奥沙西泮血药浓度检测方法技术

本发明专利技术公开了一种奥沙西泮血药浓度检测方法，采用二维液相色谱仪系统，包括以下步骤：S1制备溶液，溶液包括空白血浆溶液、标准溶液、系统适用性溶液和供试品溶液；S2设置色谱参数，一维柱色谱条件的参数为：填充剂为亲水性的固相萃取柱；一维洗脱液包括甲醇和水，一维洗脱方式为梯度洗脱；二维柱色谱条件的参数为：二维柱是色谱柱，二维洗脱液包括乙腈和水，二维洗脱方式为等度洗脱；S3实施检测，将标准溶液和供试品溶液注入二维液相色谱仪系统并记录典型谱图；S4定量分析，绘制奥沙西泮的标准曲线，计算得到供试品溶液中奥沙西泮的含量。本发明专利技术具有操作简单、专属性强、灵敏度高、线性范围宽、准确度高等优点。准确度高等优点。准确度高等优点。

【技术实现步骤摘要】
奥沙西泮血药浓度检测方法


[0001]本专利技术涉及医疗血液检测
，特别涉及一种奥沙西泮血药浓度检测方法。

技术介绍

[0002]奥沙西泮，属于抗焦虑药物，主要用于治疗焦虑症、失眠、神经官能症、焦虑合并精神抑郁症和急性酒精戒断症等神经系统疾病,而且具有起效快和适用范围广等特点，因而奥沙西泮也是目前临床治疗精神性疾病的重要药品，但过量使用仍可导致中枢神经系统抑制和呼吸抑制,重者出现昏迷、呼吸抑制、心动过缓、低血压、低温及横纹肌溶解等症状。因此对奥沙西泮进行血药浓度监测仍是有必要的。目前，有关体液中奥沙西泮分析测定的方法报道不是很多，关于奥沙西泮的测定方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法等。现有技术中对奥沙西泮的检测方法主要为高效液相色谱法，需先对血浆进行萃取，再注入到检测系统中，血浆流经色谱柱对奥沙西泮进行分离，最终得到色谱图，虽然现有的检测方式已经比较完善，但是现有的方法血浆需人工进行前处理(萃取)，检测结果不稳定，且整个检测周期会变的很长，奥沙西泮的检测效率仍然较低。

