药物配制品制造技术

本披露描述了稳定的水性配制品，其包含例如双特异性抗体构建体、缓冲液、糖和表面活性剂，该配制品的pH是4.8

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】药物配制品


[0001]本披露属于稳定的双特异性抗体构建体配制品的领域。
[0002]通过引用并入
[0003]通过援引以其全文并入的是与本文同时提交的计算机可读核苷酸/氨基酸序列表，并且其标识如下：名为“54910_Seqlisting.txt”的ASCII(文本)文件，345,249字节，创建于2020年4月28日。

技术介绍

[0004]基于蛋白质的药物是临床(前)开发和商业产品中增长最快的治疗剂之一。与小化学药物相比，蛋白质药物在相对低的浓度下具有高特异性和活性，并且典型地提供对高影响疾病的疗法，这些高影响疾病是例如各种癌症、自身免疫疾病、和代谢障碍(Roberts,Trends Biotechnol.[生物技术趋势]2014年7月；32(7):372
‑
80,Wang,Int J Pharm.[国际药学杂志]1999年8月20日；185(2):129
‑
88)。
[0005]由于商业规模纯化方法的进步，因此现在可以在首次制造时以高纯度获得基于蛋白质的药物，例如重组蛋白质。然而，蛋白质仅临界稳定(marginally stable)并且极易受到化学和物理降解二者的影响。化学降解是指涉及共价键的修饰，如脱酰胺化、氧化、裂解、剪切/片段化、形成新的二硫桥键、水解、异构化或去糖基化。物理降解包括蛋白质去折叠、对表面的不希望的吸附、和聚集。处理这些物理和化学不稳定性是蛋白质药物开发中最具挑战性的任务之一(Chi等人,Pharm Res[药物研究],第20卷，第9期,2003年9月,第1325
‑
1336页,Roberts,Trends Biotechnol.[生物技术趋势]2014年7月；32(7):372
‑
80)。
[0006]由于化学和酶的原因，基于蛋白质的药物在制造过程或储存期间可能会发生剪切(片段化)。剪切是不希望的，因为它代表了亲本多肽的降解，并且在治疗性多肽的情况下，则可能降低效力。在生物学和生物技术应用中保持蛋白质稳定性和活性面临严重挑战。本领域需要优化的药物配制品，其提供治疗性蛋白的增强的稳定性并减少在配制、填充、运输、储存和施用期间的剪切、聚集、变性或降解，从而防止功能丧失和不良免疫原性反应。

