结合CTLA4的抗体及其用途制造技术

本申请涉及一种与人CTLA4特异性结合的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分。还提供编码该抗体或其抗原结合部分的核酸分子，用于表达该抗体或其抗原结合部分的表达载体、宿主细胞和方法。本申请还提供包含抗体或其抗原结合部分的免疫偶联物、双特异性分子、嵌合抗原受体、溶瘤病毒、和药物组合物，以及使用CTLA4抗体或其抗原结合部分的治疗方法。其抗原结合部分的治疗方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】EL et al.，(2000)164：5319
‑
5327)。因此，CD28
‑
CD80/86结合相比于CTLA4
‑
CD80/86结合的相对量决定了T细胞将经历激活或失能(Krummel MF，and Allison JP.(1995)J ExpMed.182：459
‑
465)。此外，CTLA4可以通过CD80/CD86触发反向信号，引导吲哚胺
‑
2,3
‑
双加氧酶，造成色氨酸代谢和T细胞增殖抑制(Boasso A et al.，(2005)Blood 105：1574
‑
1581)。
[0007]CTLA4也表达于非T细胞，正常细胞或赘生性细胞(Laurent S et al.，(2010)Hum Immunol 71：934
‑
941；Contardi E et al.，(2005)Int J Cancer 117：538
‑
550)。在赘生性细胞中的持续性CTLA4表达，推进血液瘤和实体瘤的进程(Pistillo MP et al.，(2003)Blood 101：202
‑
209；Kosmaczewska A et al.，(2005)Leukemia 19：301
‑
304)，且已发现CTLA4通路阻断可有效减缓肿瘤生长(Leach DR et al.，(1996)271：1734
‑
1736；Hirano F et al.，(2005)Cancer Res.65：1089
‑
1096)。CTLA4抗体，伊匹单抗已经批准用于治疗黑色素瘤、结直肠癌、肝细胞癌、恶性胸膜间皮瘤、非小细胞肺癌和肾细胞癌。替西木单抗，另一CTLA4抗体，处于例如间皮瘤、黑色素瘤和肠癌治疗的临床试验中。CTLA4抗体也可以与PD
‑
1抗体和/或其他抗肿瘤剂联用。例如，同为CTLA4抗体的AGEN1884在临床中联合PD
‑
1抗体测试对于子宫颈癌、血管肉瘤、肌肉浸润性膀胱癌和软组织肉瘤(包括滑膜肉瘤、神经鞘肿瘤和分叶状肿瘤)的治疗(美国国家癌症研究所)。
[0008]研究进一步示出，CTLA4在例如人免疫缺陷病毒(HIV)的慢性感染中上调，而CTLA4单独疗法或与PD
‑
1抗体联用在临床试验中干扰HIV的持续存在(Thomas A Rasmussen et al.，(2021)Clinical Infectious Diseases ciaa1530；Colston E et al.，(2018)PLoS One 13(6)：e0198158)。伊匹单抗和纳武单抗也正处于治疗爱泼斯坦
‑
巴尔病毒(HHV
‑
4)感染的二期试验中。此外，临床前研究正在探索伊匹单抗在移植物抗宿主病(GVHD)、外周神经损伤和神经纤维瘤I型(冯雷克林霍曾氏病)中的效果。
[0009]当前正尝试努力发现更多的更有效或具有更理想特性的CTLA4结合部位。
[0010]本申请中任何文件的引用或标识，并不是承认这些文件是本申请的现有技术。

