一种穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的检测方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，尤其涉及一种穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的检测方法。该方法采用气相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的检测方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，尤其涉及一种穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的检测方法。

技术介绍

[0002]穿心莲内酯磺化物是一种可用于制备药品的医药中间体，能够开发成注射剂、口服液等药物。
[0003]穿心莲内酯磺化物由穿心莲内酯、硫酸及无水乙醇经磺化反应制备得到。在磺化反应过程中，会生成至少2种硫酸酯类基因毒性杂质——所用硫酸、乙醇试剂可能发生副反应生成具有致癌、致突变性作用的硫酸二乙酯；而乙醇中常含有微量甲醇，故也可能会生成具有高毒、致畸作用的硫酸二甲酯。
[0004]硫酸二甲酯结构如下：
[0005][0006]硫酸二乙酯结构如下：
[0007][0008]硫酸二甲酯、硫酸二乙酯因结构中具有硫酸酯结构单元，具有潜在的基因毒性，在世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单中硫酸二乙酯被列为2B类致癌物、硫酸二甲酯被列为2A类致癌物。另一方面，根据《人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)》的文件M7，即《评估和控制药物中DNA反应性(致突变)杂质以限制潜在的致癌风险》中的杂质分类规则，和《遗传毒性杂质控制指导原则～中国药典2020版征求意见稿》的规定，硫酸二乙酯和硫酸二甲酯是3类遗传毒性杂质，须参照毒理学关注阈值(TTC)控制其允许每日摄入量(ADI)在1.5μg/天。因此，应严格控制硫酸二甲酯和硫酸二乙酯在药物中的残留量。
[0009]硫酸二甲酯、硫酸二乙酯极性大，不具备敏感的紫外吸收基团，并且容易水解，很难采用气相、液相色谱和其他常规分析手段对其进行痕量直接测定。而且穿心莲内酯磺化物在结构上有其特异性，本身具有与硫酸二甲酯、硫酸二乙酯结构相似的酯基官能团，如用衍生化法分析会有假阳性风险。因此，穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质硫酸二甲酯、硫酸二乙酯的定性、定量检测成为药物分析
技术人员急需解决的问题。

