用于减少同种异体细胞疗法中的移植物排斥的组合物和方法技术

本申请提供了经修饰的治疗细胞，其过表达免疫检查点配体如PD

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于减少同种异体细胞疗法中的移植物排斥的组合物和方法
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求于2020年4月1日提交的国际专利申请号PCT/CN2020/082759的优先权权益，将其内容通过援引以其全文并入本文。序列表以ASCII文本文件提交
[0002]以下以ASCII文本文件提交的内容通过援引以其全文并入本文：计算机可读形式(CRF)的序列表(文件名：761422002341.txt，记录日期：2021年3月25日，大小：149KB)。


[0003]本申请总体上涉及免疫疗法，并且更特别地涉及用于减少过继细胞疗法中不希望的免疫应答的组合物和方法。

技术介绍

[0004]过继细胞疗法或过继细胞转移(ACT)正在成为越来越重要的治疗范例，特别是在癌症治疗中。ACT是指将治疗细胞(最典型的是免疫细胞)转移到患者体内。这些细胞可来源于患者(即，自体疗法)或来自相同物种的另一个体(即，同种异体疗法)。ACT的目标是改善患者免疫系统的功能和特征。特别地，在癌症免疫疗法中，ACT的目标是触发针对癌症的免疫应答。尽管T细胞在ACT中最常使用，但其他免疫细胞类型，如NK细胞、淋巴细胞(例如，肿瘤浸润性淋巴细胞或TIL)、树突状细胞和髓细胞也已被应用。
[0005]理想情况下，向接受ACT的患者输注(或在自体疗法的情况下重新输注)的治疗细胞将在该患者体内扩增并持续存在。为了改善ACT的疗效，通常使用淋巴细胞清除作为新辅助疗法，其可将可能重新填充免疫细胞空间的竞争性免疫细胞清除。这对于同种异体疗法尤其重要，因为适应性和先天性免疫系统都可针对输注的非自身细胞产生免疫应答。有时，也使用骨髓细胞清除，其应用大剂量化学疗法杀死骨髓中的细胞。然而，淋巴细胞清除或骨髓细胞清除是相当剧烈的措施，由于它们对免疫系统的影响，往往会导致严重的副作用。据此，预防或减少针对输注的ACT细胞的不希望的免疫应答将是有利的，这可以增加ACT细胞在体内的持久性并增强该疗法的益处。理想情况下，这种策略会使得对淋巴细胞清除或骨髓细胞清除的需求以及相关的副作用减少。
[0006]免疫系统已经发展出针对外来药剂的复杂且有效的机制。不希望的免疫应答是阻碍ACT、尤其是同种异体ACT(包括同种异体嵌合抗原受体(CAR)T细胞)成功的最大障碍。一个障碍是移植物抗宿主病(GvHD)，其中供体T细胞将患者的细胞识别为外来物，导致对患者健康组织的攻击。另一障碍是宿主抗移植物病(HvGD)，其中患者(即宿主)体内的T细胞将供体细胞识别为外来物，导致供体细胞受到攻击，引起移植物排斥。GvHD由供体T细胞表面的T细胞受体(TCR)介导，该TCR将宿主细胞上的人白细胞抗原(HLA)识别为外来物，并启动由供体T细胞进行的攻击。HvGD由宿主T细胞表面上的TCR介导，该TCR将供体细胞上的HLA识别为外来物，并启动由宿主T细胞进行的攻击。
[0007]为了缓解GvHD，已使用基因组编辑技术从供体CAR
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T细胞的基因组中敲除TCR基
因。许多公司还会将供体CAR
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T细胞中的β
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2微球蛋白(B2M)敲除，以减少由宿主T细胞引起的移植物排斥。最近开发的基因组编辑工具，如转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)、锌指核酸酶和CRISPR
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Cas9系统有效且易于操作。然而，由于经基因组编辑的细胞的免疫原性，临床上相关的人类体细胞的基因组编辑仍然是一个挑战。例如，将B2M敲除会增加自然杀伤(NK)细胞介导的移植物排斥的风险。迄今为止，同种异体αβT细胞疗法产品尚未取得有希望的临床结果(Sommer C等人,Mol Ther.(2019)27(6):1126
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1138；MacLeod DT等人,Mol Ther.(2017)25(4):949
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96；Sheridan C等人,Nat Biotechnol(2018)36,375
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377；Qasim W.Am J Hematol.2019；94:S50
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S54)。因此，存在对适用于同种异体移植的治疗细胞的需求，其中不希望的免疫应答风险降低。
[0008]本文提到的所有出版物、专利、专利申请和公开的专利申请的披露内容通过援引以其全文特此并入本文。

