一种奥拉帕利一水合物中3-溴苯酞的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种奥拉帕利一水合物中3

【技术实现步骤摘要】
一种奥拉帕利一水合物中3
‑
溴苯酞的检测方法


[0001]本专利技术涉及一种药物分析
，尤其涉及一种奥拉帕利一水合物中3
‑
溴苯酞的检测方法。

技术介绍

[0002]奥拉帕利（Olaparib）是英国阿斯利康公司和德国艾伯维公司合作生产一种口服多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）抑制剂，利用肿瘤DNA损伤反应（DDR）途径的缺陷，优先杀死癌细胞。该药于2014年12月在美国获FDA批准，用于治疗既往接受过两次以上治疗且携带种系BRCA突变的晚期卵巢癌患者，成为全球首个获批的PARP抑制剂。随后欧盟、日本等多地获批，且适应症不断扩大，目前已经覆盖乳腺癌、卵巢癌、输卵管癌、腹膜癌和胰腺癌。2018年8月23日，国家药品监督管理局正式批准卵巢癌靶向药物奥拉帕利在中国上市，成为在我国国内上市的首款PARP抑制剂。奥拉帕利更是被纳入我国2019医保目录。
[0003]目前国内外未见有对奥拉帕利中潜在基因毒性杂质3
‑
溴苯酞分析方法的研究，因此，研发出一种能够有效检测出遗传毒性杂质3
‑
溴苯酞，且符合操作简单、试剂易得、重现性、线性和回收率好，环境污染小的方法非常有意义。
[0004]遗传毒性杂质的化学结构如下：杂质名称3
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溴苯酞化学结构式：分子式C8H5BrO2分子量213.03化学文摘号6940
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4目前，国内外文献尚未见到奥拉帕利一水合物中遗传毒性杂质3
‑<br/>溴苯酞检测方法报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术为了解决上述技术问题，提供一种奥拉帕利一水合物中3
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溴苯酞的检测方法。
[0006]本专利技术采用的技术方案如下：一种奥拉帕利一水合物中3
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溴苯酞的检测方法，包括以下步骤：
步骤S1：将哌啶溶解于甲醇中进行稀释、混合均匀，得到衍生溶剂，并将衍生溶剂溶解于甲醇中作为空白溶液；步骤S2：将奥拉帕利一水合物溶于甲醇形成奥拉帕利溶液，并将衍生溶剂与奥拉帕利溶液按照体积比为1:10
‑
1:200的比例进行均匀混合，作为供试品溶液；步骤S3：将3
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溴苯酞溶解于甲醇得到浓度为2.5ng/ml的3
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溴苯酞溶液，并将衍生溶剂与3
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溴苯酞溶液按照体积比为1:5
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1:50的比例进行均匀混合，作为对照品溶液；步骤S4：依次将空白溶液、供试品溶液、对照品溶液注入LC
‑
MS系统，记录对照品溶液主峰峰面积以及供试品溶液中与对照品溶液保留时间一致的峰面积，采用外标法计算供试品中的3
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溴苯酞含量。
[0007]进一步地，所述步骤S1中衍生溶剂的哌啶的体积与甲醇的体积比为1:5
‑
1:50。
[0008]进一步地，所述LC
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MS系统所使用的色谱柱为反相C18柱，流动相由0.1%甲酸水溶液和甲醇组成。
[0009]进一步地，所述LC
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MS系统中采用梯度洗脱，所述梯度洗脱的流速为0.3mL/min、柱温为30℃、样品盘温度为4℃、狭缝宽为1.2nm。
[0010]进一步地，所述梯度洗脱的程序以体积比计，0至3分钟，流动相A为95%，流动相B为5%；3至11分钟，流动相A相为10%，流动相B相为90%；11至12.5分钟，流动相A相为10%，流动相B相为90%；12.5至12.51分钟，流动相A相为95%，流动相B相为5%；12.51至15分钟，流动相A相为95%，流动相B相为5%。
[0011]进一步地，所述LC
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MS系统的质谱条件为：离子源为AJS
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ESI，离子模式为正离子，采集模式为多反应监测MRM。
[0012]本专利技术的有益效果是：本专利技术通过选取特定的衍生溶剂将供试品衍生化后，采用LC
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MS/MS方法，在本专利技术开发的色谱和质谱条件下，实现奥拉帕利一水合物中遗传毒性杂质3
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溴苯酞的有效检测，该方法的准确度、精密度、重现性、线性、溶液稳定性均符合要求。能降低遗传毒性杂质对人体的危害，为安全用药提供保障。首次采用高效液相色谱质谱联用技术检测洛奥拉帕利一水合物中遗传毒性杂质3