技术实现思路

[0003]基于现有技术中存在的上述缺陷，本申请提出了一种奥沙西泮血药浓度检测方法，能够快速、准确且高效地检测人体血液样品中的奥沙西泮含量。
[0004]专利技术采用的技术方案是：一种奥沙西泮血药浓度检测方法，采用二维液相色谱仪系统，包括以下步骤：S1、制备溶液，所述溶液包括由正常人空白血浆制得的空白血浆溶液、含有奥沙西泮的标准溶液、混合有奥沙西泮和正常人空白血浆的系统适用性溶液、由正在进行奥沙西泮治疗的患者的血浆制得的供试品溶液；S2、设置色谱参数，在所述二维液相色谱仪系统上设置一维柱色谱条件的参数、二维柱色谱条件的参数、大体积进样条件的参数和阀切换条件的参数，并使用所述空白血浆溶液和所述系统适用性溶液确认，其中所述一维柱色谱条件的参数为：一维柱是填充剂为亲水性聚氧乙烯和疏水基的苯基以一定比例键合的固相萃取柱；一维洗脱液包括一维流动相A和一维流动相B，所述一维流动相A为甲醇，所述一维流动相B为水；一维洗脱方式为梯度洗脱；所述二维柱色谱条件的参数为：二维柱是填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱；二维洗脱液包括二维流动相A和二维流动相B，所述二维流动相A为水，所述二维流动相B为乙腈；二维洗脱方式为等度洗脱；S3、实施检测，将所述供试品溶液和不同质量浓度的所述标准溶液分别注入所述二维液相色谱仪系统，并记录典型谱图；S4、定量分析，分析得到不同质量浓度下的奥沙西泮各自对应的奥沙西泮图谱的峰面积，绘制奥沙西泮的标准曲线，分析得到供试品溶液对应的奥沙西泮的峰面积，计算得到供试品溶液中奥沙西泮的含量。
[0005]进一步地，所述一维流动相A甲醇在一维洗脱液中的体积占比不低于10％且不高于80％。
[0006]进一步地，所述一维洗脱液以0.2mL/min
‑
1.5mL/min的流速流经温度范围为20℃
‑
35℃的所述一维柱，以富集纯化样品中的奥沙西泮。
[0007]进一步地，所述一维洗脱液的梯度洗脱程序为：0min
‑
7.0min，流速为0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比为1：9；7.0min
‑
7.5min，流速升高至1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比改变为8：2；7.5min
‑
10.0min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在8：2；10.0min
‑
10.2min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比改变为1：9；10.2min
‑
11.0min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9；11.0min
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11.5min，流速下降至0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9；11.5min
‑
15min，流速维持在0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9。
[0008]进一步地，在一维洗脱时，为一维洗脱液注入水进行稀释，注水稀释程序为：0min
‑
3min，水的流速为1.2mL/min；3min
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3.1min，水的流速下降至0.1mL/min；3.1min
‑
13.5min，水的流速保持在0.1mL/min；13.5min
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13.8min，水的流速上升至1.2mL/min；13.8min
‑
15min，水的流速保持在1.2mL/min。
[0009]进一步地，所述二维洗脱液以0.8mL/min
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1.2mL/min的流速流经温度范围为20
‑
35℃的所述二维柱，以分离和定量分析奥沙西泮。
[0010]进一步地，所述二维洗脱液中所述二维流动相A水：二维流动相B乙腈的体积比为52:48。
[0011]进一步地，所述等度洗脱程序为0min
‑
15min，流速为1.0mL/min。
[0012]进一步地，所述大体积进样条件的参数为100μL。
[0013]优选地，根据权利要求1中所述的奥沙西泮血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维柱为MF Ph
‑
1 S
‑
5固定萃取柱，规格为4.0mml.D.
×
20mm；所述二维柱为AcclaimTM120 C18色谱柱，规格为250
×
4.6mm，5μm。
[0014]与现有技术比较，本专利技术提出的奥沙西泮血药浓度检测方法具有操作简单、专属性强、灵敏度高、线性范围宽、准确度高等优点和重现性高等特点，依靠二维洗脱的方式，在极短的时间能够实现奥沙西泮的富集和定量分析，提高了医院监测患者体内奥沙西泮的血药浓度的效率，缩减了临床诊断时间，极大节约时间和成本，实现精准医疗。
附图说明
[0015]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0016]图1为本专利技术中二维液相色谱仪系统工作原理示意图；
[0017]图2为本专利技术中第一次进样的标准溶液的典型谱图；
[0018]图3为本专利技术中第一次进样的标准溶液的光谱图；
[0019]图4为本专利技术中第二次进样的标准溶液典型谱图；
[0020]图5为本专利技术中第二次进样的标准溶液的光谱图；
[0021]图6为本专利技术中空白血浆溶液典型谱图；
[0022]图7为本专利技术中系统适用性溶液典型谱图；
[0023]图8为本专利技术中标准本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种奥沙西泮血药浓度检测方法，采用二维液相色谱仪系统，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备溶液所述溶液包括由正常人空白血浆制得的空白血浆溶液、含有奥沙西泮的标准溶液、混合有奥沙西泮和正常人空白血浆的系统适用性溶液、由正在进行奥沙西泮治疗的患者的血浆制得的供试品溶液；S2、设置色谱参数在所述二维液相色谱仪系统上设置一维柱色谱条件的参数、二维柱色谱条件的参数、大体积进样条件的参数和阀切换条件的参数，并使用所述空白血浆溶液和所述系统适用性溶液确认，其中所述一维柱色谱条件的参数为：一维柱是填充剂为亲水性聚氧乙烯和疏水基的苯基以一定比例键合的固相萃取柱；一维洗脱液包括一维流动相A和一维流动相B，所述一维流动相A为甲醇，所述一维流动相B为水；一维洗脱方式为梯度洗脱；所述二维柱色谱条件的参数为：二维柱是填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱；二维洗脱液包括二维流动相A和二维流动相B，所述二维流动相A为水，所述二维流动相B为乙腈；二维洗脱方式为等度洗脱；S3、实施检测将所述供试品溶液和不同质量浓度的所述标准溶液分别注入所述二维液相色谱仪系统，并记录典型谱图；S4、定量分析分析得到不同质量浓度下的奥沙西泮各自对应的奥沙西泮图谱的峰面积，绘制奥沙西泮的标准曲线，分析得到供试品溶液对应的奥沙西泮的峰面积，计算得到供试品溶液中奥沙西泮的含量。2.根据权利要求1中所述的奥沙西泮血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维流动相A甲醇在一维洗脱液中的体积占比不低于10％且不高于80％。3.根据权利要求2中所述的奥沙西泮血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维洗脱液以0.2mL/min
‑
1.5mL/min的流速流经温度范围为20℃
‑
35℃的所述一维柱，以富集纯化样品中的奥沙西泮。4.根据权利要求3中所述的奥沙西泮血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维洗脱液的梯度洗脱程序为：0min
‑
7.0min，流速为0.2mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比为1：9；7.0min
‑
7.5min，流速升高至1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比改变为8：2；7.5min
‑
10.0min，流速维持在1.5mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在8：2；
10.0min
‑
10.2min，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李效宽，彭枝濂，
申请(专利权)人：内蒙古帕默康创医疗仪器有限公司，
类型：发明
国别省市：