通过破坏SAGA(Spt-Ada-Gcn5-乙酰转移酶)复合物来增强CD8+T细胞的活化和溶细胞活性的组合物和方法技术

本发明专利技术提供增加T细胞群中的T细胞效应功能的方法，所述方法涉及抑制所述T细胞群中SAGA(Spt

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过破坏SAGA(Spt
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Ada
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Gcn5
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乙酰转移酶)复合物来增强CD8
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T细胞的活化和溶细胞活性的组合物和方法
[0001]本专利申请要求2020年4月7日提交的美国临时专利申请63/006,455的优先权。


[0002]本申请涉及增加CD8
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T细胞的活化、增殖或溶细胞活性的方法。

技术介绍

[0003]SAGA复合物
[0004]SAGA(Spt
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Ada
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Gcn5
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乙酰转移酶)复合物是一种进化保守的多功能共活化因子，其包含19个亚基[1]。它被组织成具有不同活性的独立模块，含有结构核心、组蛋白乙酰转移酶(HAT)、组蛋白去泛素酶(DUB)和活化因子结合模块[2]。SAGA和其相关复合物参与了几种不同的信号传导途径，主要是通过两个染色质修饰酶模块刺激转录，并通过递送TATA盒结合蛋白(TBP)使DNA上的起始前复合物成核，这是蛋白质编码基因的表达中的一个关键事件[1]。
[0005]蛋白质编码基因的转录始于包含RNA聚合酶II和几种通用转录因子的起始前复合物(PIC)的形成。除了SAGA，另一种多蛋白复合物转录因子IID(TFIID)也可将TBP递送至基因启动子，并且是酵母中的全局基因表达所必需的。最近的研究表明SAGA的作用比TFIID更具体。例如，SAGA主导的启动子往往具有一致的TATA盒，是更应激调节/可诱导的基因，并且往往受到更严格的调节[3]。在删除SPT3(SAGA的一个与TBP相互作用的亚基)后，Huisinga等人表明，与TBP相关因子1(Taf1)调节的基因相比，仅约10％的酵母基因的总mRNA水平降低[4]，Taf1是TFIID的一个亚基，降低了大约90％的酵母基因。这导致了两种不同基因类别之间的区别：(1)SAGA主导的基因，其受Spt3正向调节，但基本上不依赖Taf1，以及(2)更大类别(90％)的TFIID主导的基因，其更依赖于Taf1而不是Spt3[4]。因此，作为一个通用模型，有人提出TBP募集主要依赖于含TATA启动子的SAGA，但在TATA样(或无TATA)启动子中由TFIID主导(综述于[2]中)。尽管如此，中心模块已被证明在结构上与TFIID相关，表明两种复合物中的TBP结合具有一些共同特征。
[0006]Baptista等人最近的一项研究观察到SAGA耗尽后，大多数mRNA的半衰期补偿性增加，这解释了不同SAGA突变株中稳态mRNA水平的有限变化[5]。因此，SAGA耗尽后Pol II转录的减少通过增加mRNA半衰期得到补偿，如先前报道的Pol II和介体突变，或TFIIH中激酶活性的抑制。这些研究表明SAGA在启动转录中的重要性，并指出了当SAGA复合物的组分丢失时的补偿机制[5]。
[0007]CD8+T细胞活化
[0008]CD8+T细胞是适应性免疫系统的细胞。适应性免疫系统的主要特征是它能够对特定抗原(或外来病原体)行使免疫反应，并保留对抗原的记忆。CD8+T细胞对于免疫防御非常重要，不仅用于肿瘤监测，而且它们还能够递送细胞毒性剂以杀死受感染的细胞和肿瘤细胞[6]。
[0009]为了被活化并发挥其效应功能，初始抗原特异性CD8+T细胞需要两个信号以实现最佳活化：
[0010]信号1
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抗原识别
[0011]此信号通过带有肽:MHC I类复合物抗原的细胞的抗原呈递来递送，用T细胞受体(TCR)确保免疫反应的特异性。尽管TCR提供特异性，但它不具备细胞内信号传导的能力。然而，信号转导是通过与TCR相关的CD3分子递送的。CD3分子在其细胞质尾部中含有基于免疫受体酪氨酸的活化基序(ITAM)，以转导信号。TCR与其同源MHC I类的连接导致ITAM被Src家族激酶Lck和Fyn磷酸化。磷酸化ITAM作为形成由Lck和Fyn以及称为ζ相关蛋白激酶70(ZAP
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70)的Syk家族激酶构成的近端信号传导复合物的对接位点。通过这些途径的下游信号传导引起细胞内钙离子升高，最终导致磷酸酶钙调磷酸酶的活化。活化的钙调磷酸酶促进转录因子的活化T细胞核因子(NFAT)家族成员的去磷酸化。最终，TCR的参与触发下游信号传导级联，最终汇聚成转录因子的活化：NFkB、NFAT、AP1进入细胞核。总之，它们诱导特定的基因转录程序，导致细胞增殖和分化[7]。
[0012]信号2
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共刺激
[0013]为了支持TCR信号传导，第二共刺激信号用于促进T细胞的存活和扩增。在T细胞上发现的典型共刺激受体是CD28，其在大多数初始T细胞上组成型表达。CD28的配体是在抗原呈递细胞(APC)的表面上表达的CD80和CD86。发现CD28与TCR共定位在免疫突触的中心区域，从而增强了TCR连接后近端信号传导复合物处的事件。因此，与TCR信号传导一起，CD28可促进细胞因子产生、细胞循环、存活和分化[7,8]。
[0014]CD8+T细胞还展示除CD28之外的多种受体，用于共刺激信号传导。其它受体分子，例如程序性细胞死亡蛋白1(PD
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1)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA
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4)可替代地提供抑制信号，从而促进T细胞抑制而不是活化[9]。共刺激和共抑制受体在T细胞生物学中都具有重要作用，因为它们决定了T细胞受体(TCR)信号传导的功能结果；此外，对维持体内平衡也很重要[10]。

