平衡的临床需求推动了微生态学对念珠菌性阴道炎治疗研究的发展。原则上，可以使用益生菌来调节阴道微环境，如使用临床用阴道乳酸菌，可以通过产生乳酸(使阴道维持在正常pH范围内(小于4.5))、靶标特异性的细菌素以及具有广谱杀菌活性的H2O2等来达到保护阴道免受外界病原微生物侵害的目的。然而，该方法仅适用于细菌性阴道炎，对念珠菌性阴道炎的治疗效果不佳。究其原因，可能是相比于细菌来说，真菌的结构更为复杂，属于真核细胞，它有菌丝、有孢子，而乳酸菌产生的乳酸、H2O2、细菌素等抗菌物质浓度较低，难以渗透到真菌细胞内部，导致真菌更难杀灭。因此，为有效治疗念珠菌性阴道炎，在利用阴道用乳酸菌维持阴道微环境的基础上，同时还需辅以其它策略杀灭真菌。
[0005]研究表明，活性氧(ROS)和/或活性氮(RNS)已被广泛应用于抗感染研究。例如，一些离子(如Fe
2+
)和天然酶(如髓过氧化物酶
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烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)可以催化H2O2产生大量的ROS和/或RNS，但前者因为离子浓度高而对正常组织和细胞造成一定的损伤，后者由于不稳定、不可循环利用、免疫原性等问题，而限制其进一步应用。
[0006]纳米酶(即具有类酶催化性质的纳米材料)具有催化产生ROS和/或RNS的能力，在生物医学等领域得到了广泛应用。一些研究表明，具有类过氧化物酶活性(POD)的纳米酶可以产生ROS和/或RNS，并具有较高的抗菌活性。因此，如果能设计一种具有类POD活性的纳米酶，将其与益生菌进行联合使用，利用益生菌产生的H2O2和/或乳酸来产生ROS和/或RNS，那么就可以解决目前临床上使用的抗真菌药物所面临的问题，即可同时实现杀灭白色念珠菌
和调节阴道微环境的目的，这将有望推广到临床的实际应用。

技术实现思路

[0007]专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供一种用于治疗阴道炎、有效降低对阴道粘膜组织和细胞损伤、提高阴道抵御各类病原微生物感染的能力、降低阴道炎复发率、有较高安全性的纳米酶
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益生菌复合物及其凝胶剂。
[0008]本专利技术还要解决的技术问题是提供一种该纳米酶
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益生菌复合物及其凝胶剂的制备方法。
[0009]本专利技术还要解决的技术问题是提供一种该纳米酶
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益生菌复合物及其凝胶剂在生产治疗、缓解和/或预防阴道炎并降低该疾病复发率的药物中的应用。
[0010]为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
[0011]本专利技术提供了一种纳米酶
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益生菌复合物，所述纳米酶
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益生菌复合物含有纳米酶和益生菌，所述纳米酶为具有类过氧化物酶活性的纳米酶，所述益生菌为能产生H2O2和/或乳酸的益生菌。
[0012]其中，所述纳米酶
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益生菌复合物还包括惰性载体。作为优选地，所述惰性载体包括还原氧化石墨烯、聚乳酸
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羟基乙酸共聚物或羟基磷灰石
[0013]其中，所述纳米酶包括氧族化合物纳米酶、氮族化合物纳米酶、金属纳米酶、金属
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有机框架基纳米酶、共价有机框架基纳米酶、碳基纳米酶或复合材料纳米酶，作为优选地，所述金属纳米酶包括二硫化铁纳米酶、黄铁矿纳米酶、四氧化三铁纳米酶铂铁合金纳米酶。
[0014]其中，所述益生菌包括乳酸菌、酵母菌、芽孢菌、丁酸梭菌、双歧杆菌、放线菌中的一种或几种；所述益生菌的浓度为102‑
104CFU/mL。
[0015]其中，所述纳米酶
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益生菌复合物的剂型包含溶液剂、注射剂、洗剂、搽剂、散剂、丸剂、片剂、膜剂、软膏剂、凝胶剂、栓剂、糊剂、气雾剂或喷雾剂。
[0016]本专利技术还提供了该纳米酶
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益生菌复合物的制备方法，包括以下步骤：将所述纳米酶与益生菌混合，加入剂型基质，均匀混合、孵育后即得。
[0017]本专利技术还提供了一种纳米酶
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益生菌复合物凝胶剂，纳米酶
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益生菌复合物凝胶剂含有纳米酶和益生菌，纳米酶和益生菌通过凝胶结合，纳米酶为具有类过氧化物酶活性的纳米酶，益生菌为能产生H2O2和/或乳酸的益生菌。
[0018]本专利技术还提供了一种制备该纳米酶
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益生菌复合物凝胶剂的方法，包含以下步骤：
[0019](1)取透明质酸、N
