结合CD40的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了特异性结合人CD40的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分。本发明专利技术还提供了编码所述抗体或其抗原结合部分的核酸分子、用于表达所述抗体或其抗原结合部分的表达载体、宿主细胞和方法。本发明专利技术进一步提供了包含所述抗体或其抗原结合部分的免疫缀合物、双特异性分子、嵌合抗原受体、溶瘤病毒和药物组合物，以及使用它们进行治疗的方法。及使用它们进行治疗的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】Sci USA 96:9136
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9141；Stamenkovic et al.,(1989)EMBO J.8:1403
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1410)。一方面，在一些B细胞来源的肿瘤细胞系中，CD40介导的信号转导引起肿瘤细胞生长抑制和死亡(Grafton et al.,(1997)Cell.Immunol.182:45
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56)，而另一方面，在某些其他B细胞恶性肿瘤中，CD40介导的信号转导诱导多种使肿瘤细胞免于凋亡的因子表达增加(Lee et al.,(1999)Proc Natl Acad Sci USA 96:9136
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9141)。
[0007]在结合CD40后激活或诱导CD40信号转导的激动型抗CD40抗体，以及阻断或抑制可能由CD40L参与诱导的CD40信号转导的拮抗型抗CD40抗体，已被开发用于疾病治疗。Selicrelumab(Pfizer和VLST)是一种激动型抗CD40抗体，已在许多患有晚期癌症的患者中显示出临床疗效(Vonderheide et al.,(2013)Clin Cancer Res.19(5):1035
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1043)。Dacetuzumab(Settte Geneticscs)是一种弱于Selicrelumab的CD40激动剂，在弥漫性大B细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤和CLL中显示出抗肿瘤活性，并已进行了与利妥昔单抗和吉西他滨联合治疗复发或难治性DLBCL的试验(Advani R et al.,(2009)J Clin Oncol.27:4371
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4377；Furman RR et al.,(2010)Leuk Lymphoma.51:228
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235；Forero
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Torres A et al.,(2012)Leuk Lymphoma 54(2):277
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283)。拮抗型抗CD40抗体Lucatumumab(Novartis)已进行了治疗多发性骨髓瘤和慢性淋巴细胞白血病的临床试验(Hassan SB et al.,(2014)Immunopharmacol immunotoxicol 36(2):96
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104)。激活CD40信号转导的生物制剂也显示出治疗传染病和自身免疫性疾病的功效，包括HIV
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1/AIDS、结核病和疟疾(Elizabeth A Thompson,et al.,(2015)J Immunol.195(3):1015
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1024)。
[0008]但仍然需要更多具有更好药物特性的抗CD40抗体。
[0009]在本申请中对任何文献的引用或标识，并非承认这样的文献可用作本专利技术的现有技术。
[0010]专利技术概述
[0011]本专利技术提供了一种分离的单克隆抗体，例如小鼠、人、嵌合或人源化单克隆抗体或其抗原结合部分，其与CD40(例如，人CD40和猴CD40)结合，并且与现有技术中的抗CD40抗体例如Dacetuzumab和Selicrelumab相比，具有相当的(如果不是更高的话)CD40结合亲和力，以及相当的(如果不是更高的话)激活CD40信号转导的活性。
[0012]本专利技术的抗体或其抗原结合部分具有多种用途，包括检测CD40蛋白，以及治疗和预防CD40相关疾病，例如癌症、传染病和自身免疫性疾病。
[0013]因此，在一方面，本专利技术提供了一种分离的单克隆抗体(例如，小鼠、嵌合或人源化抗体)或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分结合CD40，其包含：i)重链可变区，所述重链可变区可包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，其中，(1)VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:1、4和7所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(2)VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:2、5和8所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；或(3)VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:3、6和9所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；和/或ii)轻链可变区，所述轻链可变区可包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3
区，其中，(1)VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:10、13和16所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(2)VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:11、14和17所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；或(3)VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:12、15和18所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。
[0014]本专利技术的抗体或其抗原结合部分可包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区可包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，所述轻链可变区可包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区，其中，(1)VH CDR1区、VH CDR2区、VH CDR3区、VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:1、4、7、10、13和16所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(2)VH CDR1区、VH CDR2区、VH CDR3区、VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:2、5、8、11、14和17所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；或(3)VH CDR1区、VH CDR2区、VH CDR3区、VL CDR1区、VL CDR2区和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分结合CD40，其包含：(i)重链可变区，所述重链可变区包含VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区，其中，(1)VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:1、4和7所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(2)VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:2、5和8所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；或(3)VH CDR1区、VH CDR2区和VH CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:3、6和9所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；和/或(ii)轻链可变区，所述轻链可变区包含VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区，其中，(1)VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:10、13和16所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(2)VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:11、14和17所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；或(3)VL CDR1区、VL CDR2区和VL CDR3区分别包含与SEQ ID NOs:12、15和18所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变区包含与SEQ ID NOs:19、20(X1＝A或S)、21或22所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述轻链可变区包含与SEQ ID NOs:23、24(X1＝K、X2＝F；或X1＝Y、X2＝Y)、25或26所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。4.根据权利要求1所述的分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中重链可变区和轻链可变区包含：(1)分别与SEQ ID NOs:19和23所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列；(2)分别与SEQ ID NOs:20(X1＝A)和24(X1＝K、X2＝F)所示的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96...

【专利技术属性】
技术研发人员：马志清，刘劲禹，张正平，徐宏江，
申请(专利权)人：正大天晴药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：