包含来源于凝血酶处理的干细胞的外泌体的用于预防或治疗糖尿病性皮肤病的组合物制造技术

本发明专利技术涉及用于预防或治疗糖尿病性皮肤病的药物组合物、含有所述组合物的药物制剂以及用于制备它们的方法，所述药物组合物包含来源于凝血酶处理的干细胞的外泌体作为活性成分。在本发明专利技术中，发现从凝血酶处理的干细胞中分离的外泌体对糖尿病动物模型从糖尿病性皮肤病变中恢复具有优异的效果。此外，由于基于外泌体的治疗剂是无细胞的制剂，因此不包括DNA，这种治疗剂具有低的癌症风险，并且不含细胞表面抗原。因此，基于外泌体的治疗剂不具有移植排斥的问题，因此是安全的。此外，作为分离材料而不是细胞，基于外泌体的治疗剂可以开发为现成的药物，从而降低制造成本。因此，根据本发明专利技术的来源于凝血酶处理的干细胞的外泌体可被开发作为用于可由糖尿病引起的各种顽固性慢性皮肤病的治疗剂，此外，预期所述外泌体可用于与皮肤再生相关的领域。用于与皮肤再生相关的领域。用于与皮肤再生相关的领域。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含来源于凝血酶处理的干细胞的外泌体的用于预防或治疗糖尿病性皮肤病的组合物


[0001]本专利技术涉及用于预防或治疗糖尿病性皮肤病的药物组合物，含有所述组合物的药物制剂以及制备它们的方法，所述药物组合物包含从凝血酶处理的干细胞中分离的外泌体作为活性成分。

