一种天麻栽培用替代菌材的制备方法技术

本发明专利技术涉及天麻种植技术领域，具体涉及一种天麻栽培用替代菌材的制备方法。蜜环菌作为天麻赖以生存的共生菌，与天麻的品质息息相关，发明专利技术人对蜜环菌培养条件进行了探索，制定了如下的天麻栽培用替代菌材的制备方法：使用母种培养基培养蜜环菌原种，获得蜜环菌母种；使用扩种液体培养基对蜜环菌母种进行三级发酵，获得蜜环菌液；将蜜环菌液接种于栽培基质中，经培养后获得蜜环菌菌种；所述栽培基质的原料包括核桃壳、麦麸、玉米芯、天麻茎秆、磷酸二氢钾以及葡萄糖；将蜜环菌菌种接种于青冈木中，获得菌材。本技术方案解决了蜜环菌的活性欠佳而导致的天麻栽培用菌材的种植效果不理想的技术问题，具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种天麻栽培用替代菌材的制备方法


[0001]本专利技术涉及天麻种植
，具体涉及一种天麻栽培用替代菌材的制备方法。

技术介绍

[0002]天麻(Gastrodia elata Bl.)属兰科(Orchidaceae)多年生草本植物，是我国传统中草药之一，多以块茎入药，具有极高的医疗和保健价值。蜜环菌(Armillaria mellea)又名榛蘑、蜜蘑，由于其子实体菌盖表面呈蜜黄色，菌柄上端呈环状花纹，故名“蜜环菌”。蜜环菌对天麻的生长有显著影响，特别是对天麻幼苗、营养器官和生殖器官的生长发育有显著影响。蜜环菌作为一种兼性寄生性真菌，不仅能对多种植物造成侵染还与天麻具有很强的共生关系。天麻的生长过程包括拒菌、控菌和开放几个阶段。蜜环菌菌索侵入天麻，当菌索附着在天麻表皮时，蜜环菌菌丝便开始生长。菌丝在生长过程中会分泌大量的化学物质，帮助穿过天麻皮层，顺利进入到内层。菌丝到达内层后，一边释放酶一边扩散。在整个侵入的过程中，天麻进行了一系列生理生化反应。首先，蜜环菌产生酶来消化天麻表层细胞，消化后的细胞会形成管状结构。随后，表层细胞的消化会刺激天麻开启保护机制，产生大量水解酶。最后，这类水解酶会将蜜环菌菌丝降解为小分子物质，供给天麻的生长发育。蜜环菌作为上述天麻赖以生存的共生菌，与天麻的品质息息相关。因此，关于蜜环菌培养条件的探索一直是众多学者的研究热点。

