苯妥英钠血药浓度检测方法技术

本发明专利技术公开了一种苯妥英钠血药浓度检测方法，采用二维液相色谱仪系统，包括以下步骤：S1制备溶液，溶液包括空白血浆溶液、标准溶液、系统适用性溶液和供试品溶液；S2设置色谱参数，一维柱色谱条件的参数为：填充剂为亲水性的固相萃取柱；一维洗脱液包括甲醇和水，一维洗脱方式为梯度洗脱；二维柱色谱条件的参数为：二维柱是色谱柱，二维洗脱液包括甲醇和水，二维洗脱方式为等度洗脱；S3实施检测，将标准溶液和供试品溶液注入二维液相色谱仪系统并记录典型谱图；S4定量分析，绘制苯妥英钠的标准曲线，计算得到供试品溶液中苯妥英钠的含量。本发明专利技术具有操作简单、专属性强、灵敏度高、线性范围宽、准确度高等优点。准确度高等优点。准确度高等优点。

【技术实现步骤摘要】
苯妥英钠血药浓度检测方法


[0001]本专利技术涉及医疗血液检测
，特别涉及一种苯妥英钠血药浓度检测方法。

技术介绍

[0002]苯妥英钠是苯妥英的钠盐，在临床上被广泛应用于生物学活性和药理治疗，例如可以用来作为抗癫痫发作的药物、用于治疗轻度高血压、三叉神经痛和心律失常等。作为成人癫痫的首选药物，苯妥英钠具有治疗指数低、安全范围窄、个体差异大等特点，在临床上若剂量和用法不当，则可导致疗效不佳或者出现严重毒副作用，因此对苯妥英钠进行血药浓度监测及个体用药十分有必要。目前已报道测定苯妥英钠血药浓度的检测方法主要包括紫外分光光度法、玻碳电极伏安法、毛细管区电泳法、单扫描示波极谱法、高精度散射光度滴定法、相色谱法等，其中应用较多的由高效液相色谱法，其具有稳定、快速、干扰因素少等特点，虽然高效液相色谱法对苯妥英钠的检测效果相较于其他检测方法十分突出，但是目前针对苯妥英钠采取的检测方法仍然比较原始和片面，相关研究也比较缺乏，苯妥英钠仍然存在着检测效率较低、重现性不佳、分析时间较长等缺陷，因此提出一种针对性极强的苯妥英钠血药浓度检测方法很有必要。