技术实现思路

[0010]为克服现有技术的不足，本专利技术提供了一种穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的检测方法，该方法采用气相色谱
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串联质谱联用仪检测穿心莲内酯磺化物中潜在硫酸酯类基因毒性杂质的含量，该方法专属性良好、灵敏度高、精密度高、耐用性好，适合应
用于质量控制。
[0011]为实现本专利技术的技术目的，本专利技术提供了如下技术方案：
[0012]本专利技术提供了一种穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的检测方法，采用气相色谱
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串联质谱联用仪检测穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的含量，所述硫酸酯类基因毒性杂质为被1～2个C1～C5的烷氧基取代的硫酸中一种或多种；优选地，所述硫酸酯类基因毒性杂质为硫酸氢甲酯、硫酸氢乙酯、硫酸二甲酯、硫酸二乙酯中一种或多种；更优选地，所述硫酸酯类基因毒性杂质为硫酸二甲酯、硫酸二乙酯中的一种或两种；最优选地所述硫酸酯类基因毒性杂质为硫酸二甲酯和硫酸二乙酯。
[0013]根据上述检测方法，所述气相色谱
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串联质谱联用仪使用的气相色谱柱为毛细管柱；所述毛细管柱的型号优选地为HP～5MS毛细管柱；所述毛细管柱的柱长优选地为1～60m，较优选地为15～45m，更优选地为25～35m，最优选地为30m；所述毛细管柱的内径优选地为0.1～1mm，较优选地为0.1～0.4mm，更优选地为0.2～0.3mm，最优选地为0.25mm；所述毛细管柱的涂膜厚度优选地为0.1～1μm，较优选地为0.1～0.4μm，更优选地为0.2～0.3μm，最优选地为0.25μm。
[0014]根据上述检测方法，所述气相色谱的条件包括：气相色谱柱的载气为He；所述气相色谱的条件还可以进一步地包括：
[0015]进样量；所述进样量优选地为0～3μl，较优选地为0.1～2μl，更优选地为0.5～1.5μl，最优选地为1μl。
[0016]和/或，进样口温度；所述进样口温度优选地为100～400℃，较优选地为150～350℃，更优选地为200～300℃，最优选地为240℃。
[0017]和/或，色谱柱的He流量；所述色谱柱的He流量优选地为0.1～2.0ml/min较优选地为0.5～1.7ml/min，更优选地为1.0～1.2ml/min，最优选地为1.1ml/min。
[0018]和/或，色谱柱碰撞池电子气路控制的He淬灭气流量；所述色谱柱碰撞池电子气路控制的He淬灭气流量优选地为0.1～5ml/min，较优选地为1～4ml/min，更优选地为2～3ml/min，最优选地为2.5ml/min。
[0019]和/或，N2碰撞气流量；所述N2碰撞气流量优选地为0.5～2ml/min，较优选地为1～1.5ml/min，更优选地为1.2～1.3ml/min，最优选地为1.25ml/min。
[0020]和/或，柱箱程序升温，保持起始温度2min，升温至终点温度，保持2min；所述柱箱程序升温的起始温度优选地为30～70℃，较优选地为40～60℃，更优选地为45～55℃，最优选地为50℃；所述柱箱程序升温的终点温度优选地为100～150℃，较优选地为110～140℃，更优选地为120～130℃，最优选地为125℃；所述柱箱程序升温的升温速率优选地为5～35℃/min，较优选地为10～30℃/min，更优选地为15～25℃/min，最优选地为20℃/min；优选地，所述柱箱程序升温为50℃保持2min，以20℃/min升温至125℃，保持2min。
[0021]根据上述检测方法，所述质谱的条件包括：扫描模式为多反应监测MRM，离子模式选择正离子。所述质谱的条件还可以进一步地包括：离子源温度；所述离子源温度优选地为200～250℃，较优选地为200～240℃，更优选地为210～230℃，最优选地为220℃；所述质谱的条件还可以进一步地包括：四极杆温度；所述四极杆温度优选地为100～200℃，较优选地为120～180℃，更优选地为140～160℃，最优选地为150℃；所述质谱的条件还可以进一步地包括：碰撞电压；所述碰撞电压优选地为0V；所述质谱的条件还可以进一步地包括：扫描
段的前级离子和产物离子；测定穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质硫酸二甲酯，优选地设置扫描段前级离子95、产物离子66；测定穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质硫酸二乙酯，优选地设置前级离子125、产物离子99。
[0022]根据上述检测方法，所述检测方法包括：
[0023](1)色谱柱：色谱柱为毛细管柱。
[0024]所述毛细管柱的型号优选地为HP～5MS毛细管柱；所述毛细管柱的柱长优选地为1～60m，较优选地为15～45m，更优选地为25～35m，最优选地为30m；所述毛细管柱的内径优选地为0.1～1mm，较优选地为0.1～0.4mm，更优选地为0.2～0.3mm，最优选地为0.25mm；所述毛细管柱的涂膜厚度优选地为0.1～1μm，较优选地为0.1～0.4μm，更本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的检测方法，其特征在于，采用气相色谱
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串联质谱联用仪检测穿心莲内酯磺化物中硫酸酯类基因毒性杂质的含量，所述硫酸酯类基因毒性杂质为被1～2个C1～C5的烷氧基取代的硫酸中一种或多种；优选地，所述硫酸酯类基因毒性杂质为硫酸二甲酯和硫酸二乙酯。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述气相色谱
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串联质谱联用仪使用的气相色谱柱为毛细管柱。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述气相色谱的条件包括：气相色谱柱的载气为He。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述质谱的条件包括：扫描模式为多反应监测MRM，离子模式选择正离子。5.根据权利要求1～4任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：(1)色谱柱：色谱柱为毛细管柱；(2)气相色谱条件：色谱柱载气为He，设置进样量，进样口温度，色谱柱的He流量、色谱柱碰撞池电子气路控制的He淬灭气、N2碰撞气流量，柱箱程序升温；(3)质谱条件：设置离子源温度、四极杆温度和碰撞电压；扫描模式为多反应监测MRM，离子模式选择正离子，设置扫描段特定的前级离子和产物离子；(4)测定方法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液分别注入气相色谱
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串联质谱联用仪，记录气相色谱和质谱图。6.根据权利要求1或5所述的检测方法，其特征在于，所述毛细管柱为HP～5MS毛细管柱；所述毛细管柱的柱长优选地为1～60m，较优选地为15～45m，更优选地为25～35m，最优选地为30m；所述毛细管柱的内径优选地为0.1～1mm，较优选地为0.1～0.4mm，更优选地为0.2～0.3mm，最优选地为0.25mm；所述毛细管柱的涂膜厚度优选地为0.1～1μm，较优选地为0.1～0.4μm，更优选地为0.2～0.3μm，最优选地为0.25μm。7.根据权利要求1或5所述的检测方法，其特征在于，所述气相色谱条件为：所述进样量为0～3μl，优选地为0.1～2μl，更优选地为0.5～1.5μl，最优选地为1μl；和/或，所述进样温度为100～400℃，优选地为150～350℃，更优选地为200～300℃，最优选地为240℃；和/或，所述色谱柱的He流量为0.1～2.0ml/min，优选地为0.5～1.7ml/min，更优选地为1.0～1.2ml/min，最优选地为1.1ml/min；和/或，所述色...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓双炳，郭正友，方礼，刘地发，谢媛媛，杨诗易，刘尧奇，刘芳芳，蔡群芳，王章伟，
申请(专利权)人：江西青峰药业有限公司，
类型：发明
国别省市：