经细胞因子修饰的嵌合抗体及其使用方法技术

提供了含有超长CDR3的经细胞因子修饰的嵌合抗体，诸如基于牛抗体序列或其人源化序列，其中重链的CDR3的一部分被白细胞介素(IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】经细胞因子修饰的嵌合抗体及其使用方法
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2019年10月24日提交的标题为“经细胞因子修饰的嵌合抗体及其使用方法(CHIMERIC CYTOKINE MODIFIED ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF)”的美国临时申请62/925,740的优先权，出于所有目的将所述临时申请的内容通过引用以其整体并入本文。序列表
[0002]本申请是与电子格式的序列表一起提交的。序列表以2020年10月22日创建的名为165772000140SeqList.txt的文件提供，其大小为79,015字节。将在电子格式的序列表中的信息通过引用以其整体并入。


[0003]本公开文本涉及含有超长CDR3的经细胞因子修饰的嵌合抗体，诸如基于牛抗体序列或其人源化序列，其中重链的CDR3的一部分被白细胞介素(IL
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15)或IL
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2替代；以及相关抗体。本公开文本的分子包括经IL
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15细胞因子修饰的嵌合抗体分子，其进一步与IL15Rα的细胞外部分诸如IL15Rαsushi结构域连接或复合。本公开文本还提供了制造和使用所述经细胞因子修饰的嵌合抗体的方法。

技术介绍

[0004]抗体是脊椎动物免疫系统响应外来物质(抗原)而形成的天然蛋白质，主要用于防御感染。抗体含有介导与靶抗原的结合的互补决定区(CDR)。与其他脊椎动物相比，一些牛抗体具有异常长的VH CDR3序列，其长度可以高达70个氨基酸。长CDR3可以形成从抗体表面突出的独特结构域，从而允许形成独特的抗体平台。
[0005]白细胞介素(IL)15和IL
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2是刺激细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞的增殖和细胞毒性的细胞因子，并且因此是癌症治疗的免疫治疗候选物。然而，此类细胞因子可能难以表达为稳定的可溶性蛋白质并且通常在体外和体内具有短的半衰期。仍然需要改善的细胞因子治疗剂，诸如IL
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2或IL
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15治疗剂，特别是用于治疗癌症。

