包含荧光团标记的uPAR靶向肽缀合物的组合物制造技术

本发明专利技术描述了一种组合物，该组合物包含荧光团标记的uPAR靶向组分、缓冲液和表面活性剂，其中该荧光团标记的uPAR靶向组分通过存在的表面活性剂在组合物中增溶，并且其中组合物包含最多10重量％的水，优选地最多5重量％的水。水。水。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含荧光团标记的uPAR靶向肽缀合物的组合物


[0001]本专利技术涉及一种组合物，其包含荧光团标记的受体靶向组分，优选地荧光团标记的受体靶向肽缀合物，更优选地荧光团标记的uPAR(尿激酶型纤溶酶原激活剂受体)靶向肽缀合物。

技术介绍

[0002]现有的组合物包含一种或多种荧光团标记的受体靶向肽缀合物，其中受体为uPAR。例如，在WO2016/041558中公开了结合到细胞表面受体uPA(uPAR)的缀合物。缀合物基于可用作表达uPAR的细胞表面的诊断探针的荧光标记肽。缀合物能够携带合适的可检测和可成像标记，该标记将允许定性检测并且还允许在体外和体内对uPAR水平进行定量。这更优化肿瘤的手术切除。此外，在WO2016/041558中描述了缀合物的不同替代方案，例如包含ICG
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Glu
‑
Glu
‑
AE105的缀合物，其中ICG是吲哚菁绿，Glu
‑
Glu是充当接头的两个谷氨酸，并且AE105是uPAR靶向肽。
[0003]本专利技术涉及提供一种制剂，其包含荧光团标记的uPAR靶向肽缀合物，例如ICG
‑
Glu
‑
Glu
‑
AE105或其他替代形式。根据本专利技术的制剂提供了荧光团标记的uPAR靶向肽缀合物的改善的溶解度，以及整个制剂和其中所包含的荧光团标记的uPAR靶向肽缀合物的增加的稳定性。

