一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒，属于胶体金制备技术领域，一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法包括以下步骤：（1）将氯金酸溶液和超纯水按体积比2:98混匀，加入锥形瓶中进行油浴加热；（2）加热至130

【技术实现步骤摘要】
一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒


[0001]本专利技术属于胶体金制备
，具体涉及一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法及试剂条、试剂盒。

技术介绍

[0002]乙型肝炎病毒简称乙肝病毒，是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科(hepadnavividae)。
[0003]乙型肝炎病毒表面抗体一般在机体感染HBV后或接种乙肝疫苗后出现，对乙型肝炎病毒具有保护性免疫，被称为是一种保护性抗体。
[0004]目前，乙型肝炎病毒表面抗体常用乙肝表面抗体检测试剂盒来进行检查，乙肝表面抗体检测试剂盒的制备过程中需要进行金标垫的制备，而金标垫的制备过程中会使用胶体金，胶体金是氯金酸在某种还原剂作用下，形成的一定大小金颗粒；该金颗粒通过静电作用维系成一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，称为胶体金。
[0005]目前胶体金的制备方法一般采用还原法，其中白磷还原法可合成粒径3nm左右的金颗粒；抗坏血酸还原法可合成粒径10nm左右的金颗粒；硼氢化钠还原法可合成粒径3
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20nm左右的金颗粒；柠檬酸钠还原法可合成粒径5
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200nm左右的金颗粒。
[0006]不同粒径胶体金可直接影响产品的显色强度、灵敏度、特异性等性能。同等条件下，胶体金粒径越大，形状越不规则，制备难度越高，批间差越大，但同时显色强度越强，灵敏度越高，特异性越差。因此，制备出形状规则、性能良好的高质量胶体金是金免疫技术的基础与根本。
专利技术内容
[0007]针对上述困难，本专利技术要解决的技术问题是，提供一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，通过该方法可以制备出粒径大且形状规则的胶体金，同时可以提升产品显色强度和灵敏度，且特异性符合要求；还提供一种乙肝表面抗体检测试剂条，检测灵敏度高，显色强度好；还提供一种乙肝表面抗体检测试剂盒，使用便捷，操作简单。
[0008]为了解决以上问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，包括以下步骤：（1）将氯金酸溶液和超纯水按体积比2:98混匀，加入锥形瓶中进行油浴加热；（2）加热至130
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150℃后，一次性快速加入柠檬酸三钠溶液，其与上述加入的氯金酸溶液体积比为1：3.5，反应1min；（3）调至100℃，持续反应1min；（4）调至130
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150℃，持续反应3min；（5）调至90℃，持续反应7min，结束反应过程；
（6）恢复至室温后，避光置于2
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8℃备用；步骤（1）中，氯金酸溶液配制方法为：取1g氯金酸溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2
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8℃避光保存；步骤（2）中，柠檬酸三钠溶液配制方法为：取2g柠檬酸三钠溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2
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8℃保存。
[0009]步骤（2）中，加热至140℃。
[0010]步骤（4）中，调至140℃。
[0011]一种乙肝表面抗体检测试剂条，试剂条制备方法包括以下步骤：（1）划膜划膜液体配方：0.2M Tris，质量百分比浓度0.5%海藻糖，pH8.5；将质控线与检测线依次包被于硝酸纤维素膜上。
[0012]（2）金标垫的制备金复溶液配方：0.2M Tris，质量百分比浓度0.8%酪蛋白，质量百分比浓度0.5%吐温20，质量百分比浓度0.1% Proclin 300，质量百分比浓度0.5%蔗糖，pH8.0；用上述乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法制备出胶体金溶液，然后进行重组HBsAg标记，用金复溶液离心浓缩后，固相化于玻璃纤维上，烘干6h后，即完成金标垫的制备。
[0013]（3）样品垫的制备样品垫处理液配方：0.5M Tris，质量百分比浓度0.5% PVP10，质量百分比浓度1% BSA，质量百分比浓度0.5%吐温20，质量百分比浓度0.1% Proclin 300，质量百分比浓度0.5%蔗糖，pH8.0；将样品垫处理液固相化于玻璃纤维上，烘干6h后，即完成样品垫的制备。