技术实现思路

[0006]本文提供了一种经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其包含经修饰的超长CDR3，所述经修饰的超长CDR3包含替代牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的重链的超长CDR3区的至少一部分的白细胞介素
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15(IL
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15)细胞因子序列或其生物活性部分。
[0007]在一些实施方案中，所述IL
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15细胞因子序列是人IL
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15。在一些实施方案中，所述IL
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15细胞因子序列包含与SEQ ID NO:1展现出至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述IL
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15细胞因子序列包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述IL
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15细胞因
子序列由SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列组成。
[0008]本文提供了一种经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其包含经修饰的超长CDR3，所述经修饰的超长CDR3包含替代牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的重链的超长CDR3区的至少一部分的白细胞介素
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2(IL
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2)细胞因子序列或其生物活性部分。
[0009]在一些实施方案中，所述IL
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2细胞因子序列是人IL
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2。在一些实施方案中，所述IL
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2细胞因子序列包含与SEQ ID NO:165展现出至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述IL
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2细胞因子序列包含SEQ ID NO:165中所示的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述IL
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2细胞因子序列由SEQ ID NO:165中所示的氨基酸序列组成。
[0010]在任何实施方案中的一些中，所述细胞因子序列替代牛抗体或抗原结合片段的重链的超长CDR3区的至少一部分。在一些实施方案中，所述牛抗体或抗原结合片段是牛抗体BLV1H12或其抗原结合片段。
[0011]在一些实施方案中，所述牛抗体或抗原结合片段包含由SEQ ID NO:5中所示序列编码的可变重链氨基酸序列和由SEQ ID NO:8中所示序列编码的可变轻链氨基酸序列。在一些实施方案中，所述牛抗体或抗原结合片段包含由SEQ ID NO:167中所示序列编码的可变重链氨基酸序列和由SEQ ID NO:168中所示序列编码的可变轻链氨基酸序列。
[0012]在一些实施方案中，所述牛抗体或抗原结合片段包含SEQ ID NO:26中所示的可变重链和SEQ ID NO:27中所示的可变轻链。
[0013]在任何实施方案中的一些中，所述细胞因子序列替代人源化牛抗体或其抗原结合片段的重链的超长CDR3区的至少一部分。在一些实施方案中，所述人源化牛抗体或其抗原结合片段包含作为人重链种系序列或源自人重链种系序列的重链或其一部分和作为人轻链种系序列或源自人轻链种系序列的轻链或其一部分。在一些实施方案中，所述人重链种系序列是VH4
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39、VH4
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59*03、VH4
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34*02或VH4
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34*09种系序列或是SEQ ID NO:68
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71中任一个所示的序列。
[0014]在任何实施方案中的一些中，所述人轻链种系序列是VL1
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51种系序列或是基于所述VL1
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51种系序列的包含一个或多个突变的序列，任选地其中所述VL1
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51种系序列是SEQ ID NO:156中所示的。在一些实施方案中，所述一个或多个突变选自：基于Kabat编号的氨基酸替代S2A、T5N、P8S、A12G、A13S和P14L中的一个或多个；基于Kabat编号的氨基酸替代S2A、T5N、P8S、A12G、A13S和P14L；CDR1中包含氨基酸替代I29V和N32G的突变；CDR2中包含DNN取代为GDT的突变；CDR2中包含DNNKRP取代为GDTSRA的突变；或任何前项的组合。
[0015]在任何实施方案中的一些中，所提供的抗体是包含可变重链和可变轻链的抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包含与重链恒定结构域(CH1
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CH2
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CH3)连接的可变重链和与轻链恒定结构域(CL1)连接的可变轻链。在一些实施方案中，所述重链恒定结构域来本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其包含经修饰的超长CDR3，所述经修饰的超长CDR3包含替代牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的重链的超长CDR3区的至少一部分的白细胞介素
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15(IL
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15)细胞因子序列或其生物活性部分。2.根据权利要求1所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述IL
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15细胞因子序列是人IL
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15。3.根据权利要求1或权利要求2所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述IL
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15细胞因子序列包含与SEQ ID NO:1展现出至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述IL
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15细胞因子序列包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列。5.一种经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其包含经修饰的超长CDR3，所述经修饰的超长CDR3包含替代牛抗体或抗原结合片段或其人源化序列的重链的超长CDR3区的至少一部分的白细胞介素
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2(IL
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2)细胞因子序列或其生物活性部分。6.根据权利要求5所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述IL
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2细胞因子序列是人IL
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2。7.根据权利要求5或权利要求6所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述IL
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2细胞因子序列包含与SEQ ID NO:165展现出至少或至少约85％、至少或至少约90％、至少或至少约92％、至少或至少约95％、至少或至少约96％、至少或至少约97％、至少或至少约98％或者至少或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。8.根据权利要求5
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7中任一项所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述IL
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2细胞因子序列包含SEQ ID NO:165中所示的氨基酸序列。9.根据权利要求1
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8中任一项所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述细胞因子序列替代牛抗体或抗原结合片段的重链的超长CDR3区的至少一部分。10.根据权利要求9所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述牛抗体或抗原结合片段是牛抗体BLV1H12或其抗原结合片段。11.根据权利要求9或权利要求10所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述牛抗体或抗原结合片段包含由SEQ ID NO:5中所示序列编码的可变重链氨基酸序列和由SEQ ID NO:8中所示序列编码的可变轻链氨基酸序列。12.根据权利要求9或权利要求10所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述牛抗体或抗原结合片段包含由SEQ ID NO:167中所示序列编码的可变重链氨基酸序列和由SEQ ID NO:168中所示序列编码的可变轻链氨基酸序列。13.根据权利要求9或权利要求10所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述牛抗体或抗原结合片段包含SEQ ID NO:26中所示的可变重链和SEQ ID NO:27中所示的可变轻链。14.根据权利要求1
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8中任一项所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述细胞因子序列替代人源化牛抗体或其抗原结合片段的重链的超长CDR3区的至少一部分。15.根据权利要求14所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述人
源化牛抗体或其抗原结合片段包含作为人重链种系序列或源自人重链种系序列的重链或其一部分和作为人轻链种系序列或源自人轻链种系序列的轻链或其一部分。16.根据权利要求15所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述人重链种系序列是VH4
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39、VH4
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59*03、VH4
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34*02或VH4
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34*09种系序列或是SEQ ID NO:68
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71中任一个所示的序列。17.根据权利要求15或权利要求16所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述人轻链种系序列是VL1
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51种系序列或是基于所述VL1
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51种系序列的包含一个或多个突变的序列，任选地其中所述VL1
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51种系序列是SEQ ID NO:156中所示的。18.根据权利要求17所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述一个或多个突变选自：基于Kabat编号的氨基酸替代S2A、T5N、P8S、A12G、A13S和P14L中的一个或多个；基于Kabat编号的氨基酸替代S2A、T5N、P8S、A12G、A13S和P14L；CDR1中包含氨基酸替代I29V和N32G的突变；CDR2中包含DNN取代为GDT的突变；CDR2中包含DNNKRP取代为GDTSRA的突变；或任何前项的组合。19.根据权利要求1
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18中任一项所述的经细胞因子修饰的嵌合抗体或抗原结合片段，其中所述抗体是包含可变重链和...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：米诺陶治疗公司，
类型：发明
国别省市：