技术实现思路

[0009]本申请提供了经修饰的治疗细胞及其使用方法，这些经修饰的治疗细胞适用于过继细胞疗法，其中不希望的免疫应答(例如，针对这些治疗细胞的移植物排斥)减少。
[0010]本申请的一方面提供了经修饰的治疗细胞，其包含编码免疫检查点配体(ICL)的第一异源核酸序列，其中该治疗细胞表达主要组织相容性复合体(MHC)分子。
[0011]本申请的一方面提供了在有需要的个体中减少同种异体治疗细胞的移植物排斥的方法，该方法包括向该个体施用有效量的同种异体治疗细胞，其中这些同种异体治疗细胞包含编码免疫检查点配体(ICL)的第一异源核酸序列，并且其中这些治疗细胞表达MHC分子。
[0012]在根据上述经修饰的治疗细胞或方法中任一个的一些实施例中，治疗细胞表达MHC I类分子。在一些实施例中，治疗细胞表达MHC II类分子。在一些实施例中，治疗细胞的β2
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微球蛋白(B2M)基因未经基因修饰。在一些实施例中，治疗细胞的MHC基因未经基因修饰。在一些实施例中，治疗细胞不会引起NK细胞的增殖或杀伤。
[0013]在根据上述经修饰的治疗细胞或方法中任一个的一些实施例中，ICL选自由以下组成的组：PD
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L1、CD155、CD112、FGL1、半乳凝素
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9、CD47、B7H3和B7H4。在一些实施例中，ICL是PD
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L1。在一些实施例中，ICL是CD155。在一些实施例中，ICL是CD112。在一些实施例中，ICL是FGL1。在一些实施例中，ICL是半乳凝素
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9。在一些实施例中，ICL是CD47。在一些实施例中，ICL是B7H3。在一些实施例中，ICL是B7H4。在一些实施例中，ICL包含与选自由SEQ ID NO:1
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8组成的组的氨基酸序列具有至少约85％(例如，至少约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高中的任一个)序列同一性的氨基酸序列。在一些实施例中，ICL包含选自由SEQ ID NO:1
‑
8组成的组的氨基酸序列。
[0014]在根据上述经修饰的治疗细胞或方法中任一个的一些实施例中，治疗细胞是免疫细胞。在一些实施例中，免疫细胞选自由以下组成的组：细胞毒性T细胞、辅助性T细胞、NK细胞、NK
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T细胞、αβT细胞、γδT细胞、肿瘤浸润性T细胞、树突状细胞(DC)激活的T细胞、和外周血单核细胞(PBMC)。在一些实施例中，治疗细胞是T细胞。在一些实施例中，治疗细胞是γδT细胞。在一些实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种经修饰的治疗细胞，其包含编码免疫检查点配体(ICL)的第一异源核酸序列，其中所述治疗细胞表达主要组织相容性复合体(MHC)分子。2.如权利要求1所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞表达MHC I类分子。3.如权利要求1或2所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞表达MHCII类分子。4.如权利要求1
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3中任一项所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞的β2
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微球蛋白(B2M)基因未经基因修饰。5.如权利要求4所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞的MHC基因未经基因修饰。6.如权利要求1
‑
5中任一项所述的经修饰的治疗细胞，其中所述ICL选自由以下组成的组：PD
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L1、CD155、CD112、FGL1、半乳凝素
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9、CD47、B7H3和B7H4。7.如权利要求6所述的经修饰的治疗细胞，其中所述ICL是PD
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L1。8.如权利要求1
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6中任一项所述的经修饰的治疗细胞，其中所述ICL包含选自由SEQ ID NO:1
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8组成的组的氨基酸序列、或其变体，所述变体包含与选自由SEQ ID NO:1
‑
8组成的组的氨基酸序列具有至少约85％序列同一性的氨基酸序列。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是免疫细胞。10.如权利要求9所述的经修饰的治疗细胞，其中所述免疫细胞选自由以下组成的组：细胞毒性T细胞、辅助性T细胞、NK细胞、NK
‑
T细胞、αβT细胞、γδT细胞、肿瘤浸润性T细胞、树突状细胞(DC)激活的T细胞、和外周血单核细胞(PBMC)。11.如权利要求10所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是T细胞。12.如权利要求11所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是γδT细胞。13.如权利要求12所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是γ9δ2T细胞。14.如权利要求12所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是δ1T细胞。15.如权利要求12所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是δ3T细胞。16.如权利要求1
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8中任一项所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是干细胞。17.如权利要求16所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是胚胎干细胞。18.如权利要求16所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是造血干细胞(HSC)。19.如权利要求1
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18中任一项所述的经修饰的治疗细胞，其进一步包含编码工程化受体的第二异源核酸序列。20.如权利要求19所述的经修饰的治疗细胞，其中所述工程化受体选自由以下组成的组：嵌合抗原受体(CAR)、重组T细胞受体(TCR)、T细胞抗原偶联剂(TAC)受体和TCR融合蛋白(TFP)。21.如权利要求20所述的经修饰的治疗细胞，其中所述治疗细胞是CAR
‑
T细胞。22.如权利要求19
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21中任一项所述的经修饰的治疗细胞，其中所述工程化受体靶向肿瘤抗原，所述肿瘤抗原选自由以下组成的组：CD19、BCMA、NY
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ESO
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1、VEGFR2、MAGE
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A3、CD20、CD22、CD33、CD38、CEA、EGFR、GD2、HER2、IGF1R、间皮素、PS...

【专利技术属性】
技术研发人员：涂中原，李洁，张亚峰，武术，
申请(专利权)人：南京传奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：