油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法技术

本发明专利技术公开了油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，涉及药物分析技术领域，以解决将高效液相色谱法用于检测油溶性软膏中的依地酸盐时可行性差的问题。本发明专利技术提供的油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，通过选择合适的有机溶剂、第二稀释剂及提纯次数，可以将油溶性软膏中的依地酸盐与油脂性基质及其它辅料有效分离。通过对每一次离心分离后的水相中的依地酸盐进行检测，保证了对依地酸盐检测的准确度。本发明专利技术的液相色谱检测方法，能够简单、准确地检测油溶性软膏中依地酸盐的含量，具有准确度高、重复性好的特点。重复性好的特点。重复性好的特点。

【技术实现步骤摘要】
油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法。

技术介绍

[0002]众所周知，准确进行原研药、参比制剂或对照药中辅料的含量测定对仿制品与原研药、参比制剂或对照药一致性评价方面有非常重要的意义。依地酸盐作为稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、螯合剂，可以防止药物制剂或药品中金属离子引起的变色、变质、变浊，在药物制剂或药品中应用非常多。现常用高效液相色谱法对药物制剂或药品中依地酸盐的含量进行检测。
[0003]油溶性软膏一般是药物与油脂性基质混合制成的均匀的半固体外用制剂，其中的油脂性基质为凡士林、石蜡、液状石蜡、硅油、蜂蜡、硬脂酸和羊毛脂等。由于油脂性基质的存在，往往无法完全提取油溶性软膏中的依地酸盐，或者所得的提取液中无法完全去除油脂性基质，而这些油脂性基质往往会对高效液相色谱的色谱柱造成损坏。鉴于上述原因，将高效液相色谱法用于检测油溶性软膏中的依地酸盐时，可行性差。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，用于克服将高效液相色谱法用于检测油溶性软膏中的依地酸盐时可行性差的问题。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，其特征在于，采用高效液相色谱法检测，包括：
[0007]供试品溶液的制备：
[0008]S1、提纯：取一定量的油溶性软膏；加入有机溶剂、第二稀释剂，水浴加热一段时间后取出，涡旋混合、离心，离心后的溶液静置分层，得到提纯后的水相和有机相；
[0009]S2、取最后一次提纯后的水相，加入第一稀释剂，并用第二稀释剂定容，定容后的溶液静置衍生，过滤，采用液相色谱法检测水相中依地酸盐是否低于限值，如果是，确认提纯次数N，并转步骤S4，否则转步骤S3；
[0010]S3、对所述有机相进行提纯，包括：取所述有机相，向其中加入有机溶剂、第二稀释剂后，再次水浴加热、涡旋混合、离心、静置分层，得再次提纯后的水相和有机相，重复步骤S2；
[0011]S4、重新取步骤S1中一定量的油溶性软膏，按照确认的提纯次数N，重复步骤S1对油溶性软膏进行第一次提纯，得到第一次提纯后的水相和有机相，再重复N
‑
1(N≥2)次步骤S3，对每次提纯后的有机相进行再次提纯，得到N
‑
1(N≥2)次提纯后的水相，将所有N次提纯后的水相合并，加入第一稀释剂，并用第二稀释剂定容；定容后的溶液静置衍生，过滤，即得供试品溶液；
[0012]对所述供试品溶液进行液相色谱法检测，获得供试品溶液中依地酸盐的含量；
[0013]其中，所述有机溶剂为正庚烷、正己烷中的一种或两种。
[0014]优选地，所述液相色谱法的检测条件如下：
[0015]色谱柱：以C18、C8烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填充剂；
[0016]流动相：以乙腈
‑
四丁基氢氧化铵水溶液为流动相A，以乙腈或甲醇为流动相B；
[0017]洗脱程序：0min～18min，流动相A、流动相B的体积比为80：20～100：0；18min～20min，流动相A、流动相B的体积比匀速渐变至34：66～45：55；20min～30min，流动相A、流动相B的体积比为34：66～45：55；30min～31min，流动相A、流动相B的体积比匀速渐变至初始0min时流动相A、流动相B的体积比；
[0018]流速：0.8mL/min～1.2mL/min；
[0019]柱温：25℃～35℃；
[0020]检测波长：250nm～258nm；
[0021]进样量：10μL～50μL。
[0022]优选地，所述步骤S1中有机溶剂的加入量为每克油溶性软膏中加5mL～20mL有机溶剂；所述步骤S3中有机溶剂的加入量为所述有机相的1～1.5倍。
[0023]优选地，所述第一稀释剂为铁盐、铜盐中的一种或两种的水溶液，所述第一稀释剂的浓度为0.1mg/mL～1.0mg/mL，所述步骤S2中第一稀释剂的加入量为最后一次提纯后的水相体积的1/5～1/3，所述步骤S4中第一稀释剂的加入量为将所有提纯后的水相合并后的体积的1/5～1/3；
[0024]和/或，所述第二稀释剂为硫酸钠、氯化钠、硫酸钾或氯化钾中的一种或几种的水溶液；所述第二稀释剂的浓度为5mg/mL～80mg/mL，所述步骤S1、S3中第二稀释剂的加入量分别为所述步骤S1、S3中有机溶剂加入量的1～1.5倍。
