一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法技术

一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法，该方法包含以下步骤：(1)淫羊藿脂溶性成分提取；(2)淫羊藿油的分离；(3)淫羊藿多酚的分离纯化；(4)淫羊藿色素的分离纯化；(5)淫羊藿黄酮和生物碱的分离；(6)淫羊藿生物碱的纯化；(7)淫羊藿黄酮的分离纯化；(8)淫羊藿多糖的提取分离。本发明专利技术从淫羊藿全草中提取分离了淫羊藿油、色素、多糖、多酚、生物碱和黄酮苷，分离了黄酮苷中五种主要的成分：淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和宝藿苷I。本发明专利技术方法简单可行，工艺成本低廉，利于放大进行工业化生产。生产。

【技术实现步骤摘要】
一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法


[0001]一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法。
技术背景
[0002]淫羊藿又名仙灵脾，是小檗科(Berberidacea)淫羊藿属(Epimedium)多年生草本植物，全世界约有59种，中国约有48种，是全世界淫羊藿属植物的主要分布区之一。《中国药典》 (2020年版)收载淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum (Sieb.et Zucc.)Maxim)、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)、巫山淫羊藿(Epimediumwushanense T.S.Ying)和朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)5个种为正品。中药淫羊藿资源分布量的面积依次分别是箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.) Maxim)、淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim)、粗毛淫羊藿(E.acuminatum Maxim)、朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim)、黔岭淫羊藿(E.leptorrhizum Maxim)和巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)，将全国分为4个产区，按重要性分区分别是东北区，仅有朝鲜淫羊藿一种，质量最好；西北华北区，主要是淫羊藿，成分含量比较稳定；华东华南区，主要为箭叶淫羊藿，但种内质量差异很大；西南区，在贵州省，主流品种为粗毛淫羊藿，其次为黔岭淫羊藿，再其次为巫山淫羊藿，黔岭淫羊藿不可药用，在四川省，主流品种为粗毛淫羊藿和柔毛淫羊藿，该地区产量大，但品种复杂，应注意形态鉴别(中国中药杂志， 2003，28，303
‑
307)。
[0003]《中华本草》中记载淫羊藿别名刚前、仙灵脾、仙灵毗、黄连祖、放杖草、弃杖草、三叉风、桂鱼风、铁铧口、铁耙头、鲫鱼风、羊藿叶、羊角风、三角莲、乏力草、千两金、干鸡筋、鸡爪莲、三枝九叶草、牛角花、铜丝草、铁打杵、三叉骨、肺经草、铁菱角。为小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicorium Maxim)的茎叶，分布于内蒙古、北京、河北、山西、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆、安徽、河南、湖北、湖南、广西、四川等地。箭叶淫羊藿 (Epimedium sagittatum)的茎叶，分布于陕西、甘肃、江苏、安徽、浙江、江西、福建、中国台湾、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州等地。巫山淫羊藿(Epimedium wushanense)的茎叶，分布于陕西、广西、四川、贵州等地。朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)的茎叶，分布于黑龙江、吉林、辽宁等地。柔毛淫羊藿(Epimedium pubesens Maxim)的茎叶，分布于内蒙古、河北、陕西、甘肃、安微、浙江、江西、河南、湖北、四川、贵州等地。淫羊藿黄酮中5种代表性成分：
[0004]淫羊藿(Icariine)化学式：C
33
H
40
O
15
，分子量：676.66，CAS号：489
‑
32
‑
7，溶于乙醇、乙酸乙酯，不溶于醚、苯、氯仿，英文别名：Icariln；Iearline；Epimedium extract；Horny goat weedextract3
‑
[(6
‑
Deoxy
‑
alpha
‑
L
‑
mannopyranosyl)oxy]‑7‑
(beta
‑
D
‑
glucopyranosyloxy)
‑5‑
hydroxy
‑ꢀ2‑
(4
‑
methoxyphenyl)
‑8‑
(3
‑
methyl
‑2‑
buten
‑1‑
yl)
‑
4H
‑1‑
benzopyran
‑4‑
one2，6
‑
anhydro
‑1‑
deoxy
‑7‑
O
‑ꢀ
[7
‑
(beta
‑
D
‑
glucopyranosyloxy)
‑2‑
(4
‑
methoxyphenyl)
‑8‑
(3
‑
methylbut
‑2‑
en
‑1‑
yl)
‑4‑
oxo
‑
4H
‑
chrome n
‑3‑
yl]‑
L
‑
glycero
‑
L
‑
manno
‑