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溴苯酞，检测限达到低于0.2ppm。
附图说明
[0013]图1为本专利技术一种奥拉帕利一水合物中3
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溴苯酞的检测方法的流程示意图；图2为本专利技术一种奥拉帕利一水合物中3
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溴苯酞的检测方法原理示意图；图3为本专利技术实施例衍生产物扫描离子EIC图；图4为本专利技术实施例的对照品溶液离子色谱图；图5为本专利技术实施例的供试品溶液色谱图；图6为本专利技术实施例的精密度溶液的离子色谱图；图7为本专利技术实施例的线性拟合图。
具体实施方式
[0014]以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本专利技术及其应用或使用的任何限制。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0015]参见图1，一种奥拉帕利一水合物中3
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溴苯酞的检测方法，包括以下步骤：步骤S1：将哌啶溶解于甲醇中进行稀释、混合均匀，得到衍生溶剂，并将衍生溶剂溶解于甲醇中作为空白溶液；可选地，衍生溶剂的哌啶的体积与甲醇的体积比为1:20；可选地，哌啶的体积与甲醇的体积比为1:5；可选地，哌啶的体积与甲醇的体积比为1:30；可选地，哌啶的体积与甲醇的体积比为1:50；步骤S2：将奥拉帕利一水合物溶于甲醇形成奥拉帕利溶液，并将衍生溶剂与奥拉帕利溶液按照体积比为1:20的比例进行均匀混合，作为供试品溶液；可选地，衍生溶剂与奥拉帕利溶液的体积比为1:10；可选地，衍生溶剂与奥拉帕利溶液的体积比为1:30；可选地，衍生溶剂与奥拉帕利溶液的体积比为1:50；可选地，衍生溶剂与奥拉帕利溶液的体积比为1:100；可选地，衍生溶剂与奥拉帕利溶液的体积比为1:200；步骤S3：将3
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溴苯酞溶解于甲醇得到浓度为2.5ng/ml的3
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溴苯酞溶液，并将衍生溶剂与3
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溴苯酞溶液按照体积比为1:5
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1:50的比例进行均匀混合，作为对照品溶液；可选地，衍生溶剂与3
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溴苯酞溶液的体积比为1:5；可选地，衍生溶剂与3
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溴苯酞溶液的体积比为1:30；可选地，衍生溶剂与3
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溴苯酞溶液的体积比为1:50；步骤S4：依次将空白溶液、供试品溶液、对照品溶液注入LC
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MS系统，记录对照品溶液主峰峰面积以及供试品溶液中与对照品溶液保留时间一致的峰面积，采用外标法计算供试品中的3
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溴苯酞含量；所述LC<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种奥拉帕利一水合物中3
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溴苯酞的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1：将哌啶溶解于甲醇中进行稀释、混合均匀，得到衍生溶剂，并将衍生溶剂溶解于甲醇中作为空白溶液；步骤S2：将奥拉帕利一水合物溶于甲醇形成奥拉帕利溶液，并将衍生溶剂与奥拉帕利溶液按照体积比为1:10
‑
1:200的比例进行均匀混合，作为供试品溶液；步骤S3：将3
‑
溴苯酞溶解于甲醇得到浓度为2.5ng/ml的3
‑
溴苯酞溶液，并将衍生溶剂与3
‑
溴苯酞溶液按照体积比为1:5
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1:50的比例进行均匀混合，作为对照品溶液；步骤S4：依次将空白溶液、供试品溶液、对照品溶液注入LC
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MS系统，记录对照品溶液主峰峰面积以及供试品溶液中与对照品溶液保留时间一致的峰面积，采用外标法计算供试品中的3
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溴苯酞含量。2.如权利要求1所述的一种奥拉帕利一水合物中3
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溴苯酞的检测方法，其特征在于，所述步骤S1中衍生溶剂的哌啶的体积与甲醇的体积比为1:5
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1:50。3.如权利要求1所述的一种奥拉帕利一水合...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄荣，姜鑫，朱天强，刘子阳，
申请(专利权)人：钛和杭州医药技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：