一种多孔纳米金传感器制造技术

本发明专利技术公开了一种多孔纳米金传感器，其技术方案要点是：多孔纳米金传感器，其特征在于：包括多孔纳米金电极、参比电极和对电极，所述多孔纳米金电极的表面设置有L

【技术实现步骤摘要】
一种多孔纳米金传感器


[0001]本专利技术涉及免疫传感器领域，特别涉及一种多孔纳米金传感器。

技术介绍

[0002]肝癌是病死率最高的恶性肿瘤之一。甲胎蛋白抗原为重要的肿瘤标志物之一。
[0003]免疫传感器是将高灵敏度的传感器技术与特异性免疫反应结合起来，用以监测抗原
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抗体反应的生物传感器。其基本的工作原理是：采用电化学检测方法来检测标记的免疫试剂或一些由酶、金属离子和其他活性物质标记的标记物，从而对疾病诊断或病人状态检测中复杂体系的多组分混合物进行分析，提供有力的数据。由于电流性免疫传感器的高选择性、高灵敏度等特点，其应用越来越广泛。
[0004]现有公开号为CN203965377U的中国专利，其公开了一种电化学免疫传感器，其电极表面的中心有抗苏氨酸磷酸裂合酶的抗体，所述抗体优选单克隆抗体，所述传感器优选含有双层纳米金膜，其电极优选玻碳电极，是以壳聚糖为桥联剂固定第一层纳米金于玻碳电极并吸附固定抗苏氨酸磷酸裂合酶的抗体，以滴电极方式将硫堇
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壳聚糖/纳米金
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辣根过氧化物酶(HRP)复合物固定于电极，并吸附抗苏氨酸磷酸裂合酶的抗体，构建双层纳米金修饰的苏氨酸磷酸裂合酶电化学免疫传感器。
[0005]上述的这种电化学免疫传感器可以用来检测食品中沙门氏菌和/或志贺氏菌，能够对沙门氏菌和/或志贺氏菌实现快速定量检测；但是上述的这种电化学免疫传感器依旧存在着一些缺点，如：无法在一定程度上分析检测抗原浓度的大小，且该传感器选择性差、灵敏度不高。

