一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法及其应用。该制备方法通过将需做冰冻的组织块用冷冻包埋胶包埋；将包埋好的组织块放入冷冻切片机内粗修，至组织最大横径或者所需的组织切面，然后试着出片，判断脂肪所处位置是否影响切片质量；如果脂肪所处位置会导致皱褶，翻折，甚至无法切片，取鬃毛刷在切面上来回搓扫，此过程中毛刷的毛会扎入脂肪组织并带走脂肪组织，留下凹凸不平的凹坑；接着细修将整个面使其平整，保证被毛刷损伤的非脂肪组织区域组织平整；利用冷冻包埋胶回填至凹坑内，待自然凝固或加速凝固后，利用切片机细修掉上面的溢胶，暴露整个切面，随后出片、贴片、染色。该方法简单易操作，能明显提高整体的切片质量。的切片质量。的切片质量。

【技术实现步骤摘要】
一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及一种术中冰冻切片方法，特别涉及一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]术中冰冻可以快速得到初步的病理结果，由于脂肪组织的凝固温度(指的是该温度下组织凝固并且使组织达到足够硬度足以支撑切片的温度，脂肪组织的凝固温度为
‑
40℃至
‑
50℃)比其他组织的凝固温度低很多，在正常冷冻温度(
‑
18℃至
‑
22℃)时，此时脂肪组织达不到切片硬度(未达到凝固温度)而无法切片，会导致切片时脂肪组织所在区域出现空洞使周围组织缺乏支撑及牵拉，出现无法切片或者组织切片容易褶皱的情况，切片质量降低，最终影响术中病理诊断结果。
[0003]术中前哨淋巴结活检，可以决定手术方式；淋巴结被大量脂肪组织包裹，即使病理医师在取材时可以剔除绝大多数的脂肪(特别是乳腺的前哨淋巴结易脂肪化而无法剔除淋巴结内部的脂肪)，但剩下少量的脂肪，也会导致切片出现翻折、褶皱而影响诊断。
[0004]肿瘤转移至腹膜形成的腹膜结节或转移至网膜的网膜结节富含脂肪，正常冰冻切片做法难以制片，无法确定其来源，让临床无法确定是否需要进行腹部清扫。
[0005]即便术中病理结果至关重要，但至今，病理
对于含脂肪或富含脂肪的组织在进行冰冻切片时仍没有好的办法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法。
[0007]本专利技术的另一目的在于提供上述含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法的应用。
[0008]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法，包括如下步骤：
[0009]一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法，具体包括如下步骤：
[0010](1)将需做冰冻的组织块用冷冻包埋胶包埋；
[0011](2)将包埋好的组织块放入冷冻切片机内粗修，至组织最大横径或者所需的组织切面，然后试着出片，判断脂肪所处位置是否影响切片质量；
[0012](3)如果脂肪所处位置会导致皱褶，翻折，甚至无法切片，取鬃毛刷在切面上来回搓扫，此过程中毛刷的毛会扎入脂肪组织并带走脂肪组织，留下凹凸不平的凹坑；接着细修将整个面(除凹坑外的其他地方)使其平整，保证被毛刷损伤的非脂肪组织区域(在凝固温度处于凝固状态，此过程几乎无损伤)组织平整；
[0013](4)利用冷冻包埋胶回填至凹坑内，待自然凝固或加速凝固后，利用切片机细修掉上面的溢胶，暴露整个切面，随后出片、贴片、染色。
[0014]步骤(1)中所述的组织包括含脂肪或富含脂肪的组织，如前哨淋巴结、网膜结节。
[0015]步骤(1)中所述的包埋的具体操作优选为：首先将冷冻包埋胶包裹在组织表面，并放置在包埋托上，再放入冰冻切片机内使冷冻包埋胶凝结。
[0016]步骤(2)中所述的组织切面指的是病变部位足够暴露达到诊断所需的切面。
[0017]步骤(3)中所述的鬃毛刷包括猪鬃毛刷、马鬃毛刷等；优选为硬鬃毛刷；更优选为硬猪鬃毛刷。
[0018]步骤(3)中所述的取鬃毛刷在切面上来回搓扫的具体步骤优选为：鬃毛刷在同一个组织块切面上搓扫后，需用医用酒精消毒、清洗，可避免残余组织(不同病例之间)的污染。
[0019]上述含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法可用于术中冰冻，制备用于诊断的切片；也可用于制备组织标本，用于研究。
