一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，该方法包括指纹图谱检测方法和含量测定方法；指纹图谱检测方法包括：步骤1、供试品溶液的制备；步骤2、混合对照品溶液的制备；步骤3、分别精密吸取供试品与对照品溶液注入液相色谱图仪，记录色谱图；步骤4、将抗感合剂的指纹图谱仪器导出，并导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版”软件中，建立指纹图谱，并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注指纹图谱中峰的化学成分。本发明专利技术建立的抗感合剂指纹图谱，能全面、客观地评价中药复方制剂的质量。并且该方法具有稳定性好、准确度高、重复性好、精密度高等优点。点。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法


[0001]本专利技术属于中药检测
，具体地说，涉及一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法。

技术介绍

[0002]病毒性上呼吸道感染是内科常见病、多发病，诱发的病毒多种多样，最被国人们所熟知的便是2003年的SARS和目前仍在蔓延的新型冠状病毒(COVID
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19)，其具有着患病率高、流行广泛、传播迅速的特点。从上世纪起，全球暴发的大流感疫症已致数百万人被其引发的肺部感染等并发症夺去了生命，现已成为人类面临的主要公共健康问题之一。
[0003]中医治疗病毒感染性发热主要采用辛凉解表、辛温解表、清暑除湿解表、清肺解热和清气凉营(血)等方法拟定系列方药辨证论治。
[0004]抗感合剂为江苏省中医院的院内制剂，本中药复方制剂为2003年非典时期由江苏省中医院国医大师徐景藩教授及多位名老中医针对病毒疫情特点共同拟方开发而成，全方由金银花、连翘、薄荷、桔梗、苦杏仁、拳参、板蓝根、绵马贯众、升麻、荆芥、川芎、甘草十二味中药组成，方中轻清宣透药与清热解毒药相配伍，而非仅用辛凉解表之品，体现了邪袭肺卫证当早用重用清气法之意。该中药复方制剂2004年完成药学、药理、毒理研究，制定江苏省食品药品医疗机构制剂质量标准；2006年获江苏省食品药品监督管理局注册批准。在临床应用10年，特别在是非典、禽流感、甲型H1N1流感、普通流感暴发季节，作为我院病房及江苏省发热门诊的一线用药，在退热、改善流感和感冒症状，治疗病毒性上呼吸道感染等方面，取得了较好的临床疗效。
[0005]目前关于抗感合剂的质量检测方法还未建立，本专利技术建立该中药制剂的HPLC指纹图谱检测方法和含量测定方法，指认主要成分，可以为全面评价和控制抗感合剂质量及临床应用提供参考依据。

