一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法技术

本发明专利技术涉及中药检测技术领域，具体是一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法。本发明专利技术采用UPLC

【技术实现步骤摘要】
一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法


[0001]本专利技术涉及中药检测
，具体是一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法。

技术介绍

[0002]透骨香为杜鹃花科植物滇白珠Gaultheria yunnanensis(Franch.)Rehd.的干燥全株，主要分布在云南、四川、广西、贵州等地，全株均可入药，性平，味辛，具有清热解毒、活血祛瘀、祛风除温、降气平喘等功效,用于眩晕、风寒感冒、咳嗽哮喘、闭经、跌扑肿痛、风湿痹症的治疗，始载于明初兰茂所著的《滇南本草》(1459年)，在《广西植物资源》、《云南中草药》等地方书籍中也有描述。目前各省标准对于透骨香的用药部位并不统一，在《云南省中药材标准(第二册
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彝族药)》中该植物名为透骨草，是滇白珠的干燥地上部分。而《中华本草》苗药卷中记载的透骨香为滇白珠的全株或根，《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003年版)收载的药用部位为“全株”。临床常见含透骨香的复方成药有“滇白珠糖浆”、“复方伸筋胶囊”、“痛风灵”等，为苗族民间治疗类风湿病的习用药材，疗效突出。透骨香药材临床开发价值较高，但各地标准和著作中对其药用部位说法不一，限制了透骨香药材质量控制水平的提升和药材资源的深层次开发利用。
[0003]同一药材的不同药用部位，其成分含量会有较大的差异，如连翘不同部位中连翘酯苷A的含量相比较，连翘叶中连翘酯苷A的含量最高，青翘、连翘花、连翘心中连翘酯苷A的含量均较高，老翘中连翘酯苷A的含量较低。目前关于透骨香质量控制方面的研究较少，除薄层色谱鉴别研究外，只对透骨香中的水杨酸、总黄酮、槲皮苷，槲皮素、木脂素苷，水杨酸甲酯等单个或一类成分进行含量测定。Zeng使用CE
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ED法检测了透骨香及其制剂，包括(+)
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儿茶素、芦丁、龙胆酸、香草酸、水杨酸、槲皮素和原儿茶酸进行了鉴别和测定。但是样品量少，且并未对其不同部位进行分析。
[0004]申请人对透骨香进行了化学成分分析，从鉴定的18个成分中选择了与透骨香药理作用密切相关的原儿茶酸、表儿茶素、绿原酸、槲皮素、白珠树苷、滇白珠苷A这6个成分作为其质量。
[0005]因此，开发一种能同时测定透骨香药材中原儿茶酸、表儿茶素、绿原酸、槲皮素、白珠树苷、滇白珠苷A这6个成分的测定方法是很有必要的。