技术实现思路

[0015]在一个方面，提供了一种增加T细胞群中的T细胞效应功能的方法，所述方法包括抑制T细胞群的T细胞中SAGA(Spt
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Ada
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Gcn5
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乙酰转移酶)基因调节复合物的表达或功能。
[0016]在一个方面，提供了一种增加T细胞群中的T细胞效应功能的方法，所述方法包括抑制T细胞群的T细胞中SAGA基因调节复合物的一个或多个遗传亚基。一个或多个遗传亚基可选自ADA2B、CCDC101、TADA1、TAF5L、TAF6L、TAF10、SUPT7L和TRRAP。
[0017]在一个方面，提供了一种增加受试者的T细胞效应功能的方法，所述方法包括：使T细胞群与包含SAGA基因调节复合物的抑制剂的组合物离体接触；和向受试者施用治疗有效量的T细胞群。在一个实施方案中，受试者是被诊断患有癌症的患者。在一些实施方案中，癌症是血液学癌症。在一些实施方案中，癌症是白血病、淋巴瘤或骨髓瘤。在一些实施方案中，方法还包括向受试者施用癌症疗法，其可为免疫疗法。在一个实施方案中，方法包括向受试者施用免疫检查点抑制剂。
[0018]在所有上述方法中，T细胞均可为活化的CD8
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T细胞。
[0019]在各种实施方案中，相对于其中SAGA基因调节复合物不受抑制的T细胞群，所述方
法使T细胞中的SAGA基因调节复合物的活本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种增加T细胞群中的T细胞效应功能的方法，所述方法包括抑制所述T细胞群的T细胞中SAGA(Spt
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Ada
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Gcn5
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乙酰转移酶)基因调节复合物的表达或功能。2.一种增加T细胞群中的T细胞效应功能的方法，所述方法包括抑制所述T细胞群的T细胞中SAGA(Spt
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Ada
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Gcn5
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乙酰转移酶)基因调节复合物的一个或多个遗传亚基。3.如权利要求2所述的方法，其中所述一个或多个遗传亚基选自ADA2B、CCDC101、TADA1、TAF5L、TAF6L、TAF10、SUPT7L和TRRAP。4.一种增加受试者的T细胞效应功能的方法，所述方法包括：使T细胞群与包含SAGA基因调节复合物的抑制剂的组合物离体接触；和向所述受试者施用治疗有效量的所述T细胞群。5.如权利要求4所述的方法，其中所述受试者是被诊断患有癌症的患者。6.如权利要求5所述的方法，其中所述方法还包括向所述受试者施用癌症疗法。7.如权利要求6所述的方法，其中所述癌症疗法是免疫疗法。8.如权利要求7所述的方法，所述方法包括向所述受试者施用免疫检查点抑制剂。9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述T细胞是活化的CD8
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T细胞。10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中相对于其中所述SAGA基因调节复合物不受抑制的T细胞群，所述方法使所述T细胞中的所述SAGA基因调节复合物的活性降低至少70％、至少80％、至少90％或至少99％。11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述T细胞表达嵌合抗原受体(CAR)。12.如权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述抑制剂是小分子。13.如权利要求1至11中任一项所述的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：丹尼尔，
申请(专利权)人：大学健康网络，
类型：发明
国别省市：