新型多肽、融合多肽和包含其的抗革兰氏阴性菌的抗生素制造技术

本发明专利技术提供了一种新型多肽、包含该多肽的融合多肽及其作为抗生素的用途。更具体地说，提供了一种衍生自噬菌体的新型多肽、包含杀菌肽A的新型融合多肽和包含该多肽和/或融合多肽的抗革兰氏阴性菌的抗生素。肽的抗革兰氏阴性菌的抗生素。肽的抗革兰氏阴性菌的抗生素。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型多肽、融合多肽和包含其的抗革兰氏阴性菌的抗生素


[0001]在本说明书中，提供了一种新型多肽、包含该多肽的融合多肽及其作为抗生素的用途。更具体地说，一种衍生自噬菌体的新型多肽、包含该多肽和杀菌肽A的融合多肽，以及包含该多肽和/或融合蛋白的抗革兰氏阴性菌的抗生素。

技术介绍

[0002]噬菌体是指感染特定细菌并抑制和阻碍受感染细菌生长的细菌特异性病毒。噬菌体能够在感染宿主细菌后以细菌细胞内增殖的方式杀死细菌，并使用内溶素(当子代噬菌体在增殖后从细菌中出来时噬菌体的一种蛋白质)破坏宿主细菌的细胞壁。因此，具有噬菌体内溶素活性的物质可以有效地用作抗生素候选物。
[0003]最近，抗生素耐药细菌迅速增加，不能用任何抗生素治疗的多药耐药细菌也在增加。特别是，革兰氏阴性菌之一，铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是ESKAPE(屎肠球菌(Enterococcus faecium)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和肠杆菌属(Enterobacter species))细菌中的一种，其在全球范围内迫切需要开发新的治疗方法，而大肠杆菌(Escherichia coli)也是一种参与各种感染的细菌。因此，需要开发一种不同于传统抗生素的治疗方法。

