一种利用HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，该检测方法芦荟宁A出峰时间分别为5.09min、6.43min，理论板数分别为3793、5579，分离度为4.0，芦荟宁A检出定量限能达到0.012mg/g，可用于芦荟药材中芦荟宁A的微量检测，精密度高、重现性好，分离效果好，可有效控制芦荟药材的安全性。效控制芦荟药材的安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种利用HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法


[0001]本专利技术涉及医药专利
，具体涉及一种利用HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法。

技术介绍

[0002]芦荟作为一种传统的常用中药，在食品、医药、美容保健等领域都得到了充分应用。随着科技的进步，人们对美容保健越来越重视。芦荟富含天然维生素、氨基酸等对人体有益的营养物质，且芦荟中富含芦荟多糖、酚类化合物等美容护肤的有效成分。这些物有效成分使得芦荟的美容功能愈加突出，而人们对美容保健方面的日渐重视，导致各种芦荟美容保健产品层出不穷。但是，随着人们对芦荟的研究越来越深入，芦荟在美容保健应用中引发的不良反应事件，使用后常反应出肤红肿、瘙痒、接触性皮炎(如红斑、丘疹、水疱)、皮肤刺激等症状或过敏反应，产生这一过敏反应可能是芦荟中的化学成分芦荟宁A具有光敏性，能诱发机体发生一定的致敏反应所致。
[0003]文献1：芦荟药材化学成分鉴定及UPLC指纹图谱分析，陈彤彤、于猛、李凤霞、秦玲玲、贾红梅、马百平、邹忠梅；公开了鉴定芦荟中的主要化学成分，建立UPLC特征指纹图谱，对市售15批次芦荟药材的质量进行评价。方法应用超高效液相色谱
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串联四极杆飞行时间质谱(UPLC
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Q
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TOF/MS)采集芦荟色谱质谱数据，并进行定性分析；UPLC色谱条件为：Waters CORTECS T3(100mm
×
2.1mm，1.6μm)色谱柱，柱温40℃，检测波长295nm，乙腈(0.1％甲酸)/>‑
水(0.1％甲酸)为流动相，体积流量0.3mL/min，梯度洗脱；Q
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TOF/MS条件为采用ESI离子源，负离子扫描模式，毛细管电压2.3kV，离子源温度100℃；利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件建立15批市售芦荟药材的UPLC特征指纹图谱，结论指纹图谱中的共有峰芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟宁B、芦荟糖苷A、芦荟糖苷B还可用于区分芦荟药材的植物基原。
[0004]文献1存在的技术问题：(1)只考察了鉴定芦荟中的主要化学成分的定性分析，不能精确、有效控制芦荟药材的安全性；(2)利用该UPLC特征指纹图谱法测定芦荟宁A的含量时，检出率极低，检出限量高，不能反应芦荟宁A含量较低的真实含量，易造芦荟用药安全隐患；(3)重复性差，杂质峰多，分离度差；(4)检测采用UPLC
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Q
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TOF/MS，检测成本高。
[0005]芦荟也是贵州良济药业有限公司拳头产品玫芦消痤膏的主要原料之一，产品质量安全更是重中之重，但目前没有针对芦荟药材中芦荟宁A的定量检测的方法，故不能更好把控玫芦消痤膏的安全性。
[0006]针对以上技术问题，需有效控制芦荟药材中芦荟宁A的含量，专利技术团队进行了大量的实验探究，通过对供试品溶液的提取溶剂、提取方式、提取时间及色谱条件的流动相及比例、波长、色谱柱等进行了系列的考察，研究出了一种利用HPLC检测芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，该方法芦荟宁A出峰时间分别为5.09min、6.43min，理论板数分别为3793、5579，分离度为4.0，该色谱条件用于芦荟药材中芦荟宁A测定时，芦荟宁A检出定量限能达到0.012mg/g，精密度高，重现性好，分离效果好，可有效检测芦荟药材中芦荟宁A的含量，保证
了玫芦消痤膏的安全性。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提供一种利用HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，所述测定方法可以应用于玫芦消痤膏药物及鲜芦荟汁的测定。
[0008]所述测定方法为：
[0009](1)对照品溶液的制备：精密称取芦荟宁A对照品8～12mg置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；
[0010](2)供试品溶液的制备：精密称取鲜芦荟汁30～40g置150ml锥形瓶中，加60～90％甲醇水50ml，超声20～40分钟，滤过，即得；
[0011](3)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱为岛津Shim
‑
Pack Scepter C
18 250
×
4.6mm，5μm；以比例为40～60:40～60的甲醇