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羟基硫代琥珀酰亚胺和1
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乙基
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(3
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二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺的混合溶液；将L
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半胱氨酸甲酯盐酸盐加入到混合溶液中，避光搅拌，调节pH值，得到酸性混合溶液；所述透明质酸、N
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羟基硫代琥珀酰亚胺、1
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乙基
‑
(3
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二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺、L
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半胱氨酸甲酯盐酸盐的质量比为1:1
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5:1
‑
5:1
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5；
[0020](2)将酸性混合溶液透析、冻干，得到蓬松固体；
[0021](3)将类过氧化物酶活性的纳米酶和产生H2O2和/或乳酸的益生菌溶液溶解于缓冲盐溶液中，再加入蓬松固体，均匀混合，孵育，形成纳米酶
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益生菌复合物；所述益生菌溶液的浓度为101‑
105CFU/mL，所述类过氧化物酶活性的纳米酶与蓬松固体的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纳米酶
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益生菌复合物，其特征在于，所述纳米酶
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益生菌复合物含有纳米酶和益生菌，所述纳米酶为具有类过氧化物酶活性的纳米酶，所述益生菌为能产生H2O2和/或乳酸的益生菌。2.根据权利要求1所述的一种纳米酶
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益生菌复合物，其特征在于，所述纳米酶
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益生菌复合物还包括惰性载体；作为优选地，所述惰性载体包括还原氧化石墨烯、聚乳酸
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羟基乙酸共聚物或羟基磷灰石。3.根据权利要求1所述的纳米酶
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益生菌复合物，其特征在于，所述纳米酶包括氧族化合物纳米酶、氮族化合物纳米酶、金属纳米酶、金属
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有机框架基纳米酶、共价有机框架基纳米酶、碳基纳米酶或复合材料纳米酶，作为优选地，所述金属纳米酶包括二硫化铁纳米酶、黄铁矿纳米酶、四氧化三铁纳米酶或铂铁合金纳米酶。4.根据权利要求2所述的纳米酶
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益生菌复合物，其特征在于，所述益生菌包括乳酸菌、酵母菌、芽孢菌、丁酸梭菌、双歧杆菌、放线菌中的一种或几种；所述益生菌的浓度为102～104CFU/mL。5.根据权利要求1所述的纳米酶
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益生菌复合物，其特征在于，所述纳米酶
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益生菌复合物的剂型包括溶液剂、注射剂、洗剂、搽剂、散剂、丸剂、片剂、膜剂、软膏剂、凝胶剂、栓剂、糊剂、气雾剂或喷雾剂。6.权利要求1～5任一项所述的纳米酶
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益生菌复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将所述纳米酶与益生菌混合，加入剂型基质，均匀混合、孵育后即得。7.一种纳米酶
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益生菌复合物凝胶剂，其特征在于，所述纳米酶
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益生菌复合物凝胶剂含有纳米酶和益生菌，所述纳米酶和益生菌通过凝胶结合，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏辉，魏艮，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：