高血压动物模型的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高血压动物模型的制备方法，向动物的肾周脂肪内注入化学性刺激物质。本发明专利技术仅仅采用单次肾周脂肪内给予刺激物质，经过4周即获得稳定的高血压动物模型，本发明专利技术克服了现有的药物诱导模型的低成模率、模型不稳定等缺点，具有100％成模率，血压上升幅度可调节等特点，通过控制刺激物质的剂量既可以获得血压显著升高的高血压模型，又可以获得血压轻度升高的高血压前期模型。本发明专利技术与现有的自发性高血压大鼠模型相比，避免了遗传基因突变等造成了早发性、固有性高血压，与临床高血压的发病过程更加相似，且本发明专利技术的分级型高血压模型是自发性高血压模型无法实现的。压模型是自发性高血压模型无法实现的。压模型是自发性高血压模型无法实现的。

【技术实现步骤摘要】
高血压动物模型的制备方法


[0001]本专利技术涉及高血压动物模型的制备方法，属于疾病动物模型领域。

技术介绍

[0002]原发性高血压的成因十分复杂，目前仅已知各类常见的危险因素包括高钠盐摄入、肥胖和代谢性紊乱等可促进高血压的发生。然而这些危险因素的单一或混合作用也仅仅能诱导一部分动物和人类产生稳定的高血压。以动物模型为例，长时间(通常10
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16周)的高盐饮食和高脂肪、高糖饮食诱导大鼠的高血压发生率不足50％，且停止上述饮食后，动物的高血压多数可明显下降或恢复到正常水平。很显然此类单纯的饮食干预方法并不能有效复制发生在人类中的高血压。而采用升压激素类物质如糖皮质激素、盐皮质激素和血管紧张素等诱导的高血压模型只能模拟人类的继发性高血压，不能反应原发性高血压的形成过程和对机体的不良影响。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种可稳定制备高血压动物模型的方法。
[0004]本专利技术采取的技术方案为：一种高血压动物模型的制备方法，向动物的肾周脂肪内注入化学性刺激物质。
[0005]优选的，所述化学性刺激物质为辣椒素、完全弗氏佐剂、三磷酸腺苷、白介素6。给药方式可以是持续泵入或一次性注入。
[0006]优选的，所述动物为大鼠。
[0007]优选的，所述肾周脂肪为动物的单侧或双侧肾周脂肪。
[0008]优选的，给药后每周测量动物的血压，直至高血压动物模型形成。
[0009]本专利技术仅仅采用单次肾周脂肪内给予刺激物质，经过4r/>‑
6周即获得稳定的高血压动物模型，本专利技术克服了现有的药物诱导模型(如高盐饮食、高脂肪饮食、皮质激素等)的低成模率、模型不稳定等缺点，具有100％成模率，血压上升幅度可调节等特点，通过控制刺激物质例如完全弗氏佐剂的剂量既可以获得血压显著升高的高血压模型，又可以获得血压轻度升高的高血压前期模型。本专利技术与现有的自发性高血压大鼠模型相比，避免了遗传基因突变等造成了早发性、固有性高血压，与临床高血压的发病过程更加相似，且本专利技术的分级型高血压模型是自发性高血压模型无法实现的。
附图说明
[0010]图1：采用辣椒素持续泵入后的高血压成模过程。
[0011]图2：采用三磷酸腺苷持续泵入后的高血压成模过程。
[0012]图3：采用白介素6持续泵入后的高血压成模过程。
[0013]图4：采用完全弗氏佐剂一次注射后的高血压成模过程
。
[0014]其中saline为盐水对照，cap为辣椒素，ATP为三磷酸腺苷，IL
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6为白介素6，CFA指
完全弗氏佐剂SBP为收缩压，DBP为舒张压，MAP为平均动脉压。
具体实施方式
[0015]为更进一步阐述本专利技术为实现预定专利技术目的所采取的技术手段及功效，以下结合附图及较佳实施例，对依据本专利技术的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如后。
[0016]血压测试方法：血压经小动物血压监测仪((Kent Scientific Corporation,CT,USA))测量尾动脉所得。大鼠在28度加热板上稳定10
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20分钟，经仪器检测8
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12次，求得平均值。
[0017]实施例1
[0018]一.肾周脂肪内辣椒素微量泵持续刺激诱导高血压模型