[0025]优选地，采用液相色谱法检测最后一次提纯后的水相中依地酸盐是否低于限值，包括：
[0026]采用液相色谱法检测最后一次提纯后的水相中依地酸盐是否低于0.02μg/mL。
[0027]优选地，所述水浴加热的温度均为53℃～72℃，水浴加热时间均为3min～8min；和/或，所述涡旋混合均为水浴加热取出后立即涡旋混合。
[0028]优选地，所述步骤S2中的定容为依据最后一次提纯后的水相的体积选择合适的定容量；所述步骤S4中的定容为依据合并后水相的体积选择合适的定容量。
[0029]优选地，所述离心的离心转速均为3000rpm～8000rpm，离心时间均为3min～5min。
[0030]优选地，所述过滤为用0.22μm～0.45μm的水系膜过滤。
[0031]优选地，流动相A中，所述的四丁基氢氧化铵水溶液的摩尔浓度为2mmol/L～8mmol/L、pH值为2.0～5.0，所述四丁基氢氧化铵水溶液与所述乙腈的比例为(70～90)：(30～10)。
[0032]有益技术效果：(1)本专利技术提供的油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，通过选择合适的有机溶剂及第二稀释剂，可以将油溶性软膏中的依地酸盐，例如依地酸钙钠或依地酸二钠，与油脂性基质及其它辅料有效分离。尤其是，通过对每一次提纯后的水相中的依地酸盐进行检测，如果水相中的依地酸盐高于本专利技术液相色谱的检测限值，再次采用有机溶剂和第二稀释剂对有机相进行溶解和离心分离，直至将油溶性软膏中的依地酸盐完全分
离到水相中，保证了依地酸盐检测的准确度。待水相中存在的依地酸盐低于本专利技术液相色谱的检测限值后，确定提纯次数，重新取油溶性软膏，按照确认的提纯次数进行提纯，并将分离后的水相混合，加入含衍生试剂的第一稀释剂，定容过滤后可直接进样，进行液相色谱检测，能够简单、准确地检测油溶性软膏中依地酸盐的含量，具有准确度高、重复性好的特点。
[0033](2)本专利技术提供的油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，进一步地，通过设置梯度洗脱的洗脱程序，在不同的时间段内，选择不同的流动相A和流动相B的体积比进行高效液相色谱检测，得到的色谱峰峰形好、无拖尾，能够简单、准确地检测油溶性软膏中依地酸盐的含量，具有准确度高、重复性好的特点。
[0034](3)本专利技术选用正庚烷、正己烷为有机溶剂，不仅可将油溶性软膏中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，其特征在于，采用高效液相色谱法检测，包括：供试品溶液的制备：S1、提纯：取一定量的油溶性软膏；加入有机溶剂、第二稀释剂，水浴加热一段时间后取出，涡旋混合、离心，离心后的溶液静置分层，得到提纯后的水相和有机相；S2、取最后一次提纯后的水相，加入第一稀释剂，并用第二稀释剂定容，定容后的溶液静置衍生，过滤，采用液相色谱法检测水相中依地酸盐是否低于限值，如果是，确认提纯次数N，并转步骤S4，否则转步骤S3；S3、对所述有机相进行提纯，包括：取所述有机相，向其中加入有机溶剂、第二稀释剂后，再次水浴加热、涡旋混合、离心、静置分层，得再次提纯后的水相和有机相，重复步骤S2；S4、重新取步骤S1中一定量的油溶性软膏，按照确认的提纯次数N，重复步骤S1对油溶性软膏进行第一次提纯，得到第一次提纯后的水相和有机相，再重复N
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1(N≥2)次步骤S3，对每次提纯后的有机相进行再次提纯，得到N
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1(N≥2)次提纯后的水相，将所有N次提纯后的水相合并，加入第一稀释剂，并用第二稀释剂定容；定容后的溶液静置衍生，过滤，即得供试品溶液；对所述供试品溶液进行液相色谱法检测，获得供试品溶液中依地酸盐的含量；其中，所述有机溶剂为正庚烷、正己烷中的一种或两种。2.根据权利要求1所述的油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，其特征在于，所述液相色谱法的检测条件如下：色谱柱：以C18、C8烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填充剂；流动相：以乙腈
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四丁基氢氧化铵水溶液为流动相A，以乙腈或甲醇为流动相B；洗脱程序：0min～18min，流动相A、流动相B的体积比为80：20～100：0；18min～20min，流动相A、流动相B的体积比匀速渐变至34：66～45：55；20min～30min，流动相A、流动相B的体积比为34：66～45：55；30min～31min，流动相A、流动相B的体积比匀速渐变至初始0min时流动相A、流动相B的体积比；流速：0.8mL/min～1.2mL/min；柱温：25℃～35℃；检测波长：250nm～258nm；进样量：10μL～50μL。3.根据权利要求1所述的油溶性软膏中依地酸盐的含量测定方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张慧英，
申请(专利权)人：郑州深蓝海生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：