技术实现思路

[0003]本专利技术意在提供一种天麻栽培用替代菌材的制备方法，以解决现有技术中的蜜环菌的活性欠佳而导致的天麻栽培用菌材的种植效果不理想的技术问题。
[0004]为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0005]一种天麻栽培用替代菌材的制备方法，包括蜜环菌菌种的制备步骤：
[0006]S1：使用母种培养基培养蜜环菌原种，获得蜜环菌母种；
[0007]S2：使用扩种液体培养基对蜜环菌母种进行三级发酵，获得蜜环菌液；
[0008]S3：将蜜环菌液接种于栽培基质中，经培养后获得蜜环菌菌种；所述栽培基质的原料包括核桃壳、麦麸、玉米芯、天麻茎秆、磷酸二氢钾以及葡萄糖；天麻茎秆的处理方法为：将天麻茎秆切成小段后喷洒短小芽孢杆菌菌液，经发酵培养、烘干以及粉碎后，获得天麻茎秆粉。
[0009]本方案的原理及优点是：
[0010]在本技术方案中，专利技术人对现有技术中常规的蜜环菌原种进行了母种培养、三级发酵以及在栽培基质上培养，进而获得了活性较为理想的用于制备菌材的蜜环菌菌种。使用上述蜜环菌菌种进行菌材制备以及天麻种植，可以显著提高天麻中功效成分的含量。解决了现有技术中的蜜环菌的活性欠佳而导致的天麻栽培用菌材的种植效果不理想的技术问题。其中，栽培基质的原料包括核桃壳、麦麸、玉米芯、天麻茎秆、磷酸二氢钾以及葡萄糖，天麻茎秆通过小芽孢杆菌发酵而成，上述栽培基质对蜜环菌活性具有显著的正向影响，可
以用于提升其共生的天麻的品质。本方案使用短小芽孢杆菌对天麻茎秆进行发酵，可以将天麻茎秆中的物质转换成一些具有促生功能的成分。种植天麻成为我国天麻药材商品的主要来源，在大量收获天麻块茎的同时，每年会产生大量的天麻地上部分(包括茎秆)副产品，被用来造纸、沼气或饲料，对天麻茎秆的附加价值未进行充分开发，通过本技术方案的方式，拓宽了天麻茎秆的用途，为天麻资源的综合利用创造了条件。
[0011]另外，本技术方案的栽培基质还使用到了另一废弃材料核桃壳。青冈木和苹果木都是现有技术中常用与菌材制作的木材，显示出较好的效果，所以也常被用于制备蜜环菌菌种的栽培基质。由于天麻种植需求量大，会出现青冈木和苹果木供应不足的问题。专利技术人尝试使用核桃壳代替青冈木和苹果木作为栽培基质的原料。但是，单独使用核桃壳的效果不理想，需要加入天麻茎秆的发酵物来共同使用，说明天麻茎秆的发酵物在作为栽培基质的原料的时候，其与核桃壳能够产生比较显著的协同增效作用。
[0012]本技术方案的天麻栽培用替代菌材为废弃作物的综合利用创造了条件，同时解决了蜜环菌的活性欠佳而导致的天麻栽培用菌材的种植效果不理想的技术问题，因此本技术方案具有广阔的应用前景。
[0013]进一步，在S1中，母种培养基的配方为：马铃薯提取物80
‑
100g、青冈树枝提取物40
‑
50g、葡萄糖15
‑
20g、天麻茎秆提取物10
‑
15g、牛肉膏6
‑
12g，琼脂10g，维生素B
1 8
‑
10mg，水补齐至1000mL。采用上述母种培养基可以通过培养获得质量理想的用于液体发酵的蜜环菌母种。经过培养，蜜环菌于2天左右长出洁白菌丝，于7天左右长出洁白菌索，菌索长势较好，并且产生较多的分支。
[0014]进一步，在S1中，马铃薯提取物由如下方法制备：将新鲜马铃薯切块，水煮后过滤取滤液，获得马铃薯提取物；青冈树枝提取物由如下方法制备：将新鲜青冈树枝粉碎后水煮，然后过滤取滤液，获得青冈树枝提取物；天麻茎秆提取物由如下方法制备：将新鲜天麻茎秆粉碎，水煮后过滤取滤液，获得天麻茎秆提取物。
[0015]母种培养基中的天麻茎秆提取物的制备方法对培养效果产生一定的影响，水提的方式获得的天麻茎秆提取物效果最好。如果用发酵后乙醇提取或者直接乙醇提取的方法制备，该成分与培养基中其他成分的相容性欠佳，会对蜜环菌母种的生长产生负面影响。
[0016]进一步，在S2中，扩种液体培养基的配方为：葡萄糖45
‑
50g/L、酵母粉7
‑
9g/L、维生素B
1 0.05
‑
0.09g/L，水补齐至1000mL。采用上述配比的扩种液体培养基，可促进蜜环菌生长，获得活性理想的用于栽培基质接种的蜜环菌液。
[0017]进一步，在S3中，核桃壳、麦麸、玉米芯、天麻茎秆的质量比为5
‑
8:2
‑
3:2
‑
3:3
‑
5；分别为核桃壳、麦麸、玉米芯、天麻茎秆的总质量的12
‑
16g/kg和0.5
‑
0.6wt.％的磷酸二氢钾和葡萄糖。采用上述配比的栽培基质，可以培养获得活性理想的用于菌材接种的蜜环菌菌种。
[0018]进一步，在S2中，三级发酵包括第一级发酵、第二级发酵和第三级发酵；在第一级发酵和第二级发酵中，接种量为3wt.％，转速为200rpm，温度为28℃，时间为6天。通过三级发酵，提升蜜环菌生物量以及生长活性，用于后续的蜜环菌菌种的栽培。
[0019]进一步，第三级发酵在发酵罐中进行，接种量为5wt.％，温度为28℃，搅拌速度为120rpm，溶氧量为18％，发酵时间为144小时。采用上述第三级发酵可以充分提升蜜环菌生物量以及生长活性。
[0020]进一步，在S3中，栽培基质的制备方法为：将核桃壳、麦麸和玉米芯分别粉碎并烘干，混合后获得混合粉A；将混合粉A与天麻茎秆粉混匀，再使用水浸泡；过滤后取固体物质，再加入本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种天麻栽培用替代菌材的制备方法，其特征在于，包括蜜环菌菌种的制备步骤：S1：使用母种培养基培养蜜环菌原种，获得蜜环菌母种；S2：使用扩种液体培养基对蜜环菌母种进行三级发酵，获得蜜环菌液；S3：将蜜环菌液接种于栽培基质中，经培养后获得蜜环菌菌种；所述栽培基质的原料包括核桃壳、麦麸、玉米芯、天麻茎秆、磷酸二氢钾以及葡萄糖；天麻茎秆的处理方法为：将天麻茎秆切成小段后喷洒短小芽孢杆菌菌液，经发酵培养、烘干以及粉碎后，获得天麻茎秆粉。2.根据权利要求1所述的一种天麻栽培用替代菌材的制备方法，其特征在于，在S1中，母种培养基的配方为：马铃薯提取物80
‑
100g、青冈树枝提取物40
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50g、葡萄糖15
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20g、天麻茎秆提取物10
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15g、牛肉膏6
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12g，琼脂10g，维生素B
1 8
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10mg，水补齐至1000mL。3.根据权利要求2所述的一种天麻栽培用替代菌材的制备方法，其特征在于，在S1中，马铃薯提取物由如下方法制备：将新鲜马铃薯切块，水煮后过滤取滤液，获得马铃薯提取物；青冈树枝提取物由如下方法制备：将新鲜青冈树枝粉碎后水煮，然后过滤取滤液，获得青冈树枝提取物；天麻茎秆提取物由如下方法制备：将新鲜天麻茎秆粉碎，水煮后过滤取滤液，获得天麻茎秆提取物。4.根据权利要求3所述的一种天麻栽培用替代菌材的制备方法，其特征在于，在S2中，扩种液体培养基的配方为：葡萄糖45
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50g/L、酵母粉7
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9g/L、维生素B
1 0.05
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0.09g/L，水...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书九页，
申请(专利权)人：西南林业大学，
类型：发明
国别省市：