技术实现思路

[0006]专利技术目的：本专利技术的目的是为了克服现有技术的不足，开发一种关于治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法(简称抗感合剂)，通过本专利技术的方法可以客观、正确、有效的控制抗感合剂的质量，对确保其安全性与有效性，保证临床质量具有重要的指导意义。
[0007]技术方案：为实现以上目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0008]一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，它包括以下步骤：
[0009]步骤1：供试品溶液的制备
[0010]取不同批次的中药复方制剂，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀，过0.22μm滤膜，即得；
[0011]步骤2：混合对照品溶液的制备
[0012]分别取绿原酸、芦丁、槲皮素、升麻素苷、异阿魏酸、甘草酸、木犀草素、阿魏酸、连翘苷、木犀草苷、甘草苷、连翘酯苷A、新绿原酸、异绿原酸A、咖啡酸和马钱苷对照品适量，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀，制备成混合对照品溶液，0.22μm滤膜滤过，即得；
[0013]步骤3、色谱图测定
[0014]分别吸取步骤1的供试品溶液和步骤2的混合对照品溶液，注入HPLC得到供试品溶液的色谱图和混合对照品溶液的色谱图；
[0015]步骤4、指纹图谱的建立
[0016]将步骤3中获得的供试品溶液的指纹图谱导出，并导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版”软件中，设置S1为参照图谱，采用平均数法，时间窗宽度为0.1，经过多点校正后自动匹配，生成对照图谱R，该图谱作为本中药复方制剂的标准指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。
[0017]作为优选方案，以上所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，还包括含量测定方法，具体包括以下步骤：
[0018]步骤1：取不同批次的中药复方制剂，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀，过0.22μm滤膜，即得；
[0019]步骤2：混合对照品溶液的制备
[0020]分别取绿原酸、连翘酯苷A和甘草酸对照品适量，置容量瓶中，加入50％甲醇，超声溶解，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，制成绿原酸、连翘酯苷A和甘草酸的混合对照品溶液，0.22μm滤膜滤过，即得；
[0021]步骤3：标准曲线的建立
[0022]取步骤2混合对照品溶液，加50％甲醇依次稀释得到5个不同浓度的混合对照品溶液，然后注入HPLC，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标建立标准曲线方程；
[0023]步骤4：取步骤1的供试品溶液注入HPLC，将色谱图的峰面积代入步骤3的标准曲线方程，计算供试品中对应的有效成分含量。
[0024]作为优选方案，以上所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，步骤1、供试品溶液的制备方法为：中药复方制剂的制备：按重量份数取金银花150g、连翘150g、薄荷50g、桔梗30g、苦杏仁60g、拳参150g、板蓝根150g、绵马贯众60g、升麻60g、荆芥50g、川芎30g和甘草30g，加适量水浸泡后，煎煮提取1～3次，合并提取液，减压浓缩，即得。
[0025]作为优选方案，以上所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，步骤2混合对照品溶液的制备方法为：分别取绿原酸、芦丁、槲皮素、升麻素苷、异阿魏酸、甘草酸、木犀草素、阿魏酸、连翘苷、木犀草苷、甘草苷、连翘酯苷A、新绿原酸、异绿原酸A、咖啡酸和马钱苷对照品适量，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀后分别取1mL置25mL容量瓶中，50％甲醇定容至刻度，制成每1mL含绿原酸35.64μg、芦丁91.76μg、槲皮素92.12μg、升麻素苷51.56μg、异阿魏酸72.32μg、甘草酸17.6μg、木犀草素44.96μg、阿魏酸66.40μg、连翘苷70.40μg、木犀草苷59.72μg、甘草苷
62.76μg、连翘酯苷A52.32μg、新绿原酸46.08μg、异绿原酸A 47.48μg、咖啡酸45.24μg、马钱苷56.19μg的混合对照品溶液，0.22μm滤膜滤过，即得。
[0026]作为优选方案，以上所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，步骤2：混合对照品溶液的制备方法为：分别取绿原酸、连翘酯苷A和甘草酸对照品适量，置10mL容量瓶中，加入50％甲醇，超声20min，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，分别制成每1mL含绿原酸0.891mg、连翘酯苷A1.308mg和甘草酸0.44mg的对照品溶液，0.22μm滤膜滤过，即得。
[0027]作为优选方案，以上所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，HPLC测定时的色谱条件为：色谱柱：Agilent Proshell 120SB
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aq色谱柱，规格为4.6mm
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，其特征在于，它包括以下步骤：步骤1：供试品溶液的制备取不同批次的中药复方制剂，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀，过0.22μm滤膜，即得；步骤2：混合对照品溶液的制备分别取绿原酸、芦丁、槲皮素、升麻素苷、异阿魏酸、甘草酸、木犀草素、阿魏酸、连翘苷、木犀草苷、甘草苷、连翘酯苷A、新绿原酸、异绿原酸A、咖啡酸和马钱苷对照品适量，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀，制备成混合对照品溶液，0.22μm滤膜滤过，即得；步骤3、色谱图测定分别吸取步骤1的供试品溶液和步骤2的混合对照品溶液，注入HPLC得到供试品溶液的色谱图和混合对照品溶液的色谱图；步骤4、指纹图谱的建立将步骤3中获得的供试品溶液的指纹图谱导出，并导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版”软件中，设置S1为参照图谱，采用平均数法，时间窗宽度为0.1，经过多点校正后自动匹配，生成对照图谱R，该图谱作为本中药复方制剂的标准指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。2.根据权利要求1所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，其特征在于，还包括含量测定方法，具体包括以下步骤：步骤1：取不同批次的中药复方制剂，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀，过0.22μm滤膜，即得；步骤2：混合对照品溶液的制备分别取绿原酸、连翘酯苷A和甘草酸对照品适量，置容量瓶中，加入50％甲醇，超声溶解，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，制成绿原酸、连翘酯苷A和甘草酸的混合对照品溶液，0.22μm滤膜滤过，即得；步骤3：标准曲线的建立取步骤2混合对照品溶液，加50％甲醇依次稀释得到5个不同浓度的混合对照品溶液，然后注入HPLC，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标建立标准曲线方程；步骤4：取步骤1的供试品溶液注入HPLC，将色谱图的峰面积代入步骤3的标准曲线方程，计算供试品中对应的有效成分含量。3.根据权利要求1或2所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，其特征在于，步骤1、供试品溶液的中药复方制剂的制备方法为：按重量份数取金银花150g、连翘150g、薄荷50g、桔梗30g、苦杏仁60g、拳参150g、板蓝根150g、绵马贯众60g、升麻60g、荆芥50g、川芎30g和甘草30g，加适量水浸泡后，煎煮提取1～3次，合并提取液，减压浓缩，即得。4.根据权利要求1所述的一种治疗病毒性上呼吸道感染的中药复方制剂的质量检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备方法为：分别取绿原酸、芦丁、槲皮素、升麻素
苷、异阿魏酸、甘草酸、木犀草素、阿魏酸、连翘苷、木犀草苷、甘草苷、连翘酯苷A、新绿原酸、异绿原酸A、咖啡酸和马钱苷对照品适量，置容量瓶中，加入适量50％甲醇，超声，放至室温后用50％甲醇定容至刻度，摇匀后分别取1mL置25mL容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹恺平，刘炜，倪文澎，刘顺，
申请(专利权)人：江苏省中医院，
类型：发明
国别省市：