技术实现思路

[0003]基于现有技术中存在的上述缺陷，本申请提出了一种苯妥英钠血药浓度检测方法，能够快速、准确且高效地检测人体血液样品中的苯妥英钠含量。
[0004]专利技术采用的技术方案是：一种苯妥英钠血药浓度检测方法，采用二维液相色谱仪系统，包括以下步骤：
[0005]S1、制备溶液，所述溶液包括由正常人空白血浆制得的空白血浆溶液、含有苯妥英钠的标准溶液、混合有苯妥英钠和正常人空白血浆的系统适用性溶液、由正在进行苯妥英钠治疗的患者的血浆制得的供试品溶液；
[0006]S2、设置色谱参数，在所述二维液相色谱仪系统上设置一维柱色谱条件的参数、二维柱色谱条件的参数、大体积进样条件的参数和阀切换条件的参数，并使用所述空白血浆溶液和所述系统适用性溶液确认，其中，所述一维柱色谱条件的参数为：一维柱是填充剂为亲水性聚氧乙烯和疏水基的苯基以一定比例键合的固相萃取柱；一维洗脱液包括一维流动相A和一维流动相B，所述一维流动相A为甲醇，所述一维流动相B为水；一维洗脱方式为梯度洗脱；所述二维柱色谱条件的参数为：二维柱是填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱；二维洗脱液包括二维流动相A和二维流动相B，所述二维流动相A为甲醇，所述二维流动相B为水；二维洗脱方式为等度洗脱；
[0007]S3、实施检测，将所述供试品溶液和不同体积的所述标准溶液分别注入所述二维液相色谱仪系统，并记录典型谱图；
[0008]S4、定量分析
[0009]分析得到不同质量浓度下的苯妥英钠各自对应的苯妥英钠图谱的峰面积，绘制苯
妥英钠的标准曲线，分析得到供试品溶液对应的苯妥英钠的峰面积，计算得到供试品溶液中苯妥英钠的含量。
[0010]进一步地，所述一维流动相A甲醇在一维洗脱液中的体积占比不低于10％且不高于80％。
[0011]进一步地，所述一维洗脱液以0.2mL/min
‑
1.5mL/min的流速流经温度范围为20℃
‑
35℃的所述一维柱，以富集纯化样品中的苯妥英钠。
[0012]进一步地，所述一维洗脱液的梯度洗脱程序为：0min
‑
6.5min，流速为0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比为1：9；6.5min
‑
7.0min，流速升高至1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比改变为8：2；7.0min
‑
9.0min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在8：2；9.0min
‑
9.2min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比改变为1：9；9.2min
‑
11.0min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9；11.0min
‑
11.5min，流速下降至0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9；11.5min
‑
15min，流速维持在0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9。
[0013]进一步地，在一维洗脱时，为一维洗脱液注入水进行稀释，注水稀释程序为：0min
‑
3min，水的流速为1.2mL/min；3min
‑
3.1min，水的流速下降至0.1mL/min；3.1min
‑
14.5min，水的流速保持在0.1mL/min；14.5min
‑
14.8min，水的流速上升至1.2mL/min；14.8min
‑
15min，水的流速保持在1.2mL/min。
[0014]进一步地，所述二维洗脱液以0.8mL/min
‑
1.2mL/min的流速流经温度范围为20
‑
35℃的所述二维柱，以分离和定量分析苯妥英钠。
[0015]进一步地，所述二维洗脱液中所述二维流动相A甲醇：二维流动相B水的体积比为73:27。
[0016]进一步地，所述等度洗脱程序为0min
‑
15min，流速为1.0mL/min。
[0017]进一步地，所述大体积进样条件的参数为200μL。
[0018]优选地，所述一维柱为MF Ph
‑
1 S
‑
5固定萃取柱，规格为4.0mml.D.
×
10mm；所述二维柱为AcclaimTM120 C18色谱柱，规格为250
×
4.6mm，5μm。
[0019]与现有技术比较，本专利技术提出的苯妥英钠血药浓度检测方法具有操作简单、专属性强、灵敏度高、线性范围宽、准确度高等优点和重现性高等特点，依靠二维洗脱的方式，在极短的时间能够实现苯妥英钠的富集和定量分析，提高了医院监测患者体内苯妥英钠的血药浓度的效率，缩减了临床诊断时间，极大节约时间和成本，实现精准医疗。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0021]图1为本专利技术中二维液相色谱仪系统工作原理示意图；
[0022]图2为本专利技术中第一次进样的标准溶液的典型谱图；
[0023]图3为本专利技术中第二次进样的标准溶液典型谱图；
[0024]图4为本专利技术中空白血浆溶液典型谱图；
[0025]图5为本专利技术中系统适用性溶液典型谱图；
[0026]图6为本专利技术中标准溶液的标准曲线图；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种苯妥英钠血药浓度检测方法，采用二维液相色谱仪系统，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备溶液所述溶液包括由正常人空白血浆制得的空白血浆溶液、含有苯妥英钠的标准溶液、混合有苯妥英钠和正常人空白血浆的系统适用性溶液、由正在进行苯妥英钠治疗的患者的血浆制得的供试品溶液；S2、设置色谱参数在所述二维液相色谱仪系统上设置一维柱色谱条件的参数、二维柱色谱条件的参数、大体积进样条件的参数和阀切换条件的参数，并使用所述空白血浆溶液和所述系统适用性溶液确认，其中所述一维柱色谱条件的参数为：一维柱是填充剂为亲水性聚氧乙烯和疏水基的苯基以一定比例键合的固相萃取柱；一维洗脱液包括一维流动相A和一维流动相B，所述一维流动相A为甲醇，所述一维流动相B为水；一维洗脱方式为梯度洗脱；所述二维柱色谱条件的参数为：二维柱是填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱；二维洗脱液包括二维流动相A和二维流动相B，所述二维流动相A为甲醇，所述二维流动相B为水；二维洗脱方式为等度洗脱；S3、实施检测将所述供试品溶液和不同体积的所述标准溶液分别注入所述二维液相色谱仪系统，并记录典型谱图；S4、定量分析分析得到不同质量浓度下的苯妥英钠各自对应的苯妥英钠图谱的峰面积，绘制苯妥英钠的标准曲线，分析得到供试品溶液对应的苯妥英钠的峰面积，计算得到供试品溶液中苯妥英钠的含量。2.根据权利要求1中所述的苯妥英钠血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维流动相A甲醇在一维洗脱液中的体积占比不低于10％且不高于80％。3.根据权利要求2中所述的苯妥英钠血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维洗脱液以0.2mL/min
‑
1.5mL/min的流速流经温度范围为20℃
‑
35℃的所述一维柱，以富集纯化样品中的苯妥英钠。4.根据权利要求3中所述的苯妥英钠血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维洗脱液的梯度洗脱程序为：0min
‑
6.5min，流速为0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比为1：9；6.5min
‑
7.0min，流速升高至1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比改变为8：2；7.0min
‑
9.0min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在8：2；
9.0min
‑
9.2min，流速...

【专利技术属性】
技术研发人员：李效宽，贺宇，
申请(专利权)人：内蒙古帕默康创医疗仪器有限公司，
类型：发明
国别省市：