技术实现思路

[0011]本申请提供一种分离的单克隆抗体，例如小鼠源、人源、嵌合的或人源化的单克隆抗体，或其抗原结合部位，其与CTLA4(例如，人CTLA4和猴CTLA4)结合，且与现有技术CTLA4抗体例如伊匹单抗相比，具有相当(如果不是更高的话)的CTLA4结合亲和力、相当(如果不是更高的话)的对于CTLA4
‑
CD80/CD86相互作用的阻断活性、以及相当的促进T细胞反应的活性。
[0012]本申请的抗体或其抗原结合部分可以用于许多应用，包括CTLA4蛋白的检测以及CTLA4相关疾病的治疗和预防，例如肿瘤和感染性疾病。
[0013]因此，在一个方面，本申请涉及一种分离的单克隆抗体(例如小鼠源、嵌合的或人源化的抗体)或其抗原结合部分，其与CTLA4结合，具有i)重链可变区，其可以包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，其中该VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区可以分别包含与(1)SEQ ID NOs：1、2和3；(2)SEQ ID NOs：7、8和9；(3)SEQ ID NOs：1、2和13；(4)SEQ ID NOs：16、17和18；(5)SEQ ID NOs：22、23和24；(6)SEQ ID NOs：28、29和30；(7)SEQ ID NOs：22、34和24；(8)SEQ ID NOs：36、37和38；(9)SEQ ID NOs：42、43和44；或(10)SEQ ID NOs：48、49和
50具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；和或ii)轻链可变区，其可以包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区，其中该VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区可以分别包含与(1)SEQ ID NOs：4、5和6；(2)SEQ ID NOs：10、11和12；(3)SEQ ID NOs：14、5和15；(4)SEQ ID NOs：19、20和21；(5)SEQ ID NOs：25、26和27；(6)SEQ ID NOs：31、32和33；(7)SEQ ID NOs：35、26和27；(8)SEQ ID NOs：39、40和41；(9)SEQ ID NOs：45、46和47；或(10)SEQ ID NOs：51、52和53具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。
[0014]本申请的抗体或其抗原结合部分可以包含重链可变区和轻链可变区，重链可变区可以包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，轻链可变区可以包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区，其中VH CDR1区、VH CDR2区、VH CDR3区、VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区可以包含与(1)SEQ ID NOs：1、2、3、4、5和6；(2)SEQ ID NOs：7、8、9、10、11和12；(3)SEQ ID NOs：1、2、13、14、5和15；(4)SEQ ID NOs：16、17、18、19、20和21；(5)SEQ ID NOs：22、23、24、25、26和27；(6)SEQ ID NOs：28、29、30、31、32和33；(7)SEQ ID NOs：22、34、24、35、26和27；(8)SEQ ID NOs：36、37、38、39、40和41；(9)SEQ ID NOs：42、43、44、45、46和47；或(10)SEQ ID NOs：48、49、50、51、5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种结合细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，包含：i)重链可变区，其包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，其中该VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与(1)SEQ ID NOs：1、2和3；(2)SEQ ID NOs：7、8和9；(3)SEQ ID NOs：1、2和13；(4)SEQ ID NOs：16、17和18；(5)SEQ ID NOs：22、23和24；(6)SEQ ID NOs：28、29和30；(7)SEQ ID NOs：22、34和24；(8)SEQ ID NOs：36、37和38；(9)SEQ ID NOs：42、43和44；或(10)SEQ ID NOs：48、49和50具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；和/或ii)轻链可变区，其包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区，其中该VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与(1)SEQ ID NOs：4、5和6；(2)SEQ ID NOs：10、11和12；(3)SEQ ID NOs：14、5和15；(4)SEQ ID NOs：19、20和21；(5)SEQ ID NOs：25、26和27；(6)SEQ ID NOs：31、32和33；(7)SEQ ID NOs：35、26和27；(8)SEQ ID NOs：39、40和41；(9)SEQ ID NOs：45、46和47；或(10)SEQ ID NOs：51、52和53具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该重链可变区包含与SEQ ID NOs：54、55(X1＝A、X2＝V；X1＝A、X2＝A；X1＝G、X2＝V；X1＝G、X2＝A)、58、59(X1＝P、X2＝A、X3＝D；X1＝L、X2＝A、X3＝N；X1＝L、X2＝A、X3＝D；X1＝L、X2＝S、X3＝N)、62、64、66、68、70、72、74或76具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。3.如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该轻链可变区包含与SEQ ID NOs：56、57(X1＝S、X2＝M、X3＝R、X4＝Y；X1＝S、X2＝V、X3＝T、X4＝F；X1＝V、X2＝V、X3＝T、X4＝F)、60、61(X1＝T、X2＝V、X3＝F；X1＝V、X2＝P、X3＝F；X1＝V、X2＝P、X3＝Y)、63、65、67、69、71、73、75或77具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。4.如权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该重链可变区和该轻链可变区包含与(1)SEQ ID NOs：54和56；(2)SEQ ID NOs：55(X1＝A、X2＝V)和57(X1＝S、X2＝M、X3＝R、X4＝Y)；(3)SEQ ID NOs：55(X1＝A、X2＝A)和57(X1＝S、X2＝M、X3＝R、X4＝Y)；(4)SEQ ID NOs：55(X1＝G、X2＝V)和57(X1＝S、X2＝M、X3＝R、X4＝Y)；(5)SEQ ID NOs：55(X1＝G、X2＝A)和57(X1＝S、X2＝M、X3＝R、X4＝Y)；(6)SEQ ID NOs：55(X1＝A、X2＝V)和57(X1＝S、X2＝V、X3＝T、X4＝F)；(7)SEQ ID NOs：55(X1＝A、X2＝A)和57(X1＝S、X2＝V、X3＝T、X4＝F)；(8)SEQ ID NOs：55(X1＝G、X2＝V)和57(X1＝S、X2＝V、X3＝T、X4＝F)；(9)SEQ ID NOs：55(X1＝G、X2＝A)和57(X1＝S、X2＝V、X3＝T、X4＝F)；(10)SEQ ID NOs：55(X1＝A、X2＝V)和57(X1＝V、X2＝V、X3＝T、X4＝F)；(11)SEQ ID NOs：55(X1＝A、X2＝A)和57(X1＝V、X2＝V、X3＝T、X4＝F)；(12)SEQ ID NOs：55(X1＝G、X2＝V)和57(X1＝V、X2＝V、X3＝T、...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈明久，夏树开，
申请(专利权)人：博奥信生物技术南京有限公司，
类型：发明
国别省市：