技术介绍

[0002]糖尿病是一种胰岛素分泌不足或未达到正常功能的代谢疾病，特征在于高血糖，其中血液中的葡萄糖浓度增加，并且由于高血糖和尿中葡萄糖的排泄而引起多种症状和体征。已知I型糖尿病也称为“青少年糖尿病”，是由于自身免疫机制破坏胰腺的β细胞而导致的胰岛素产生的绝对或相对缺乏引起的，而II型糖尿病是由胰岛素抵抗诱导的，并且由多种因素导致，如肥胖、胰岛素受体减少、胰岛素分泌减少和遗传因素。
[0003]根据韩国糖尿病协会(Korean Diabetes Association)的2016公告，截至2014年，韩国30岁以上的成年人中的糖尿病患病率被记录为13.7％，创历史新高，并且糖尿病合并症的风险也很严重。糖尿病患者中的肥胖症和腹部肥胖症的患病率分别达到48.6％和58.9％，伴随的高血压和高胆固醇血症分别为54.7％和31.6％。因此，糖尿病可引起严重的并发症，如心血管疾病、视网膜病、肾衰竭、周围神经病变和皮肤病以及其自身的风险。
[0004]糖尿病性皮肤病，其是由糖尿病引起的疾病之一，可以通过长时间维持血液中的高葡萄糖水平而引起，并且具体地包括糖尿病溃疡、黑棘皮病、糖尿病脂性渐进性坏死、糖尿病性皮肤病变、发疹性黄瘤病、软纤维瘤、瘙痒、环状肉芽肿以及细菌和真菌感染。特别地，在皮肤病的情况下，由于高血糖浓度而导致恢复不好，因此它可能变成慢性疾病。因此，有必要开发能够预防和治疗由糖尿病引起的多种皮肤病的有效制剂。
[0005]同时，干细胞被认为是参与组织再生、治疗和免疫应答的细胞并且以它们的多能性而著称，因此存在通过使用上述特征从脐带血和骨髓中分离和培养间充质干细胞来开发用于多种疾病和症状的治疗剂的努力。
[0006]然而，使用干细胞本身的治疗具有以下局限性和副作用。首先，基本上，在细胞治疗剂的情况下，不能排除由于DNA转移而导致的致瘤性的可能性，其次，由于干细胞本身的大尺寸，它可能引起血管阻塞或心肌梗塞，第三，当使用同种异体细胞如脐带血(同种异体移植物)移植时，存在由于细胞表面抗原而导致的排斥的问题，第四，通常，细胞治疗剂由于储存和运输的限制而导致制造过程困难和生产成本高的局限性。因此，由于干细胞的固有限制，已经开发了使用遗传操作的功效改善方法作为用于减少副作用和改善治疗效果的方法，但是迄今为止还没有明确的替代方法。
[0007]外泌体是具有从多种细胞分泌的膜结构的小囊泡(直径：大约30
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100nm)，并且在使用电子显微镜的研究中，已经观察到它们源自称为多泡体(MVB)的特定细胞内区室，而不是直接从质膜分离，并且被释放和分泌到细胞外。也就是说，当MVB和质膜融合时，囊泡被释放到细胞外环境中，称为外泌体。虽然尚不清楚这些外泌体通过什么分子机制产生，但已知
包括红细胞以及B淋巴细胞、T淋巴细胞、树突细胞，血小板和巨噬细胞在内的各种类型的免疫细胞、肿瘤细胞和干细胞在它们存活时产生并分泌外泌体。
[0008]特别地，来源于干细胞的外泌体不仅含有受体和蛋白质，而且还含有核成分，并且已知其在细胞内通讯中起作用。此外，与干细胞相比，干细胞来源的外泌体含有相对较少的动物血清，因此也可以排除由动物血清感染引起的人畜共患病的风险。考虑到外泌体的这些特征，使用外泌体的细胞疗法有望称为一种新的范例，其能够克服常规干细胞疗法的局限性。
[0009]在这方面，虽然已经公开了使用多能干细胞对糖尿病皮肤溃疡的治疗效果(KR10
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2018
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0104196)，但是凝血酶处理的干细胞来源的外泌体用于治疗糖尿病性皮肤病的用途尚不清楚。
[0010]公开内容
[0011]技术问题
[0012]作为通过将干细胞来源的外泌体应用于糖尿病性皮肤病的研究努力的结果，本申请的专利技术人证实了当在糖尿病动物模型中诱导皮肤损伤作为糖尿病性皮肤病的实例时外泌体的优异治疗效果。基于此，完成了本专利技术。
[0013]因此，本专利技术涉及提供用于预防或治疗糖尿病性皮肤病的药物组合物，其包含凝血酶处理的干细胞来源的外泌体作为活性成分。
[0014]此外，本专利技术涉及提供用于治疗糖尿病性皮肤病的药物制剂，其包含所述药物组合物。
[0015]此外，本专利技术涉及提供用于改善糖尿病性皮肤病的准药制剂，其包含凝血酶处理的干细胞来源的外泌体。
[0016]此外，本专利技术涉及提供制备所述药物组合物的方法。
[0017]然而，在本专利技术中要解决的技术问题不限于上述问题，并且本领域的普通技术人员将从下面的描述中充分理解本文没有描述的其它问题。
[0018]技术方案
[0019]为了实现本专利技术的目的，本专利技术提供了用于预防或治疗糖尿病性皮肤病的药物组合物，其包含凝血酶处理的干细胞来源的外泌体作为活性成分。
[0020]在本专利技术的一个实施方案中，所述干细胞可以选自间充质干细胞、人组织来源的间充质基质细胞、人组织来源的间充质干细胞、多能干细胞和羊膜上皮细胞。
[0021]在本专利技术的另一个实施方案中，所述间充质干细胞可以来源于脐带、脐带血、骨髓、脂肪、肌肉、神经、皮肤、羊膜或胎盘。
[0022]在本专利技术的另一个实施方案中，所述糖尿病性皮肤病可以选自糖尿病溃疡、发疹性黄瘤病、皮肤感染、糖尿病性皮肤病变、皮肤纤维瘤、黑棘皮病、瘙痒、糖尿病性硬肿病和环状肉芽肿。
[0023]在本专利技术的另一个实施方案中，所述药物组合物还可以包含选自培养基、细胞因子、生长因子和基因的辅助成分。
[0024]此外，本专利技术提供了用于治疗糖尿病性皮肤病的药物制剂。
[0025]在本专利技术的一个实施方案中，所述药物制剂可以是可注射型、输注型、喷雾型、液体型或贴片型。
[0026]此外，本专利技术提供了用于改善糖尿病性皮肤病的准药制剂，其包含凝血酶处理的干细胞来源的外泌体作为活性成分。
[0027]在本专利技术的一个实施方案中，所述准药制剂可以是用于皮肤的外用制剂，选自液体、软膏剂、霜剂、喷雾剂、贴剂、凝胶和气雾剂。
[0028]此外，本专利技术提供了制备药物组合物的方法，其包括以下步骤：
[0029](a)在干细胞培养之后用凝血酶处理；
[0030](b)从(a)的细胞培养物中分离外泌体；以及
[0031](c)制备含有(b)中分离的所述外泌体作为活性成分的组合物。
[0032]在本专利技术的一个实施方案中，(a)中的所述凝血酶可以以1
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1000单位/ml被包含在所述培养基中。
[0033]在本专利技术的另一个实施方案中，可以通过在3,000至100,000g离心10分钟至5小时来分离(b)中所述的外泌体。
[0034]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.用于预防或治疗糖尿病性皮肤病的药物组合物，其包含：凝血酶处理的干细胞来源的外泌体作为活性成分。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述干细胞选自间充质干细胞、人组织来源的间充质基质细胞、人组织来源的间充质干细胞、多能干细胞和羊膜上皮细胞。3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述间充质干细胞来源于脐带、脐带血、骨髓、脂肪、肌肉、皮肤、羊膜或胎盘。4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述糖尿病性皮肤病选自糖尿病溃疡、发疹性黄瘤病、皮肤感染、糖尿病性皮肤病变、皮肤纤维瘤、黑棘皮病、瘙痒、糖尿病性硬肿病和环状肉芽肿。5.根据权利要求1所述的组合物，其还包含选自培养基、细胞因子、生长因子和基因的辅助成分。6.用于治疗糖尿病性皮肤病的药物制剂，其包含权利要求1所述的组合物。7.根据权利要求6所述的制剂，其是可注射型、输注型、喷雾型、液体型或贴片型。8.用于改善糖尿病性皮肤病的准药制剂，其包含凝血酶处理的干...

【专利技术属性】
技术研发人员：张允实，朴元淳，成东庆，
申请(专利权)人：社会福祉法人三星生命公益财团，
类型：发明
国别省市：