技术实现思路

[0006]针对
技术介绍
中提到的问题，本专利技术的目的是提供一种多孔纳米金传感器，以解决
技术介绍
中提到的问题。
[0007]本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
[0008]一种多孔纳米金传感器，包括多孔纳米金电极、参比电极和对电极，所述多孔纳米金电极的表面设置有L
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半胱氨酸层、戊二醛层、鼠抗甲胎蛋白抗体层和小牛血清蛋白层，所述小牛血清蛋白层的表面滴加有甲胎蛋白抗原层，所述甲胎蛋白抗原层表面设置有过氧化氢酶标记的鼠抗甲胎蛋白二抗层。
[0009]较佳的，所述参比电极为银/氯化银参比电极。
[0010]较佳的，所述对电极为铂对电极。
[0011]较佳的，所述多孔纳米金电极连接有绿色接头，所述参比电极连接有白色接头，所述对电极连接有红色接头。
[0012]较佳的，所述鼠抗甲胎蛋白二抗为经过磷酸缓冲溶液清洗的鼠抗甲胎蛋白二抗。
[0013]综上所述，本专利技术主要具有以下有益效果：
[0014]本专利技术选择了多孔纳米金电极作为工作电极，同时将L
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半胱氨酸层连接在多孔纳
米金电极的表面，并在其表面交联有戊二醛层、鼠抗甲胎蛋白抗体层，并利用小牛血清蛋白层封闭了多孔纳米金电极上的非特异性位点，阻碍了抗原与金电极上的点位的进一步结合。利用鼠抗甲胎蛋白抗体层与甲胎蛋白抗原层的特异性吸附，甲胎蛋白抗原层与过氧化氢酶标记的鼠抗甲胎蛋白二抗层的连接，然后催化过氧化氢氧化底物，即可检测出生成物的电化学信号，从而能够间接获知抗原浓度与响应电流之间的关系。该免疫传感器具有制作简单、操作便捷、选择性好、灵敏度高和响应快等特点。
附图说明
[0015]图1是对氨基酚的催化产物的机理图；
[0016]图2是过氧化氢氧化对氨基酚的机理图；
[0017]图3是过氧化氢氧化邻苯二胺的机理图；
[0018]图4是底物浓度配比分析图；
[0019]图5是免疫电极在修饰过程中的交流阻抗谱图；
[0020]图6是酶催化反应产物的差分脉冲伏安(DPV)图之一；
[0021]图7是酶催化反应产物的差分脉冲伏安(DPV)图之二；
[0022]图8是抗原浓度为50ng/mL的差分脉冲伏安(DPV)图；
[0023]图9是对氨基苯酚催化氧化的DPV响应电流线性关系；
[0024]图10是邻苯二胺催化氧化的DPV响应电流线性关系；
[0025]图11抗原浓度为0.1ng/mL时的DPV图。
具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1
[0028]参考图1
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图11，一种多孔纳米金传感器，包括多孔纳米金电极、参比电极和对电极，多孔纳米金电极的表面设置有L
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半胱氨酸层、戊二醛层、鼠抗甲胎蛋白抗体层和小牛血清蛋白层，小牛血清蛋白层的表面滴加有甲胎蛋白抗原层，甲胎蛋白抗原层表面设置有过氧化氢酶标记的鼠抗甲胎蛋白二抗层。
[0029]其中，参比电极为银/氯化银参比电极。
[0030]其中，对电极为铂对电极。
[0031]其中，多孔纳米金电极连接有绿色接头，参比电极连接有白色接头，对电极连接有红色接头。
[0032]其中，鼠抗甲胎蛋白二抗为经过磷酸缓冲溶液清洗的鼠抗甲胎蛋白二抗。
[0033]综上分析可知：本专利技术选择了多孔纳米金电极作为工作电极，同时将L
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半胱氨酸层连接在多孔纳米金电极的表面，并在其表面交联有戊二醛层、鼠抗甲胎蛋白抗体层，并利用小牛血清蛋白层封闭了多孔纳米金电极上的非特异性位点，阻碍了抗原与金电极上的点位的进一步结合。利用鼠抗甲胎蛋白抗体层与甲胎蛋白抗原层的特异性吸附，甲胎蛋白抗
原层与过氧化氢酶标记的鼠抗甲胎蛋白二抗层的连接，然后催化过氧化氢氧化底物，即可检测出生成物的电化学信号，从而能够间接获知抗原浓度与响应电流之间的关系。该免疫传感器具有制作简单、操作便捷、选择性好、灵敏度高和响应快等特点。
[0034]实施例2
[0035]参考图1
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图11，本实施例重点说明多孔纳米金电极的制备流程，流程如下：
[0036]1、先将沉积好的金电极泡入60％的硝酸溶液后，于50℃的烘箱中反应2 个小时，拿出后用二次水清洗，(去合金法)；
[0037]2、在沉积液中，以金电极为工作电极，Ag
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AgCl电极为参比电极，Pt电极为对电极，电化学工作站恒电位沉积，选择电流
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时间曲线，设置好参数，当恒电位Q达到0.05C时，停止沉积；其中沉积液的组成为：
[0038]0.05mol/L的KAg(CN)2，
[0039]0.05mol/L的KAu(CN)2，
[0040]0.2mol/L的Na2CO3；
[0041]3、将普通金电极表面在氧化铝粉上打磨抛光，先乙醇超声后，再用二次水超声。
[0042]实施例3
[0043]参考图1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多孔纳米金传感器，其特征在于：包括多孔纳米金电极、参比电极和对电极，所述多孔纳米金电极的表面设置有L
‑
半胱氨酸层、戊二醛层、鼠抗甲胎蛋白抗体层和小牛血清蛋白层，所述小牛血清蛋白层的表面滴加有甲胎蛋白抗原层，所述甲胎蛋白抗原层表面设置有过氧化氢酶标记的鼠抗甲胎蛋白二抗层。2.根据权利要求1所述的一种多孔纳米金传感器，其特征在于：所述参比电极为银...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈燕婷，沈红霞，张立秋，周芮，郑钰凡，余静玲，何涛，
申请(专利权)人：嘉兴学院，
类型：发明
国别省市：