一种糖基化芦丁的制备方法技术

一种糖基化芦丁的制备方法，所述的糖基化芦丁为葡糖基芦丁，其制备包括步骤如下：(1)糖基受体芦丁溶液制备；(2)糖基供体溶液制备；(3)糖基化反应；(4)反应液脱酶处理；(5)脱酶处理液的分离纯化；(6)浓缩，冷冻干燥。制备出含量96～99％，总收率95～102％的葡糖基芦丁冻干粉，方法简便。方法简便。

【技术实现步骤摘要】
一种糖基化芦丁的制备方法


[0001]一种糖基化芦丁的制备方法。

技术介绍

[0002]葡糖基芦丁(Glucosylrutin)分子式C
33
H
40
O
21
，分子量772.65800，CAS号：130603
‑
71
‑
3英文同词：a
‑
Glucosylrutin；4(G)
‑
alpha
‑
glucopyranosyl
‑
rutin；4H
‑1‑
Benzopyran
‑4‑
one，3
‑
[(O
‑6‑
deoxy
‑
α
‑
L
‑
mannopyranosyl
‑
(1
→
6)
‑
O
‑
[α
‑
D
‑
glucopyranosyl
‑
(1
→
4)]‑
β
‑
D
‑
glucopyranosyl)oxy]‑2‑
(3，4
‑
dihydroxyphenyl)
‑
5，7
‑
dihydroxy
‑
；3
‑
(6
‑
O
‑
(6
‑r/>Deoxy
‑
alpha.
‑
L
‑
mannopyranosyl
‑
O
‑
(alpha.
‑
D
‑
glucopyranosyl)
‑
(beta.
‑
D
‑
glucopyranosyl)oxy)
‑2‑
(Chemicalbook3，4
‑
dihydroxyphenyl)5，7
‑
dihydroxy
‑
4H
‑1‑
benzopyran
‑4‑
on；2
‑
(3，4
‑
dihydroxyphenyl)
‑3‑
[(2S，3R，4R，5S，6R)
‑
3，4
‑
dihydroxy
‑5‑
[(2R，3R，4S，5S，6R)
‑
3，4，5
‑
trihydroxy
‑6‑
(hydroxymethyl)oxan
‑2‑
yl]oxy
‑6‑
[[(2R，3R，4R，5R，6S)
‑
3，4，5
‑
trihydroxy
‑6‑
methyloxan
‑2‑
yl]oxymethyl]oxan
‑2‑
yl]oxy
‑
5，7
‑
dihydroxychromen
‑4‑
one
[0003]葡糖基芦丁的水溶性是芦丁的1.2万倍，具有极强的活性氧消除能力，具有极强的自由基清除能力。皮肤的光老化导致失去弹性蛋白和胶原蛋白，伴随这黑斑、细纹、皱纹和皮肤弹性的丧失，让我们失去了自然年轻的外观。葡糖基芦丁结合紫外线吸收的特性，可以保护表皮和真皮免受紫外线的伤害，减少红斑、皱纹，让皮肤不会再受紫外线影响的困扰。葡糖基芦丁是预防皮肤光老化和延缓衰老以及抗蓝光的的理想化合物，在抗衰老的化妆品和保健品中有非常广泛的运用。在化妆品里的运用：眼霜、晚霜、精华、面膜、防晒类产品、晒后损伤修复、水溶性防晒产品等。
[0004][0005]全球范围内，葡糖基芦丁核心厂商主要包括浙江英沃迪、安易科、广州家化化学和Toyo Sugar Refining Grou等。2021年，全球第一梯队厂商主要有浙江英沃迪、安易科、广州家化化学和Toyo Sugar Refining Grou。CFDA已批准使用的化妆品原料名称目录(第一
批)。利用生物酶工程技术
‑
糖苷化技术对芦丁分子结构进行修饰而制得葡糖基芦丁，使水溶性提高，更有利于应用。应用于法国仙婷SETHIC RUTINAGE P/安肤芦丁。葡糖基芦丁是高度稳定、无味的芦丁衍生物，具有较高的水溶性。第一个已知的通过抑制PLE皮肤对紫外线的反应来预防日光性过敏反应的成分。

