一种促纤溶活性物质及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供一种促纤溶活性物质及其制备方法与应用。本发明专利技术的促纤溶活性物质的制备方法包括：对含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液进行加热、超滤处理，得到未透过膜的部分，即所述促纤溶活性物质，其中，所述超滤处理采用截留分子量为8000

【技术实现步骤摘要】
一种促纤溶活性物质及其制备方法与应用


[0001]本专利技术是关于一种促纤溶活性物质及其制备方法与应用，属于保健食品及生物医药加工


技术介绍

[0002]随着人们的生活水平日益提高，同时伴随着饮食结构的巨大改变，因日常摄入高糖、高脂、高蛋白的食物，这些使得血栓栓塞性疾病成为人们健康的严重威胁。纤维蛋白是血栓中最为顽固的组成部分，高度不溶，而纤溶则指其被分解液化的现象。纤溶活性物质指能分解纤维蛋白的物质，主要是一些纤溶酶，包括尿激酶、阿替普酶(rt
‑
PA)、链激酶、蚓激酶、纳豆激酶、胰蛋白酶等。纤溶酶根据其各自不同特点有着不同的应用，在临床上用于溶栓治疗的有尿激酶、阿替普酶、链激酶、蚓激酶等；用于保健食品的有纳豆激酶；而胰蛋白酶虽能直接溶解血栓但却由于其缺乏特异性而并不用于溶栓治疗，临床上作为注射用酶制剂主要用于抗炎消肿，其主要作为蛋白水解酶用于动物源纤溶活性物质的提取或蛋白质组成分析。
[0003]各种纤溶酶均存在着热不稳定、难保存、且在临床应用中如果大剂量使用可能会出现出血等并发症的问题，如何寻找更加安全可靠的溶栓治疗和预防手段和方法成为非常迫切的需求。
[0004]须见洋行在文献“纳豆中所含线溶激活物质及其特性”(《日本农艺化学会期刊》第74卷第11号，2000年11月)中指出纳豆中除了纳豆激酶外，另含有一种可以激活纤溶酶的活性物质(FAS)，并指出该活性物质耐热性、耐酸性较好，且提供了一种酸沉醇提法。