[0014]（4）试剂条的组装将吸水纸、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫、PVC底板按顺序组装后裁切成试剂条。
[0015]一种乙肝表面抗体检测试剂盒，试剂盒包括检测卡，检测卡包括相互扣合的卡盖和卡体，卡盖和卡体之间具有上述的试剂条。
[0016]本专利技术采取以上技术方案，具有以下优点：传统的柠檬酸三钠还原法制备胶体金，为一步成核，反应时间短，成核速度快；但胶体金颗粒越大，制备难度越高，不均一性越为明显，粒径的大小与均一程度直接影响产品特异性、显色强度和灵敏度，因此本专利技术专利是基于传统的柠檬酸三钠还原法上，通过控制不同反应温度，进而控制胶体金的成核过程与速度，最终制备出粒径大且均一的纳米金溶胶，其所呈现出的产品检测灵敏度高、显色强度好、特异性好；本专利技术一种乙肝表面抗体检测试剂条，检测灵敏度高，显色强度好；一种乙肝表面抗体检测试剂盒，使用便捷，操作简单。
[0017]下面结合实施例对本专利技术做进一步说明。
具体实施方式
[0018]实施例1：一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，包括以下步骤：（1）将氯金酸溶液和超纯水按体积比2:98混匀，加入锥形瓶中进行油浴加热；
（2）加热至第一反应温度后，一次性快速加入柠檬酸三钠溶液，其与上述加入的氯金酸溶液体积比为1：3.5，反应1min；（3）调至第二反应温度，持续反应1min；（4）调至第三反应温度，持续反应3min；（5）调至第四反应温度，持续反应7min，结束反应过程；（6）恢复至室温后，避光置于2
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8℃备用。
[0019]上述步骤（1）中，氯金酸溶液配制方法为：取1g氯金酸溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2
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8℃避光保存；上述步骤（2）中，柠檬酸三钠溶液配制方法为：取2g柠檬酸三钠溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2
‑
8℃保存；上述步骤（2）中，第一反应温度为130℃；上述步骤（3）中，第二反应温度为100℃；上述步骤（4）中，第三反应温度为130℃；上述步骤（5）中，第四反应温度为90℃。
[0020]实施例2：一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，其制备方法包括以下步骤：（1）将氯金酸溶液和超纯水按体积比2:98混匀，加入锥形瓶中进行油浴加热；（2）加热至第一反应温度后，一次性快速加入柠檬酸三钠溶液，其与上述加入的氯金酸溶液体积比为1：3.5，反应1min；（3）调至第二反应温度，持续反应1min；（4）调至第三反应温度，持续反应3min；（5）调至第四反应温度，持续反应7min，结束反应过程；（6）恢复至室温后，避光置于2
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8℃备用。
[0021]上述步骤（1）中，氯金酸溶液配制方法为：取1g氯金酸溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将氯金酸溶液和超纯水按体积比2:98混匀，加入锥形瓶中进行油浴加热；（2）加热至130
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150℃后，一次性快速加入柠檬酸三钠溶液，其与上述加入的氯金酸溶液体积比为1：3.5，反应1min；（3）调至100℃，持续反应1min；（4）调至130
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150℃，持续反应3min；（5）调至90℃，持续反应7min，结束反应过程；（6）恢复至室温后，避光置于2
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8℃备用；步骤（1）中，氯金酸溶液配制方法为：取1g氯金酸溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2
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8℃避光保存；步骤（2）中，柠檬酸三钠溶液配制方法为：取2g柠檬酸三钠溶于超纯水中，定容至100mL，混匀后置于2
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8℃保存。2.根据权利要求1所述的一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，加热至140℃。3.根据权利要求2所述的一种乙肝表面抗体检测试剂盒用胶体金溶液的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，调至140℃。4.一种乙肝表面抗体检测试剂条，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨帆，杨致亭，梁莉甜，杨明霞，刘仁萍，朱衍杰，高小燕，
申请(专利权)人：山东康华生物医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：