[0019](1)微量注射泵(2006型号,Alzet，美国)的前端金属管与PE50管连接，PE50管长度7
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8cm，前端剪一豁口，PE50管前端伸入SD大鼠的肾周脂肪并固定；
[0020](2)通过微量注射泵，向SD大鼠的肾周脂肪部位持续灌注浓度为0.1nmol/μl的辣椒素溶液(辣椒素购自Sigma公司，美国)，直至高血压模型形成，本实施例中给药时间为6周；对照组灌注saline，其他同辣椒素组。
[0021](3)初次给药后进行血压测量，结果如图1所示，可以看出，在灌注1周后血压开始升高，持续升高6周，在第7周后血压稳定。
[0022]实施例2
[0023](1)微量注射泵(2006型号,Alzet，美国)的前端金属管与PE50管连接，PE50管长度7
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8cm，前端剪一豁口，PE50管前端伸入SD大鼠的肾周脂肪并固定；
[0024](2)通过微量注射泵，向SD大鼠的肾周脂肪部位持续灌注浓度为3.5nmol/ul的ATP溶液(ATP购自Sigma公司，美国)，直至高血压模型形成，本实施例中给药时间为6周；对照组灌注saline，其他同ATP组。
[0025](3)初次给药后进行血压测量，结果如图2所示，可以看出，在灌注1周后血压开始升高，持续升高6周，在第7周后血压稳定。
[0026]实施例3
[0027](1)微量注射泵(2006型号,Alzet，美国)的前端金属管与PE50管连接，PE50管长度7
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8cm，前端剪一豁口，PE50管前端伸入SD大鼠的肾周脂肪并固定；
[0028](2)通过微量注射泵，向SD大鼠的肾周脂肪部位持续灌注浓度为1nmol/ul的IL
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6溶液(IL
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6购自R&D公司，美国)，直至高血压模型形成，本实施例中给药时间为6周；对照组灌注saline，其他同IL
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6组。
[0029](3)初次给药后进行血压测量，结果如图3所示，可以看出，在灌注1周后血压开始升高，持续升高6周，在第7周后血压稳定。
[0030]实施例4
[0031](1)用微量注射器于SD大鼠双侧肾周脂肪内均匀注射完全弗氏佐剂(浓度为1mg/ml；Sigma，美国)，按照单侧剂量分别低、中、高三个剂量组，低剂量组单侧注射5ul(5点/侧脂肪；1μ/点；)，中剂量组单侧注射10ul，高剂量组单侧注射15ul。
[0032](2)给药后每周进行血压测量，结果如图2所示，可以看出，血压在注射1周开始升高，并稳定在高血压状态，持续观察6周。血压升高呈现剂量依赖性关系：给药15ul的模型血
压升高最为明显，其次是10ul、5ul。
[0033]以上所述，仅是本专利技术的较佳实施例而已，并非对本专利技术作任何形式上的限制，虽然本专利技术已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本专利技术，任何本领域技术人员，在不脱离本专利技术技术方案范围内，当可利用上述揭示的
技术实现思路
做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本专利技术技术方案内容，依据本专利技术的技术实质对以上实施例所作的任何简介修改、等同变化与修饰，均仍属于本专利技术技术方案的范围内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高血压动物模型的制备方法，其特征在于：向动物的肾周脂肪内注入化学性刺激物质。2.根据权利要求1所述的高血压动物模型的制备方法，其特征在于：所述化学性刺激物质为辣椒素、完全弗氏佐剂、三磷酸腺苷或白介素6。3.根据权利要求2所述的高血压动物模型的制备方法，其特征在于：化学性刺激物质的注入方式为持续泵入或一次...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙伟，李鹏，孔祥清，
申请(专利权)人：江苏省人民医院南京医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：