heptitol3
‑
[(6
‑
deoxy
‑
alpha
‑
L
‑
mannopyranosyl)oxy]‑5‑
hydroxy
‑2‑
(4
‑
met hoxyphenyl)
‑8‑
(3
‑
methylbut
‑2‑
en
‑1‑
yl)
‑4‑
oxo
‑
4H
‑
chromen
‑7‑
yl beta
‑
D
‑
glucopyranoside.
[0005]朝藿定A(Epimedin A)分子式：C
39
H
50
O
20
，分子量：838.80，CAS号：110623
‑
72
‑
8，别名：淫羊霍定A，英文别名：EpmedinA；4H
‑1‑
Benzopyran
‑4‑
one，3
‑
[(6
‑
deoxy
‑2‑
O
‑
β
‑
D
‑
glu copyranosyl
‑
α
‑
L
‑
mannopyranosyl)oxy]‑7‑
(β
‑
D
‑
glucopyranosyloxy)
‑5‑
hydroxy
‑2‑
(4
‑
methoxypheny l)
‑8‑
(3
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法，该方法包含以下步骤：(1)淫羊藿脂溶性成分提取；(2)淫羊藿油的分离；(3)淫羊藿多酚的分离纯化；(4)淫羊藿色素的分离纯化；(5)淫羊藿黄酮和生物碱的分离；(6)淫羊藿生物碱的纯化；(7)淫羊藿黄酮的分离纯化；(8)淫羊藿多糖的提取分离。2.一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法，其特征在于，步骤(1)中淫羊藿粉末加入提取溶剂，浸泡30～60min后，装入耐压、柔韧的软袋中，启动高压泵，将软袋内的空气排出后密封，然后放入超高压提取装置的提取容器中，在常温下进行提取，得到淫羊藿脂溶性提取液和滤渣；所述的提取溶剂为10～20倍量(w/w)的体积分数为80～90％的乙醇；然后放入超高压提取容器中，在常温下经升压、保压和泄压阶段进行提取；所述的升压阶段，在5～30min内将提取容器内的压强升高到100～600Mpa；所述的保压阶段，保持100～600Mpa的压强10～30min；所述的泄压阶段，在5～30s内迅速将压强泄为常压；所述的升压、保压、泄压阶段重复1～5次。3.一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法，其特征在于，步骤(2)中淫羊藿油的分离，将步骤(1)中所得淫羊藿脂溶性提取液，减压浓缩，得到浓缩液，浓缩液加水搅匀，得到固液混合物，微波辅助水蒸汽蒸馏，得到淫羊藿油和蒸馏残留物；所述的淫羊藿脂溶性提取液的浓缩，在真空度
‑
(82.7～90.6)KPa，温度50～60℃下浓缩成相对比重1.05～1.10；所述的固液混合物，浓缩液中加入10～20倍(w/w)纯化水，磁力搅拌下搅匀；所述的微波辅助水蒸汽蒸馏，微波功率1200～1500W，频率为2000MHz；所述的蒸馏得到的馏出液中加入少量氯化钠，静置分层；分离后的淫羊藿流入填充有无水硫酸钠的干燥柱中干燥。4.一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法，其特征在于，步骤(3)中淫羊藿多酚的分离纯化，将步骤(2)中所得蒸馏残留物，加入5～10倍(w/w)纯化水，加热至40～70℃充分搅匀，过滤，得到不溶物和滤液，所得滤液为淫羊藿多酚，滤液经酸化后，通过大孔树脂吸附分离；所述的滤液用用质量百分比浓度18％的盐酸调节pH值2～4，得到上柱液；所述的大孔树脂吸附分离，将上柱液通过大孔吸附树脂柱吸附多酚，未吸附的成分流出柱体，待上柱液全部过柱后，用去离子水冲洗柱体，去除杂质，直至洗脱液清亮，柱体再用体积分数为50～80％的乙醇洗脱多酚，得到乙醇洗脱液，乙醇洗脱液在压力
‑
(0.08～0.09)MPa、温度40℃～50℃下浓缩至浸膏，浸膏在温度为50℃～70℃条件下干燥5～10h后制得淫羊藿多酚。5.一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法，其特征在于，步骤(4)中淫羊藿色素的分离纯化，将步骤(3)中所得不溶物干燥，加入1～3倍(w/w)石油醚提取3次，得到石油醚液和不溶物，石油醚液为淫羊藿色素，在压力
‑
(0.08～0.09)MPa、温度40℃～50℃下浓缩至浸膏，得到淫羊藿色素。6.一种淫羊藿有效成分的集成化综合提取分离方法，其特征在于，步骤(5)中淫羊藿黄酮和生物碱的分离，将步骤(4)中所得不溶物以乙醇溶解，调节pH值2～4，得到溶解液，在溶
解液中加入(NH4)2SO4，使得(NH4)2SO4的浓度为10～20wt％，然后加入乙醇，使得乙醇的浓度为30～40wt％，体系pH为4～5，得到双水相体系，静置分相后得到上相和下相，收集上相得到淫羊藿黄酮溶液，下相为生物碱溶液；和/或，在溶解液中加入K2HPO4，使得K2HPO4的浓度为20～30wt％，然后加入丙酮，使得丙酮的浓度为30～40wt％，体系pH为4～5，得到双水相体系，静置分相后得到上相和下相，收集上相得到淫羊藿黄酮溶液，下相为生物碱溶液；和/或，在溶解液中加入Na2SO4，使得Na2SO4的浓度为20～30wt％，然后加入正丙醇，使得正丙醇的浓度为20～30wt％，体系pH为4～5，得到双水相体系，静置分相后得到上相和下相，收集上相得到淫羊藿黄酮溶液，下相为生物碱溶液；和/或，在溶解液液中加入CaCl2，使得CaCl2的浓度为20～30wt％，然后加入异丙醇，使得异丙醇的浓度为20～30wt％，体系pH为4～5，得到双水相体系，静置分相后得到上相和下相，收集上相得到淫...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉山，
申请(专利权)人：李玉山，
类型：发明
国别省市：