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0.5～1.5％醋酸溶液为流动相；检测波长为296nm，柱温28～32℃；流速0.8～1.2ml/min；理论板数按芦荟宁A峰计算应不低于2000；
[0012](4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0013]优选的，
[0014]所述对照品溶液的制备为：精密称取芦荟宁A对照品9～11mg置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
[0015]进一步优选的，
[0016]所述对照品溶液的制备为：精密称取芦荟宁A对照品10.12mg置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
[0017]优选的，
[0018]所述供试品溶液的制备为：精密称取鲜芦荟汁32～38g，加65～85％甲醇水50ml，超声25～35min，滤过，即得。
[0019]进一步优选的，
[0020]所述供试品溶液的制备为：精密称取鲜芦荟汁35.15g，加80％甲醇水50ml，超声30min，滤过，即得。
[0021]优选的，
[0022]所述色谱条件与系统适用性试验为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱为岛津Shim
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Pack Scepter C
18 250
×
4.6mm，5μm；以比例为45～55:45～55的甲醇
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0.9～1.1％醋酸溶液为流动相；检测波长为296nm，柱温29～31℃；流速0.9～1.1ml/min；理论板数按芦荟宁A峰计算应不低于2000。
[0023]进一步优选的，
[0024]所述色谱条件与系统适用性试验为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱为岛津Shim
‑
Pack Scepter C
18 250
×
4.6mm，5μm；以比例为50:50的甲醇
‑
1.0％醋酸溶液为流动相；检测波长为296nm，柱温30℃；流速1.0ml/min；理论板数按芦荟宁A峰计算应不低于2000。
[0025]本专利技术所述色谱柱岛津Shim
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Pack Scepter C
18 250
×
4.6mm，5μm，还可以为菲罗
门Titank C
18 250
×
4.6mm，5μm。
[0026]本专利技术所述芦荟宁A出峰时间分别为5.09min、6.43min，理论板数分别为3793、5579，分离度为4.0。
[0027]有益效果
[0028]1.本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，其特征在于，所述测定方法为：(1)对照品溶液的制备：精密称取芦荟宁A对照品8～12mg置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；(2)供试品溶液的制备：精密称取鲜芦荟汁30～40g置150ml锥形瓶中，加60～90％甲醇水50ml，超声20～40分钟，滤过，即得；(3)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱为岛津Shim
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Pack Scepter C
18 250
×
4.6mm，5μm；以比例为40～60:40～60的甲醇
‑
0.5～1.5％醋酸溶液为流动相；检测波长为296nm，柱温28～32℃；流速0.8～1.2ml/min；理论板数按芦荟宁A峰计算应不低于2000；(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。2.根据权利要求1所述HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，其特征在于，步骤(1)所述对照品溶液的制备为：精密称取芦荟宁A对照品9～11mg置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。3.根据权利要求2所述HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，其特征在于，步骤(1)所述对照品溶液的制备为：精密称取芦荟宁A对照品10.12mg置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。4.根据权利要求1所述HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，其特征在于，步骤(2)所述供试品溶液的制备为：精密称取鲜芦荟汁32～38g，加65～85％甲醇水50ml，超声25～35min，滤过，即得。5.根据权利要求4所述HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A含量的方法，其特征在于，步骤(2)所述供试品溶液的制备为：精密称取鲜芦荟汁35.15g，加80％甲醇水50ml，超声30min，滤过，即得。6.根据权利要求1所述HPLC测定芦荟药材中芦荟宁A...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄丽清，龙尚祥，欧凌云，方超健，徐东，
申请(专利权)人：贵州良济药业有限公司，
类型：发明
国别省市：