本发明专利技术公开了色氨酸在干预氧化应激诱导的肠道紊乱饮食品中的应用。色氨酸在改善D
【技术实现步骤摘要】
色氨酸在干预氧化应激诱导的肠道紊乱饮食品中的应用
[0001]本专利技术属于生物
,特别涉及色氨酸在干预氧化应激诱导的肠道紊乱饮食品中的应用。
技术介绍
[0002]氧化应激(Oxidative Stress,OS)是指体内氧化与抗氧化作用失衡的一种状态,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润,蛋白酶分泌增加,产生大量氧化中间产物。氧化应激是由自由基在体内产生的一种负面作用,并被认为是导致衰老和疾病的一个重要因素。ROSs 包括超氧阴离子(.O2‑
)、羟自由基(.OH)和过氧化氢(H2O2)等; RNS包括一氧化氮(.NO)、二氧化氮(.NO2)和过氧化亚硝酸盐(.ONOO
‑
) 等。机体存在两类抗氧化系统,一类是酶抗氧化系统,包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH
‑
Px) 等;另一类是非酶抗氧化系统,包括麦角硫因、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、褪黑素、α
‑
硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒 (Se)等。氧化应激与各种各样疾病均密切相关。肠道紊乱是氧化应激引起的问题之一。
技术实现思路
[0003]为了解决氧化应激反应诱发的肠道疾病,本专利技术研究色氨酸在预氧化应激诱导的肠道紊乱饮食品中的应用。
[0004]色氨酸在改善D
‑
半乳糖造成的氧化应激及肝肾损伤饮食品中的应用。
[0005]色氨酸在缓解氧化应激造成的肠屏障损伤及肠道炎症饮食品中的应用。
[0006]色氨酸是动物的必需氨基酸,参与痛觉、睡眠、摄食和体温等生理功能的调节,具有调节基因表达、缓解应激等多种作用。正常情况下,机体对色氨酸的需要量并不大,但机体在受到应激等刺激下,由于代谢通路的改变,分解速度加快,机体需求加大。色氨酸又是一种对许多氧化剂高度敏感的色氨酸,在体内的分解途径主要有两种,即氧化脱羧生成5
‑
羟色胺(5
‑
HT)和经犬尿氨酸途径最终转变为二氧化碳和水。
[0007]本专利技术通过构建动物模型,研究了膳食中食用色氨酸对干预氧化应激诱导的肠道紊乱的影响。
[0008]通过本专利技术的研究发现膳食中食用一定量的色氨酸可以在预氧化应激诱导的肠道紊乱。这样通过膳食调整不仅可以预防和治疗疾病,还可以减少药物的伤害。
附图说明
[0009]图1为膳食色氨酸对D
‑
半乳糖诱导小鼠氧化应激的相关生理生化指标测定。(A)氧化应激相关指标;(B)肝功能及肾功能指标。数据表示为平均值
±
标准误,带有不同字母的平均值间具有显著性差异(p<0.05),n=6
‑
8/组;
[0010]图2为对膳食色氨酸对D
‑
半乳糖诱导小鼠氧化应激诱发的结肠肠屏障损伤的测定。(A)具有代表性的福尔马林固定结肠组织H&E 染色切片,可直观的观察到小鼠结肠黏液
层厚度;(B)几种紧密连接蛋白在mRNA水平上的表达情况;(C)几种炎症因子在mRNA水平上的表达情况;(D)PXR,TLR4和NF
‑
κB的mRNA水平表达情况以及PXR, TLR4,NF
‑
κB,和pNF
‑
κB蛋白免疫印迹分析;数据表示为平均值
±
标准误,带有不同字母的平均值间具有显著性差异(p<0.05),n= 6
‑
8/组;
[0011]图3为结肠组织(A)SIRT1,PGC
‑
1α,FOXO1和BAX的mRNA水平表达情况以及AMPK,pAMPK,SIRT1,PGC
‑
1α的蛋白免疫印迹分析; (B)几种G蛋白偶联受体的mRNA水平表达情况;数据表示为平均值
±
标准误,带有不同字母的平均值间具有显著性差异(p<0.05), n=6
‑
8/组;
[0012]图4为膳食色氨酸对肠道微生物组成结构的影响。(A)肠道微生物门水平相对丰度柱状图;(B)肠道微生物属水平UPGMA分析。分析方法采用Kruskal
‑
Wallis分析和Dunn
’
s test事后检验,n=6
‑
8/ 组。
[0013]图5为接肠内容物中色氨酸代谢物的浓度。(A)5
‑
HT和5
‑
HTP浓度;(B)吲哚及其衍生物浓度。数据表示为平均值
±
标准误,带有不同字母的平均值间具有显著性差异(p<0.05),n=6
‑
8/组。
具体实施方式
[0014]除有定义外,以下实施例中所用的技术术语具有与本专利技术创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂,如无特殊说明,均为常规生化试剂;所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。
[0015]下面结合实施例来详细说明本专利技术创造。
[0016]本专利技术使用的材料
[0017]1.1主要试剂
[0018]本实验例中的D
‑
半乳糖购于美国Sigma公司;TRIzol
TM Reagent (Thermo Fisher Sientific);LunaScript
TM SuperMix Kit(New England BioLabs);SYBR qPCR Master Mix(ChamQ
TM Universal)
[0019]1.2动物
[0020]60只10周龄SPF级雄性ICR小鼠,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。小鼠饲养于南开大学实验动物中心,并维持在标准实验室条件下饲养:25
±
2℃,相对湿度50
±
5%,12小时循环光照,自由取水取食,相关实验操作符合动物实验伦理学要求。普通饲料喂养1周适应环境,实验从第二周正式开始。
[0021]1.3 D
‑
半乳糖诱导氧化应激模型的建立
[0022]本实验例采用D
‑
半乳糖皮下注射构建氧化应激小鼠模型。一周适应期后,将60只小鼠随机分成5组(Con组,D
‑
gal组,0.1%Trp 组,0.4%Trp组和0.8%Trp组),每组12只。D
‑
gal组,0.1%Trp组, 0.4%Trp组和0.8%Trp组的小鼠每日皮下注射300mg/kg D
‑
半乳糖, Con组注射等体积生理盐水,持续10周。另外,Con组和D
‑
gal组小鼠饲料为酪蛋白替换为氨基酸单体饲料(其中含色氨酸0.2%), 0.1%Trp组,0.4%Trp组和0.8%Trp组小鼠饲料分别含色氨酸0.1%, 0.4%和0.8%。
[0023]表1.实验中三组饲料的组成成分
...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.色氨酸在干预氧化应激诱导的肠道紊乱饮食品中的应用。2.色氨酸在改善D
‑
半乳糖造成的...
【专利技术属性】
技术研发人员:王硕,银佳,张博崴,王津,
申请(专利权)人:南开大学,
类型:发明
国别省市:
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