技术实现思路

[0004]上文后者所述的目的通过一种组合物来实现，该组合物包含荧光团标记的受体靶向组分、缓冲液和表面活性剂，其中荧光团标记的受体靶向组分通过存在的表面活性剂在组合物中增溶，并且其中组合物包含最多10重量％的水，优选地最多5重量％的水。如从上文应当理解的，本专利技术具体地讲涉及一种组合物，其包含荧光团标记的受体靶向肽缀合物，更具体地讲，荧光团标记的uPAR靶向肽缀合物，诸如与以下文献的表4所示的肽具有80％的序列同一性的肽缀合物：
″
Peptide
‑
Derived Antagonists of the Urokinase Receptor.Affinity Maturation by Combinatorial Chemistry，Identification of Functional Epitopes，and Inhibitory Effect on Cancer Cell Intravasation
″
，in Biochemstry 2001，40，12157
‑
12168，Michael Ploug等人。然而，应当注意，在具有受体靶向组分的情况下，这可包括小分子、蛋白质、抗体、frab或当然肽，或其任何类型的组合。
[0005]根据本专利技术的组合物表现出若干优点。最重要的两点是对荧光团标记的受体靶向肽缀合物的完全增溶和整个组合物的高稳定性。稳定性主要由缺乏水的存在来驱动。例如，作为根据本专利技术的一种目标产物类型的冻干产物是其中存在低水含量的一个示例。然而，为了具有适当的制剂，还应具有良好的冻干饼外观的产物，该产物可容易地增溶，因此荧光团标记的受体靶向肽缀合物的增溶是非常重要的。此外，应注意，呈不同的制剂形式的根据本专利技术的组合物可具有远低于5重量％，例如在1重量％
‑
3重量％的范围内的水含量。在这方面，还应注意，水含量也可在例如3年的架藏寿命期间增加。
[0006]如上所述，根据本专利技术的组合物还包含缓冲液和表面活性剂。表面活性剂是确保将荧光团标记的受体靶向肽缀合物增溶在组合物中的组分。不同类型的表面活性剂以及它们的组合可掺入根据本专利技术的组合物中。
[0007]此外，根据本专利技术，缓冲液组分也可具有不同类型。下面提供一些可能的示例。
具体实施方式
[0008]下面进一步解释和处理本专利技术的不同方面。此外，还进一步描述了本专利技术的一些具体实施方案。
[0009]可在根据本专利技术的组合物中以不同方式看到或指示在组合物中增溶的荧光团标记的受体靶向组分的特征。一种此类指示是在观察根据本专利技术的组合物的吸收光谱时。这在示例中进一步说明。此外，根据本专利技术的一个具体实施方案，荧光团标记的受体靶向组分以对应于当测量组合物在700nm
‑
825nm的波长区域中吸收光谱时具有约800nm的最大吸收的单个峰的含量在组合物中增溶。应当注意，根据本专利技术的组合物的吸收光谱不排除多于一个峰的区域，诸如双峰，然而，这方面的重要特征是吸收最大值为约800nm的一个主要峰中的高水平面积。为了对这方面给予进一步澄清，可以说具有明显双峰的吸收光谱是在组合物中不存在完全或基本上完全增溶的荧光团标记的受体靶向组分的指示，并且此类组合物不是本专利技术范围的一部分。
[0010]此外，根据本专利技术的一个具体实施方案，荧光团标记的受体靶向组分以对应于具有最大约800nm的吸收光谱峰的含量在该组合物中增溶，并且其中在600nm
‑
900nm的给定波长区域中，所述吸收光谱峰的面积为吸收光谱总面积的至少50％、优选地至少60％、甚至更优选地至少65％。
[0011]这种单峰和总面积的比较面积值可通过将面积分成多个正方形来计算，并且确定在600nm
‑
900nm的波长范围内的AUC(曲线下面积)。然后在中间绘制一条线，即在750nm处。然后分别计算在750nm处的线左侧和右侧的AUC。然后，将指示约800nm的单峰的右侧AUC除以根据上文所述计算的总AUC。如上所述，根据一个实施方案，该约800nm的单峰占600nm
‑
900nm波长范围内的总面积的至少50％、优选地至少60％、并且更优选地高于65％。
[0012]本专利技术适当地还包含其他组分。例如，冻干保护剂是此类组分。冻干保护剂是可以与小分子、肽或蛋白质组合的分子，然后显著防止或减少在干燥时，具体地讲在冻干和后续储存期间小分子、肽或蛋白质的化学和/或物理不稳定性。冻干保护剂的一些示例包括糖，例如蔗糖或海藻糖、氨基酸，例如谷氨酸一钠、组氨酸或精氨酸；甲基胺，例如甜菜碱；溶致性盐，例如硫酸镁。其他示例包括多元醇，例如三元或高级糖醇，例如甘油、赤藓糖醇、甘油、阿拉伯糖、木糖醇、山梨糖醇和甘露醇。还有一些其他示例为乙二醇；丙二醇；聚乙二醇；普郎尼克(pluronics)；或羟烷基淀粉，例如羟乙基淀粉(HES)。另外，组合当然也是完全可能的。根据本专利技术的一个具体实施方案，组合物包含冻干保护剂，优选地，选自蔗糖、海藻糖、甘露醇、甘氨酸或它们的组合的冻干保护剂、更优选地甘露醇或甘露醇与一种或多种其他组分的组合、更优选地甘露醇和甘氨酸的组合或甘露醇和蔗糖的组合。在示例中进一步呈现了根据本专利技术的这些优选替代方案中的一些替代方案。
[0013]此外，在此上下文中，还可以说其通常适用于使用足够的糖来提供等渗制剂以避免注射位点反应(刺痛)。
[0014]如上所述，根据本专利技术的组合物包含表面活性剂。根据本专利技术，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组合物，所述组合物包含荧光团标记的受体靶向组分、缓冲液和表面活性剂，其中所述荧光团标记的受体靶向组分通过存在的表面活性剂在所述组合物中增溶，并且其中所述组合物包含最多10重量％的水，优选地最多5重量％的水。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物包含荧光团标记的受体靶向肽缀合物。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述荧光团标记的受体靶向组分以对应于当测量所述组合物在700nm
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825nm的波长区域中吸收光谱时具有约800nm的最大吸收的单个峰的含量在所述组合物中增溶。4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述荧光团标记的受体靶向组分以对应于具有最大约800nm的吸收光谱峰的含量在所述组合物中增溶，并且其中在600nm
‑
900nm的给定波长区域中，所述吸收光谱峰的面积为所述吸收光谱总面积的至少50％、优选地至少60％、甚至更优选地至少65％。5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含冻干保护剂，优选地，选自蔗糖、海藻糖、甘露醇、甘氨酸或它们的组合的冻干保护剂、更优选地甘露醇或甘露醇与一种或多种其他组分的组合、更优选地甘露醇和甘氨酸的组合或甘露醇和蔗糖的组合。6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含非离子表面活性剂。7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中提供所述缓冲液，使得所述组合物具有生理pH或基本上生理pH，优选地在7.3
‑
7.5范围内的pH。8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中所述荧光团标记的受体靶向组分包含荧光团、与所述受体结合的肽和接头基团，其中所述荧光团、所述与受体结合的肽和所述接头基团通过共价键连接。9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述荧光团选自吲哚菁绿(ICG)、亚甲蓝、5
‑
ALA、原卟啉IX、IRDye800CW、ZW800
‑
1、Cy5、Cy7、Cy5.5、Cy7.5、IRDye700DX、Alexa fluor 488、异硫氰酸荧光素、Flav7、CH1055、Q1、Q4、H1、IR
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FEP、IR
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BBEP、IR
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E1、IR
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FGP或IR
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FTAP中的任一种，优选地其中所述荧光团为吲哚菁绿(ICG)。10.根据权利要求8或9所述的组合物，其中所述肽选自：AE101、AE105、AE106、AE110、AE112、AE113、AE116、AE133、AE133*、AE134、AE135、AE136、AE137、AE138、AE139、AE145、AE140、AE141、AE142、AE143、AE144、AE164、AE164*、AE120、AE120*或AE151，其中适用以下内容：AE101为d
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【专利技术属性】
技术研发人员：格蕾特，
申请(专利权)人：荧光向导股份公司，
类型：发明
国别省市：