技术实现思路

[0005]为解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种以纳豆为原料制备促纤溶活性物质的方法。
[0006]为达到上述目的，本专利技术提供一种促纤溶活性物质的制备方法，其中，该制备方法包括以下步骤：
[0007]对含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液进行加热、超滤处理，得到未透过膜的部分，即所述促纤溶活性物质，其中，所述超滤处理采用截留分子量为8000
‑
15000Dal的超滤离心管或者超滤膜进行。
[0008]根据本专利技术的具体实施方案，其中，当采用超滤离心管进行超滤处理时，所述超滤是以2000
‑
8000rpm的转速超滤离心处理10min
‑
60min。
[0009]根据本专利技术的具体实施方案，其中，该制备方法包括以下步骤：
[0010]对含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液进行第一次离心获取第一上清液；
[0011]对第一上清液进行加热、超滤处理，得到未透过膜的部分，即所述促纤溶活性物质，其中，所述超滤处理采用截留分子量为8000
‑
15000Dal的超滤离心管或者超滤膜进行。
[0012]根据本专利技术的具体实施方案，其中，该制备方法包括以下步骤：
[0013]将上述含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液，或上述第一上清液置于高压蒸汽灭菌锅中，115
‑
126℃加热20min
‑
30min或90
‑
100℃水浴加热30min
‑
60min；
[0014]对经过加热的液体进行第二次离心获取第二上清液，然后进行超滤处理。
[0015]根据本专利技术的具体实施方案，其中，该制备方法包括以下步骤：
[0016]将含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液，或所述第一上清液置于高压蒸汽灭菌锅中，121℃加热20min
‑
30min或100℃水浴加热30min
‑
60min；
[0017]对经过加热的液体进行二次离心获取第二上清液，然后进行超滤处理。
[0018]根据本专利技术的具体实施方案，其中，所述第二次离心并超滤的过程包括：
[0019]将加热处理后的溶液经3000
‑
8000rpm第二次离心10
‑
30min，弃去沉淀物；
[0020]第二次离心后，对第二上清液超滤纯化：取第二上清液使用截留分子量为8000
‑
15000Dal的超滤离心管于2000
‑
8000rpm超滤离心10min
‑
60min，或采用截留分子量为8000
‑
15000Dal的超滤膜过滤，取未透过膜的部分保存。
[0021]根据本专利技术的具体实施方案，其中，该制备方法还包括将所得到的促纤溶活性物质制成粉末的过程；具体可以采用烘干、真空干燥和冷冻干燥等方法。
[0022]根据本专利技术的具体实施方案，其中，该制备方法包括：
[0023]取纳豆50g加入100mL蒸馏水，于室温下缓慢搅拌60min，300目过滤网滤过，过滤除去豆渣后，以3000rpm离心30min获取第一上清液；
[0024]向第一上清液中加入0.8
‑
5g纳豆激酶分子印迹聚合物，4℃静置吸附20h，离心得到第三上清液；
[0025]将离心得到的第三上清液于115
‑
126℃加热20min
‑
30min或90
‑
100℃水浴加热30min
‑
60min，离心得第四上清液；
[0026]将第四上清液用8000
‑
15000Dal的超滤膜进行超滤，得到未透过膜的部分，得到促纤溶活性物质。
[0027]本专利技术另提供采用所述制备方法制备得到的纳豆促纤溶活性物质。
[0028]根据本专利技术的具体实施方案，其中，所述纳豆促纤溶活性物质的分子量为15
‑
80KD。
[0029]根据本专利技术的具体实施方案，优选地，所述纳豆促纤溶活性物质的分子量为20
‑
70KD。
[0030]根据本专利技术的具体实施方案，其中，所述纳豆促纤溶活性物质的等电点为pH4.0
‑
4.8。
[0031]根据本专利技术的具体实施方案，其中，所述纳豆促纤溶活性物质的等电点为pH4.0
‑
4.5。
[0032]本专利技术还提供所述纳豆促纤溶活性物质在制备纤溶酶促进制剂中的应用；优选地，所述纤溶酶包括胰蛋白酶Try、尿激酶UK、纳豆激酶NK中的一种或多种。
[0033]本专利技术从纳豆中提取分离到一类促纤溶活性物质，其本身无纤溶活性，不能溶解血栓，但却能增加纤溶活性物质的溶栓作用，具有耐热性能，因其具有促纤溶活性和热稳定性，易保存，服用方便，将为促进相关纤溶酶的溶栓活性起到积极作用，可与纤溶酶联合使用，增加其活性，或通过减少纤溶酶用量来减少其副作用。本专利技术涉及其制备方法，具有较强创新性、先进性和较高的实际应用价值。
[0034]本专利技术所提供的纳豆促纤溶活性物质的制备方法既可直接从纳豆浸提液中提取，也可与分子印迹聚合物提取纳豆激酶的方法联用，同时从纳豆中提取纳豆激酶和纳豆促纤溶活性物质，减少了纳豆促纤溶活性物质的提取中纳豆激酶的浪费，大大提高了纳豆促纤溶活性物质本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促纤溶活性物质的制备方法，其中，该制备方法包括以下步骤：对含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液进行加热、超滤处理，得到未透过膜的部分，即所述促纤溶活性物质，其中，所述超滤处理采用截留分子量为8000
‑
15000Dal的超滤离心管或者超滤膜进行。2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，当采用超滤离心管进行超滤处理时，所述超滤是以2000
‑
8000rpm的转速超滤离心处理10min
‑
60min。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，该制备方法包括以下步骤：对含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液进行第一次离心获取第一上清液；对第一上清液进行加热、超滤处理，得到未透过膜的部分，即所述促纤溶活性物质，其中，所述超滤处理采用截留分子量为8000
‑
15000Dal的超滤离心管或者超滤膜进行。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的制备方法，其中，该制备方法包括以下步骤：将含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液，或第一上清液置于高压蒸汽灭菌锅中，115
‑
126℃加热20min
‑
30min或90
‑
100℃水浴加热30min
‑
60min；对经过加热的液体进行第二次离心获取第二上清液，然后进行超滤处理。5.根据权利要求1
‑
4任一项所述的制备方法，其中，该制备方法包括以下步骤：将含纳豆促纤溶活性物质的纳豆水浸提液，或第一上清液置于高压蒸汽灭菌锅中，121℃加热20min
‑
30min或100℃水浴加热30min
‑
60min...

【专利技术属性】
技术研发人员：张勋力，张迎庆，
申请(专利权)人：北京纳百恩食品有限公司，
类型：发明
国别省市：