KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤生长的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤生长的药物中的应用，本发明专利技术明确了KDM1A通过激活胆固醇代谢相关途径中的SREBP2、HMGCS1、HMGCR、SQLE基因的表达量，参与调控胶质母细胞瘤的胆固醇合成代谢重编程机制，在临床上可通过使用KDM1A抑制剂ORY

【技术实现步骤摘要】
KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤生长的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及肿瘤治疗
，具体涉及KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤生长的药物中的应用。

技术介绍

[0002]胶质母细胞瘤(GBM)是最常见的原发性脑肿瘤，是最具侵袭性的人类癌症，因其极强的侵袭性和异质性，导致难以治愈。肿瘤细胞代谢重编程的一个标志性特征是增加营养消耗，以满足能量、合成代谢和促进生存的需求。胆固醇合成途径是肿瘤维持恶性生长和转移所必须的，以胆固醇合成通路作为研究对象在肿瘤防治中具有重要的科学价值。目前肿瘤中胆固醇代谢重编程的相关的研究还比较少，机制也不清楚，尤其是关于胶质母细胞瘤中胆固醇代谢重编程的调控机制还尚不明确。KDM1A(组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1A)作为第一个被正式提出的甲基转移酶在细胞的代谢途径中起着关键作用，目前还没有证据指出KDM1A是否参与肿瘤细胞的胆固醇合成代谢途径调控。本专利技术探究KDM1A是否参与调控胶质母细胞瘤的胆固醇合成代谢重编程机制，以期进一步在临床上通过对胆固醇含量的干扰而对胶质母细胞瘤达到更好的治疗效果。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤生长的药物中的应用。
[0004]为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0005]1、KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤生长的药物中的应用。
[0006]本专利技术优选的，所述KDM1A抑制剂为ORY
‑
1001。
[0007]本专利技术优选的，所述KDM1A抑制剂为shRNA载体。
[0008]所述shRNA载体为Sh1Forward和Sh1Reverse，Sh2 Forward和Sh2Reverse退火形成双链后分别连入PLKO.1
‑
TRC载体的shRNA construct的AgeI酶切位点和EcoRI酶切位点处；
[0009]所述Sh1Forward核苷酸序列为：5
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‑3’
[0010]所述Sh1Reverse核苷酸序列为：5
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‑3’
[0011]所述Sh2 Forward核苷酸序列为：5
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‑3’
[0012]所述Sh2Reverse核苷酸序列为：5
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‑3’
。
[0013]本专利技术优选的，KDM1A抑制剂通过下调胶质母细胞瘤的胆固醇代谢相关途径中的SREBP2、HMGCS1、HMGCR、SQLE基因的表达量，从而降低胆固醇的合成量，抑制胶质母细胞瘤的生长。
[0014]本专利技术的有益效果在于：本专利技术明确了KDM1A通过激活胆固醇代谢相关途径中的SREBP2、HMGCS1、HMGCR、SQLE基因的表达量，参与调控胶质母细胞瘤的胆固醇合成代谢重编程机制，在临床上可通过使用KDM1A抑制剂ORY
‑
1001或shRNA载体，干扰胶质母细胞瘤的胆固醇代谢，从而对胶质母细胞瘤达到更好的治疗效果。
附图说明
[0015]为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图进行说明：
[0016]图1为DM1A与胆固醇合成途径基因的表达关联性(Spearman)分析；
[0017]图2为在LPDS的条件下，GBM的KDM1A和胆固醇代谢途径被激活；
[0018](A)LPDS条件下U87细胞KDM1A及胆固醇代谢途径基因表达情况；
[0019](B)LPDS条件下LN229细胞KDM1A及胆固醇代谢途径基因表达情况；
[0020]图3为下调KDM1A抑制GBM胆固醇代谢途径；
[0021](A)下调KDM1A对GBM细胞U87的胆固醇代谢途径基因表达情况的影响；
[0022](B)下调KDM1A对GBM细胞LN229的胆固醇代谢途径基因表达情况的影响；
[0023](C)ORY
‑
1001对GBM细胞胆固醇合成途径影响的蛋白水平分析；
[0024](D)下调KDM1A对GBM细胞胆固醇合成途径影响的蛋白水平分析；
[0025]图4为恢复KDM1A激活GBM胆固醇代谢途径；
[0026]图5为在LPDS的条件下，KDM1A不同表达量的GBM细胞KDM1A和胆固醇代谢途径被激活；
[0027](A)LPDS条件下U87细胞KDM1A及胆固醇代谢途径基因表达情况；
[0028](B)LPDS条件下LN229细胞KDM1A及胆固醇代谢途径基因表达情况；
[0029]图6为下调KDM1A导致GBM细胞中脂质含量降低(标尺长度为100px)。
具体实施方式
[0030]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本专利技术并能予以实施，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。
[0031]实施例1、KDM1A在胶质母细胞瘤中与胆固醇合成相关基因的表达呈正相关
[0032]基于基因表达谱数据动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis，GEPIA)公共数据库(http://gepia.cancer
‑
pku.cn/)，分析临床表达谱数据中KDM1A在GBM与多个脂肪酸和胆固醇合成途径相关基因，如：SREBP2、HMGCS1、HMGCR、SQLE等基因呈显著相关性(图1)，说明KDM1A与GBM的胆固醇合成途径密切相关，这为本项目的开展奠定了理论基础。
[0033]实施例2、KDM1A激活LPDS环境下GBM细胞的胆固醇合成途径
[0034]在正常细胞中，脂肪酸和胆固醇的合成主要发生在肝脏。由于血脑屏障的原因，GBM的脂类合成主要来自于自身合成以及从星形胶质细胞中摄取。为了研究GBM细胞中胆固醇合成途径是否可以被KDM1A激活，对GBM细胞进行脂蛋白缺乏血清(LPDS)处理，研究在外源缺乏脂类物质条件下，GBM细胞内的胆固醇合成途径被激活的情况。结果显示，将GBM细胞U87、LN2292在LPDS的条件下培养48h后，胆固醇合成途径相关基因如SREBP2、HMGCR、HMGCS1
等显著上调(图2，A和B)。说明在LPDS的条件下，GBM中胆固醇合成及摄取被显著激活，在营养缺陷型的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤生长的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤药物中的应用，其特征在于：所述KDM1A抑制剂为ORY
‑
1001。3.根据权利要求1所述的KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤药物中的应用，其特征在于：所述KDM1A抑制剂为shRNA载体。4.根据权利要求3所述的KDM1A抑制剂在制备抑制胶质母细胞瘤药物中的应用，其特征在于：所述shRNA载体为Sh1Forward和Sh1Reverse，Sh2 Forward和Sh2Reverse退火形成双链后分别连入PLKO.1
‑
TRC载体的shRNA construct的AgeI酶切位点和EcoRI酶切位点处；所述Sh1Forward核苷酸序列为：5
’‑
ccgggctacatcttaccttagtcatctcgagtactgattccattctacatcgtttttg
‑3’
所述Sh1Reve...

【专利技术属性】
技术研发人员：祝顺琴，胡婷，张夕梅，刘堰，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：