技术实现思路

[0007]包括同时结合两种(或更多种)不同抗原的双特异性(和/或多特异性)抗体(例如双特异性T细胞接合抗体构建体)的基于蛋白质的药物易于发生蛋白质不稳定。这延伸到包含半衰期延长形式(HLE形式)的那些抗体构建体，这些半衰期延长形式包括单链Fc形式(称为scFc)、异Fc(也称为hetFc或异源二聚体Fc、hFc)形式和人血清白蛋白的融合(也称为HSA或hALB)。
[0008]蛋白质不稳定，并且特别是剪切(片段化)，是生物技术行业面临的日益严峻的挑战。在液体配制品中，所有双特异性抗体构建体都容易剪切。剪切产生双特异性抗体构建体的低分子量(LMW)物质，并且导致无活性多肽。在更低(即更酸性的)pH液体配制品中，双特异性抗体构建体的剪切倾向于增加，但是聚集倾向于减少。在更高(即更碱性的)pH液体配
制品中，双特异性抗体构建体的聚集倾向于增加，但是剪切倾向于减少。
[0009]出乎意料地，本披露鉴定了液体双特异性抗体构建体配制品的优化pH范围，该pH范围允许液体配制品在各种储存条件下保持稳定。例如，本文所提供的实例鉴定了液体配制品的特定pH范围(即pH 4.8
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5.5)，其中当储存时，例如在如2
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8℃或40℃下，双特异性抗体构建体的剪切(即，％低分子量物质的量)和液体配制品中双特异性抗体构建体的聚集(即％高分子量物质)两者均减少。如本文所述实例中所示，将pH在4.8
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5.5范围内的液体配制品中的双特异性抗体构建体的剪切和聚集水平与pH在pH 4.8
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5.5范围以外(即pH 4.2或pH 7.4)的液体配制品中的剪切和聚集水平进行比较。因此，当在相同的储存条件下时，与pH在该范围以外(例如，pH 4.2或pH 7.4)的情况下，包含双特异性抗体构建体的液体配制品相比，包含双特性抗体构建体并且pH范围在约pH 4.8至约5.5(例如，pH 5.2)的液体药物配制品更稳定，并且表现出改善的结构完整性。
[0010]在一个方面，本文所述的是一种稳定的水性药物配制品，其包含本文所述的双特异性抗体构建体、缓冲液、糖、和表面活性剂，其中药物配制品的pH范围为从4.8至5.5。在一些实施例中，配制品的pH范围为从4.5至5.3。在一些实施例中，配制品的pH为5.2。
[0011]在一些实施例中，在约40℃下储存一个月后，配制品包含双特异性抗体构建体的少于约10％(例如，9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或更少)的低分子量(LMW)物质。
[0012]在一些实施例中，在约2
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8℃下储存一个月后，配制品包含双特异性抗体构建体的少于约10％(例如，9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或更少)的低分子量(LMW)物质。
[0013]在一些实施例中，在约40℃下储存一个月后，配制品包含双特异性抗体构建体的少于约5％(例如，4％、3％、2％、1％或更少)的高分子量(HMW)物质。
[0014]在一些实施例中，在约2
‑
8℃下储存一个月后，配制品包含双特异性抗体构建体的少于约5％(例如，4％、3％、2％、1％或更少)的高分子量(HMW)物质。
[0015]在一些实施例中，在约40℃下储存一个月后，配制品中双特异性抗体构建体的相对效力大于约30％(例如，约35％、40％、50％、55％、60％或更多)。
[0016]在一些实施例中，完整分子(即，主峰物质)在配制品中的百分比大于配制品中总蛋白质含量的95％。
[0017]在一些实施例中，双特异性抗体构建体包含与靶细胞表面抗原结合的第一结合结构域、与T细胞的表面上的人CD3结合的第二结合结构域。在一些实施例中，双特异性抗体构建体进一步包含第三结构域，该第三结构域以氨基到羧基顺序包含铰链
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CH2结构域
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CH3结构域
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接头
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铰链
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CH2结构域
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CH3结构域。在一些实施例中，双特异性抗体构建体的第一结合结构域和第二结合结构域中的每一者包含VH区和VL区。
[0018]在一些实施例中，双特异性抗体构建体是单链抗体构建体。
[0019]在一些实施例中，双特异性抗体构建体与靶细胞表面抗原(例如CDH19、MSLN、DLL3、FLT3、EGFRvlll、BCMA、PSMA、CD33、CD19、CD70、CLDN18.2或MUC17)结合。
[0020]在一些实施例中，双特异性抗体构建体的第一结合结构域包含以下列出的一组6个CDR：(a)SEQ ID NO:本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种稳定的水性药物配制品，其包含(a)双特异性抗体构建体，(b)糖，(c)表面活性剂，和(d)缓冲液，其中该配制品的pH是从约4.8至约5.5。2.如权利要求1所述的配制品，其中该配制品的pH是从约4.8至约5.3。3.如权利要求1或2所述的配制品，其中该配制品的pH是约5.2。4.如权利要求1
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3中任一项所述的配制品，其中该糖是单糖或二糖。5.如权利要求1
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4中任一项所述的配制品，其中该糖是葡萄糖、半乳糖、果糖、木糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、山梨糖醇、甘露糖醇或木糖醇。6.如权利要求1
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5中任一项所述的配制品，其中该表面活性剂是非离子型表面活性剂。7.如权利要求1
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6中任一项所述的配制品，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407或曲拉通x
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100。8.如权利要求7所述的配制品，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。9.如权利要求7所述的配制品，其中该表面活性剂是泊洛沙姆188或泊洛沙姆407。10.如权利要求1
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9中任一项所述的配制品，其中该缓冲液是乙酸盐缓冲液、谷氨酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、乳酸缓冲液、琥珀酸盐缓冲液、酒石酸盐缓冲液、富马酸盐缓冲液、马来酸盐缓冲液、组氨酸缓冲液或磷酸盐缓冲液。11.如权利要求1
‑
10中任一项所述的配制品，其中该配制品包含浓度为从约0.1mg/ml至约20mg/ml的该双特异性抗体构建体。12.如权利要求1
‑
12中任一项所述的配制品，其中该双特异性抗体构建体包含与靶细胞表面抗原结合的第一结合结构域和与T细胞表面上的人CD3结合的第二结合结构域。13.如权利要求12所述的配制品，其进一步包含第三结构域，该第三结构域以氨基到羧基顺序包含铰链
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CH2结构域
‑
CH3结构域
‑
接头
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铰链
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CH2结构域
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CH3结构域。14.如权利要求13所述的配制品，其中该第一结合结构域和第二结合结构域中的每一者包含VH区和VL区。15.如权利要求13或权利要求14所述的配制品，其中该双特异性抗体构建体是单链抗体构建体。16.如权利要求12
‑
15中任一项所述的组合物，其中该靶细胞表面抗原是CDH19、MSLN、DLL3、FLT3、EGFR、EGFRvlll、BCMA、PSMA、CD33、CD19、CD70、MUC17或CLDN18.2。17.如权利要求12
‑
16中任一项所述的组合物，其中该双特异性抗体构建体的第一结合结构域包含以下列出的一组6个CDR：(a)SEQ ID NO:24
‑
29，(b)SEQ ID NO:34
‑
39，(c)SEQ ID NO:78
‑
83，(d)SEQ ID NO:10
‑
15，(e)SEQ ID NO:46
‑
51，(f)SEQ ID NO:88
‑
93，(g)SEQ ID NO:67
‑
72，(h)SEQ ID NO:56
‑
61，(i)SEQ ID NO:112
‑
117，(j)SEQ ID NO:100
‑
105，(k)SEQ ID NO:148
‑
153、SEQ ID NO:157
‑
162、或SEQ ID NO:166
‑
171、或SEQ ID NO:175
‑
180，(l)SEQ ID NO:132
‑
137，或(m)123
‑
128。18.如权利要求12
‑
17中任一项所述的组合物，其中该双特异性抗体构建体的第二结合
结构域包含SEQ ID NO:1
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6中列出的一组6个CDR。19.如权利要求12
‑
18中任一项所述的组合物，其中该第一结合结构域包含：(a)VH区，该VH区包含SEQ ID NO:30中列出的氨基酸序列，以及VL区，该VL区包含SEQ ID NO:31中列出的氨基酸序列；(b)VH区，该VH区包含SEQ ID NO:40中列出的氨基酸序列，以及VL区，该VL区包含SEQ ID NO:41中列出的氨基酸序列；(c)VH区，该VH区包含SEQ ID NO:84中列出的氨基酸序列，以及VL区，该VL区包含SEQ ID NO:85中列出的氨基酸序列；(d)VH区，该VH区包含SEQ ID NO:...

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：安进公司，
类型：发明
国别省市：