技术实现思路

[0006]一种糖基化芦丁的制备方法，所述的糖基化芦丁为葡糖基芦丁，其制备包括步骤如下：(1)糖基受体芦丁溶液制备；(2)糖基供体溶液制备；(3)糖基化反应；(4)反应液脱酶处理；(5)脱酶处理液的分离纯化；(6)浓缩，冷冻干燥。
[0007]所述的糖基化芦丁的制备方法，步骤(1)中糖基受体芦丁溶液制备，糖基受体芦丁溶于二甲基亚砜中，配成初始浓度为1～2mg
·
mL
‑1。
[0008]所述的糖基化芦丁的制备方法，步骤(2)中糖基供体溶液制备，最佳糖基供体为α
‑
或β
‑
或γ
‑
环糊精，溶于pH7.4磷酸缓冲盐溶液中，配成初始浓度为30～40mg
·
mL
‑1。
[0009]所述的糖基化芦丁的制备方法，步骤(3)中糖基化反应，糖基受体芦丁与糖基供体在环糊精葡萄糖基转移酶催化下进行糖基化反应，反应结束后灭酶处理，得到糖基化反应液；
[0010]所述的糖基化催化剂为环糊精葡萄糖基转移酶；
[0011]所述的糖基受体与糖基供体体积比为2∶6；
[0012]所述的最适反应温度45～60℃，最佳反应体系pH值为6.0～8.0，最优反应时间为24～30h；
[0013]所述的α
‑
环糊精葡萄糖基转移酶溶液活力为80～100U/mL；
[0014]所述的灭酶80～90℃，时间5～15min。
[0015]所述的糖基化芦丁的制备方法，步骤(4)中反应液脱酶处理，将步骤(3)所得糖基化反应液经两次超滤，去除反应液中的酶，合并滤过液，得到脱酶反应液；
[0016]所述的超滤膜截留分子量为10000～50000Da；
[0017]所述的超滤压力为0.06～0.22MPa；
[0018]所述的第一次超滤截留液与滤过液的体积比为1∶6～7(v/v)；
[0019]所述的第二次超滤截留液与滤过液的体积比为1∶7～10(v/v)。
[0020]所述的糖基化芦丁的制备方法，步骤(5)中脱酶处理液的分离纯化，以大孔树脂吸附分离，大孔树脂湿法装入树脂柱，水洗涤平衡后，将脱酶处理液加入树脂柱，以0.5mL/本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种糖基化芦丁的制备方法，所述的糖基化芦丁为葡糖基芦丁，其制备包括步骤如下：(1)糖基受体芦丁溶液制备；(2)糖基供体溶液制备；(3)糖基化反应；(4)反应液脱酶处理；(5)脱酶处理液的分离纯化；(6)浓缩，冷冻干燥。2.一种糖基化芦丁的制备方法，其特征在于，步骤(1)中糖基受体芦丁溶液制备，糖基受体芦丁溶于二甲基亚砜中，配成初始浓度为1～2mg
·
mL
‑1。3.一种糖基化芦丁的制备方法，其特征在于，步骤(2)中糖基供体溶液制备，最佳糖基供体为α
‑
或β
‑
或γ
‑
环糊精，溶于pH7.4磷酸缓冲盐溶液中，配成初始浓度为30～40mg
·
mL
‑1。4.一种糖基化芦丁的制备方法，其特征在于，步骤(3)中糖基化反应，糖基受体芦丁与糖基供体在环糊精葡萄糖基转移酶催化下进行糖基化反应，反应结束后灭酶处理，得到糖基化反应液；所述的糖基化催化剂为环糊精葡萄糖基转移酶；所述的糖基受体与糖基供体体积比为2∶6；所述的最适反应温度45～60℃，最佳反应体系pH值为6.0～8.0，最优反应时间为24～30h；所述的α
‑
环糊精葡萄糖基转移酶溶液活力为80～100U/mL；所述的灭酶80～90℃，时间5～15min。5.一种糖基化芦丁的制备方法，其特征在于，步骤(4)中反应液脱酶处理，将步骤(3)所得糖基化反应液经两次超滤，去除反应液中的酶，合并滤过液，得到脱酶反应液；所述的超滤膜截留分子量为10000～50000Da；所述的超滤压力为0.06～0...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉山，
申请(专利权)人：李玉山，
类型：发明
国别省市：