[0020]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0021]1、本专利技术利用不同凝固温度结合使用鬃毛刷，可以轻松的将脂肪组织剔除掉且不会破损伤非脂肪组织或损伤很小。
[0022]2、本专利技术由于采用冷冻包埋胶回填，将剔除脂肪后出现的凹坑填平后，可提高组织块切片的完整性。
[0023]3、本专利技术中鬃毛刷每使用一次，用医用酒精消毒、清洗，可避免残余组织(不同病例之间)的污染。
[0024]4、比起之前含脂肪或富含脂肪的组织无法完整切片或无法切片，通过本专利技术提供方法，可明显提高整体的切片质量，有利于病理的分析、诊断。
附图说明
[0025]图1是本专利技术提供的制备方法的流程示意图。
[0026]图2是将脂肪剔除后的组织块照片图；其中，
①
表示非脂肪组织区域，
②
表示脂肪组织区域。
[0027]图3是冷冻包埋胶补胶后细修至所需切面的照片图，其中；
①
表示非脂肪组织区域；
③
表示脂肪组织剔除后补胶的区域。
[0028]图4是图3染色后的照片图；其中，图内A、B互为镜像，其中B为原始照片，A为镜像照片；
①
表示非脂肪组织区域，
②
表示脂肪组织区域。
[0029]图5是使用不同切片方法的前后效果对比图；其中，A为常规方法，B为本专利技术使用方法。
具体实施方式
[0030]下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。
[0031]实施例1
[0032]一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法，流程图如图1所示，具体包括如下步骤：
[0033](1)将需做冰冻的组织块(根据诊断需求所取的组织块)用冷冻包埋胶(亦称为冷
冻包埋剂，樱花品牌)包埋，具体步骤如下：首先挤出冷冻包埋胶，包裹在需做冰冻的组织块表面，并放置在包埋托(冰冻组织的承载托，俗称冰冻托，是一种必备工具)上，再放入冰冻切片机内使冷冻包埋胶凝结(冷冻包埋胶室温下为粘稠透明状，凝固后为白色固体)。
[0034](2)将包埋好的组织块放入冷冻切片机内粗修，至组织最大横径或者病变部位足够暴露达到诊断所需的组织切面，然后试着出片，判断脂肪所处位置是否影响切片质量；
[0035](3)如果脂肪所处位置会导致翻折、皱褶，甚至无法切片，取硬猪鬃毛刷(白猪鬃毛制成的刷)在切面上来回搓扫，此过程中毛刷的毛会扎入脂肪组织并带走脂肪组织，留下凹凸不平的凹坑，之后稍微细修将整个面(除凹坑外的其他地方)使其平整，保证被毛刷损伤的非脂肪组织区域组织平整，如图2所示。随后利用冷冻包埋胶回填至凹坑内，待自然凝固或使用吸热锤(购买冰冻切片机时自带的类似于锤子的工具，亦称冷冻锤)加速凝固后，利用切片机细修掉上面的溢胶，暴露整个切面(如图3所示)，随后出片、贴片、染色。染色结果如图4所示。
[0036]实施例2
[0037](1)常规方法：将需做冰冻的组织块(根据诊断需求所取的组织块)用冷冻包埋胶包埋；将包埋好的组织块放入冷冻切片机内粗修，至组织最大横径或者所需的组织切面，出片；此时由于脂肪组织的存在，导致切片出现翻折、皱褶(如图5中A所示)，降低切片质量，影响术中冰冻病理诊断结果的准确性。
[0038](2)使本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法，其特征在于具体包括如下步骤：(1)将需做冰冻的组织块用冷冻包埋胶包埋；(2)将包埋好的组织块放入冷冻切片机内粗修，至组织最大横径或者所需的组织切面，然后试着出片，判断脂肪所处位置是否影响切片质量；(3)如果脂肪所处位置会导致皱褶，翻折，甚至无法切片，取鬃毛刷在切面上来回搓扫，此过程中毛刷的毛会扎入脂肪组织并带走脂肪组织，留下凹凸不平的凹坑；接着细修将整个面使其平整，保证被毛刷损伤的非脂肪组织区域组织平整；(4)利用冷冻包埋胶回填至凹坑内，待自然凝固或加速凝固后，利用切片机细修掉上面的溢胶，暴露整个切面，随后出片、贴片、染色。2.根据权利要求1所述的含脂肪或富含脂肪的组织冰冻切片的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的组织为前哨淋巴结、腹膜结节、网膜结节。3.根据权利要求1所述的含脂肪或富含脂肪的组...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖华东，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心中山大学附属肿瘤医院，中山大学肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：