技术实现思路

[0004]技术问题
[0005]一个实例提供了一种新型多肽。该多肽可包含SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：6的氨基酸序列。该多肽可衍生自噬菌体或其变体。该多肽可能具有内溶素活性。
[0006]另一实例提供了一种编码该多肽的多核苷酸。该多核苷酸可包含SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：7的核酸序列。
[0007]另一实例提供了一种包含该多核苷酸的重组载体。该重组载体可用作表达载体。
[0008]另一实例提供了一种包含该多核苷酸或含有该多核苷酸的重组载体的重组细胞。该重组细胞可用于表达多核苷酸。
[0009]另一实例提供了一种噬菌体，其包含SEQ ID NO：1的多肽、编码该多肽的多核苷酸(例如，SEQ ID NO：2)或其组合。噬菌体的基因组可包含SEQ ID NO：5的核酸序列。
[0010]另一实例提供了一种新型融合多肽。该融合多肽可包含杀菌肽A和内溶素。例如，杀菌肽A可以由SEQ ID NO：8的氨基酸序列表示。内溶素可衍生自噬菌体或其变体，例如，其可由SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：6的氨基酸序列表示。在融合多肽中，杀菌肽A(例如，SEQ ID NO：8)和内溶素(例如，SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：6)可以任何顺序通过接头连接或在没有接头的情况下直接连接。在一个实例中，融合多肽可由SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：13的氨基酸序列表示。
[0011]另一实例提供了一种编码该融合多肽的多核苷酸。该多核苷酸可包含SEQ ID NO：
11或SEQ ID NO：14的核酸序列。
[0012]另一实例提供了一种包含该多核苷酸的重组载体。该重组载体可用作表达载体。
[0013]另一实例提供了一种包含该多核苷酸或包含该多核苷酸的重组载体的重组细胞。该重组细胞可用于表达多核苷酸。
[0014]另一实例，提供了一种抗生素，其包含选自由以下组成的组中的一种或多种：
[0015](1)选自SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：6中的一种或多种多肽，
[0016](2)包含该多肽和杀菌肽A的融合多肽(例如，SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：13)或其组合，
[0017](3)编码(1)中的多肽的多核苷酸，
[0018](4)编码(2)中的融合多肽的多核苷酸，
[0019](5)包含(3)中的多核苷酸、(4)中的多核苷酸或其组合的重组载体，
[0020](6)包含(3)中的多核苷酸、(4)中的多核苷酸或其组合或含有该多核苷酸的重组载体的重组细胞，和
[0021](7)包含SEQ ID NO：1的多肽、编码该多肽的多核苷酸或其组合的噬菌体。
[0022]该抗生素可能对革兰氏阴性菌有抗菌作用。
[0023]本说明书中提供的抗生素(第一种抗生素)具有通过抗菌作用本身表现出协同效应的优势，并且与另一种抗生素(第二种抗生素)结合使用时，作为低浓度的第二种抗生素具有优异的抗菌作用。因此，可以减少使用高浓度抗生素的副作用，例如毒性(例如肾毒性、肝毒性等)。此外，它可以通过不同机制的抗生素的组合来抑制耐药细菌的出现。
[0024]因此，一个实例提供了一种组合抗生素，包括：
[0025](a)选自以下组成的组中的一种或多种：(1)选自SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：6中的一种或多种多肽，(2)包含该多肽和杀菌肽A的融合多肽(例如，SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：13)或其组合，(3)编码(1)中的多肽的多核苷酸，(4)编码(2)中的融合多肽的多核苷酸，(5)包含(3)中的多核苷酸、(4)中的多核苷酸或其组合的重组载体，(6)包含(3)中的多核苷酸、(4)中的多核苷酸或其组合或含有该多核苷酸的重组载体的重组细胞，和(7)包含SEQ ID NO：1的多肽、编码该多肽的多核苷酸或其组合的噬菌体；和
[0026](b)抗生素(例如，基于多粘菌素的抗生素，如多粘菌素B和/或粘菌素等)。
[0027]另一实例提供了一种用于预防和/或治疗假单胞菌属(Pseudomonas sp.)细菌感染或由假单胞菌属细菌引起的疾病的药物组合物，其包含作为活性成分的抗生素或组合抗生素。另一实例提供了一种用于预防或治疗假单胞菌属细菌感染或由假单胞菌属细菌引起的疾病的方法，包括向需要预防和/或治疗假单胞菌属细菌感染或由假单胞菌属细菌引起的疾病的受试者给药药学上有效剂量的抗生素或组合抗生素。
[0028]另一实例提供了一种包含抗生素或组合抗生素作为活性成分的饲料添加剂。
[0029]另一实例提供了一种包含该抗生素或组合抗生素作为活性成分的消毒剂。
[0030]另一实例提供了一种消毒方法，包括将抗生素或组合抗生素应用于需要消毒的受试者。
[0031]另一实例提供了一种包含该抗生素或组合抗生素作为活性成分的洗涤剂。
[0032]另一实例提供了一种清洁方法，包括将抗生素或组合抗生素应用于需要清洁的受试者。
[0033]技术方案
[0034]当可以通过增殖作为宿主的细菌将用作天然抗生素的噬菌体穿透细菌并在内部完成增殖时，完成的噬菌体颗粒被释放到细菌外部，然后，攻击和分解细菌细胞壁并创建释放到外部的途径的酶是内溶素。所有噬菌体的基因组中都含有这种内溶素基因，并使用在增殖过程中表达的内溶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多肽，包含SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：6的氨基酸。2.根据权利要求1所述的多肽，其中，所述多肽具有内溶素活性。3.一种多核苷酸，编码权利要求1所述的多肽。4.根据权利要求3所述的多核苷酸，包含SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：7的核酸序列。5.一种重组载体，包含权利要求3所述的多核苷酸。6.一种重组细胞，包含权利要求3所述的多核苷酸或含有该多核苷酸的重组载体。7.一种噬菌体，包含编码多肽的多核苷酸，所述多肽包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列。8.根据权利要求7所述的噬菌体，其中，编码包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的多肽的多核苷酸包含SEQ ID NO：2的核酸序列。9.根据权利要求7或8所述的噬菌体，其中，所述噬菌体具有抗假单胞菌属细菌的抗菌活性。10.一种融合多肽，包括：杀菌肽A和SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：6的多肽。11.根据权利要求10所述的融合多肽，其中，杀菌肽A由SEQ ID NO：8的氨基酸序列表示。12.根据权利要求10所述的融合多肽，其中，杀菌肽A和SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：6的多肽以从N
‑
端开始的顺序连接。13.根据权利要求10所述的融合多肽，其中，杀菌肽A和SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：6的多肽通过肽接头连接。14.根据权利要求10所述的融合多肽，其由SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：13的氨基酸序列表示。15.一种编码权利要求10至14中任一项所述的融合多肽的多核苷酸。16.根据权利要求15所述的多核苷酸，其由SEQ ID NO：11或SEQ ID NO：14的核酸序列表示。17.一种重组载体，其包含权利要求15所述的多核苷酸。18.一种重组细胞，其包含权利要求15所述的多核苷酸或含有该多核苷酸的重组载体。19.一种抗生素，其包含选自由以下组成的组中的一种或多种：根据权利要求1所述的多肽，根据权利要求10至14中任一项所述的融合多肽，编码所述多肽的多核苷酸，编码所述融合多肽的多核苷酸；包含编码所述多肽的多核苷酸的重组载体，包含编码所述融合多肽的多核苷酸的重组载体；和包含所述多核苷酸或所述重组载体的重组细胞。20.根据权利要求19所述的抗生素，其进一步包含多粘菌素基抗生素。21.根据权利要求20所述的抗生素，其中，所述多粘菌素基抗生素为多粘菌素B、粘菌素或其组合。22.根据权利要求19所述的抗生素，其具有抗革兰氏阴性菌的抗菌活性。
23.根据权利要求22所述的抗生素，其中，所述革兰氏阴性菌为选自由假单胞菌属细...

【专利技术属性】
技术研发人员：明熙峻，金敏秀，洪暳瑗，片智元，张在延，
申请(专利权)人：株式会社莱森科技，
类型：发明
国别省市：