技术实现思路

[0006]为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本专利技术提供一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法，具体如下：
[0007]一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法，采用UPLC
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MS/MS方法进行测定；使用Acquity I
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Class UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm
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100mm，内径1.7μm)进行分析；色谱柱和自动进样器分别保持在40℃和25℃，流速为0.3mL/min，进样量为1μL；流动相由0.1％的甲酸水溶液A和0.1％的乙腈甲酸B组成；洗脱梯度如下：0
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0.5min，10％～10％B；0.5
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2.5min；
10％～40％B；2.5
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4分钟，40％～90％B；4
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4.5分钟，90％～90％B；4.5
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6分钟，90％～10％B。
[0008]进一步的，所述UPLC
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MS/MS方法，所用UPLC
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MS/MS系统由配备有电喷雾电离源的ACQUITY I
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Class UPLC系统和XEVO TQS
‑
三重四极串联质谱仪组成。进一步的，所述UPLC
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MS/MS系统，还配备了Waters VanGuard BEH C18(2.1mm
×
5mm，1.7μm)色谱柱作为保护柱，对杂质进行过滤。
[0009]进一步的，所述UPLC
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MS/MS方法，其质谱仪参数如下：毛细管电压3.0kV；毛细管电离电压3.0kV；离子源温度为120℃；喷雾气体和反吹气体，N2；脱溶剂气流量，650L/h；和去溶剂化气体温度为350℃，使用多反应监测(MRM)模式进行定量。
[0010]进一步的，所述多反应监测模式下分析物的参数，具体如下：
[0011][0012]进一步的，所述供试品溶液通过如下步骤制备得到：精密称取透骨香药材，精密加入50％甲醇25mL，称重后回流2h，冷却，加入50％甲醇进行补重，取200μL加入50％甲醇800μL涡混，离心12000rpm，10min，取上清液。
[0013]进一步的，所述对照品溶液通过如下步骤制备得到：精密称取对照品适量，用甲醇稀释至10mL，分别获得绿原酸(1.020g/L)、原儿茶酸(1.035g/L)、表儿茶素(1.018g/L)、槲皮素(0.878g/L)、白珠树苷(1.030g/L)和滇白珠苷A(1.116g/L)的储备液；精密量取上述六种对照品储备溶液并稀释至最终浓度为绿原酸(0.012mg/mL)、原儿茶酸(0.041mg/mL)、表儿茶素(0.101mg/mL)、槲皮素(0.137mg/mL)、白珠树苷(0.077mg/mL)和滇白珠苷A(0.071mgm/L)；精密量取上述六种对照品的终浓度原液100μL，混合后得到混合对照品溶液，依次用2倍稀释法稀释后，保存在
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20℃环境中备用。
[0014]进一步的，所述多种成分含量测定，是同时测定透骨香药材中的原儿茶酸、表儿茶素、绿原酸、槲皮素、白珠树苷、滇白珠苷A含量。
[0015]进一步的，所述UPLC
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MS/MS方法，所得数据均使用MasslynxTM V 4.1软件(Waters Corp.，Millford，MA，USA)获得，并使用QuanlynaTM V4.1(Waters Corp.，Millford，MA，USA)工作站进行处理。
[0016]本专利技术的具体操作步骤如下：
[0017](1)对照品溶液的制备：
[0018]精密称取对照品适量，用甲醇稀释至10mL，分别获得绿原酸(1.020g/L)、原儿茶酸(1.035g/L)、表儿茶素(1.018g/L)、槲皮素(0.878g/L)、白珠树苷(1.030g/L)和滇白珠苷A
(1.116g/L)的储备液。精密量取上述六种对照品储备溶液并稀释至最终浓度为绿原酸(0.012mg/mL)、原儿茶酸(0.041mg/mL)、表儿茶素(0.101mg/mL)、槲皮素(0.137mg/mL)、白珠树苷(0.077mg/mL)和滇白珠苷A(0.071mgm/L)。精密量取上述六种对照品的终浓度原液100μL，混合后得到混合对照品溶液，依次用2倍稀释法稀释后，保存在冰箱(
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20℃)中备用。
[0019](2)供试品溶液的制备：
[0020]精密称取约0.2g药材，精密本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法，其特征在于，采用UPLC
‑
MS/MS方法进行测定；使用AcquityI
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Class UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm
×
100mm，内径1.7μm)进行分析；色谱柱和自动进样器分别保持在40℃和25℃，流速为0.3mL/min，进样量为1μL；流动相由0.1％的甲酸水溶液A和0.1％的乙腈甲酸B组成；洗脱梯度如下：0
–
0.5min，10％～10％B；0.5
–
2.5min；10％～40％B；2.5
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4分钟，40％～90％B；4
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4.5分钟，90％～90％B；4.5
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6分钟，90％～10％B。2.根据权利要求1所述的透骨香药材中多种成分含量测定的方法，其特征在于，所述UPLC
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MS/MS方法，所用UPLC
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MS/MS系统由配备有电喷雾电离源的ACQUITYI
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Class UPLC系统和XEVO TQS
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三重四极串联质谱仪组成。3.根据权利要求2所述的透骨香药材多种成分含量测定的方法，其特征在于，所述UPLC
‑
MS/MS系统，还配备了Waters VanGuard BEH C18(2.1mm
×
5mm，1.7μm)色谱柱。4.根据权利要求1所述的透骨香药材多种成分含量测定的方法，其特征在于，所述UPLC
‑
MS/MS方法，其质谱仪参数如下：毛细管电压3.0kV；毛细管电离电压3.0kV；离子源温度为120℃；喷雾气体和反吹气体，N2；脱溶剂气流量，650L/h；和去...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑林，黄勇，周祖英，迟明艳，巩仔鹏，李月婷，陆苑，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：