用于质谱检测的样本前处理组合物及应用、前处理方法技术

本发明专利技术涉及种用于质谱检测的样本前处理组合物，组合物包括：内标工作液、硫酸锌溶液、乙腈或甲醇；其中，硫酸锌溶液与所述乙腈或甲醇的体积比为1:3

【技术实现步骤摘要】
用于质谱检测的样本前处理组合物及应用、前处理方法


[0001]本专利技术涉及检测
，尤其涉及用于质谱检测的样本前处理组合物 及应用、前处理方法。

技术介绍

[0002]他克莫司是一种免疫抑制剂，是器官移植，特别是肾脏移植患者的常用 药物，移植后合理服用他克莫司可使器官免遭排斥。剂量不足会导致机体对 移植器官产生排斥反应；而剂量过高又会引起严重的副反应，包括肾脏毒性， 肝脏毒性和其他一系列的并发症。通过检测病人全血中的他克莫司的浓度， 结合其它临床指征来合理用药，是确保器官移植接受者获得免疫抑制的最有 效方法。
[0003]西罗莫司是一种新型大环内酯类免疫抑制剂，早在20世纪70年代就被 研发出来，起初被作为低毒性的抗真菌药物，1977年发现具有免疫抑制作用， 现在经常作为维持移植器官免疫能力的药物(特别是肾移植)，以减缓器官 移植手术后的免疫排斥反应。西罗莫司的个体差异大，血药浓度与免疫抑制 强度及肝肾的毒性反应密切相关，中毒浓度与有效浓度很接近，治疗过程中 应进行血药浓度监测。
[0004]他克莫司和西罗莫司常用的样品前处理方法有蛋白沉淀法(PPT)、液液 萃取法(LLE)和固相萃取法(SPE)，但是这些方法往往需要多步操作，复杂 的操作步骤会增加测量结果误差。对于一些细胞毒性药物的监测，复杂的操 作步骤增加分析工作者与临床样本的接触机会，存在一定的安全隐患。因此， 简化样品前处理的操作步骤，对于减少样品暴露机会,提高分析结果的准确性 具有重要的意义。
[0005]现有检测他克莫司、西罗莫司的方法主要是免疫分析法、荧光偏振法、 液相色谱串联质谱联用法。免疫分析法专属性差，存在交叉免疫反应,干扰 检测的准确性。而荧光偏振法的试剂主要依赖进口，费用极其昂贵。LC
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MS/ M S法操作简单、快速,测试时间较短,所需样品量少,灵敏度高,专属性 强,选用内标法定量可以尽量减少人为或仪器因素带来的检测误差。
[0006]本申请旨在建立一种用于质谱检测的样本前处理组合物以解决上述问题。

技术实现思路

[0007]为了实现根据本专利技术的上述目的和其他优点，本专利技术的第一个目的是提 供一种用于质谱检测的样本前处理组合物，所述组合物包括：内标工作液、 硫酸锌溶液、乙腈或甲醇；其中，所述硫酸锌溶液与所述乙腈或甲醇的体积 比为1:3
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1:1。
[0008]优选地，所述硫酸锌溶液与所述乙腈或甲醇的体积比为2:3。
[0009]优选地，所述硫酸锌溶液浓度为0.002mol/L
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0.2mol/L之间。
[0010]优选地，所述硫酸锌溶液浓度为0.005mol/L。
[0011]本专利技术的第二个目的是提供一种用于质谱检测的样本前处理方法，包括 以下步骤：
[0012]使用如上所述的样本前处理组合物处理待测血清样本；
[0013]取处理后的待测血清样本上清液作为测试样本；
[0014]采用液相色谱
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质谱对所述测试样本进行检测。
[0015]优选地，所述液相色谱中的流动相A为含有5mM乙酸铵和0.1％甲酸的水 溶液；流动相B为含有5mM乙酸铵和0.1％甲酸的甲醇溶液。
[0016]优选地，液相色谱中洗针液为体积分数50％甲醇水溶液。
[0017]优选地，所述流动相的流速为0.6mL/min。
[0018]优选地，所述质谱的离子源为ESI源，所述质谱采用正离子、多反应监 测模式。
[0019]本专利技术的第三个目的是提供一种根据上述的用于质谱检测的样本前处理 组合物的应用。
[0020]相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：
[0021]本专利技术提供了种用于质谱检测的样本前处理组合物，组合物包括：内标 工作液、硫酸锌溶液、乙腈或甲醇；其中，硫酸锌溶液与所述乙腈或甲醇的体 积比为1:3
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1:1。本专利技术还涉及用于质谱检测的样本前处理方法、应用。通过 使用本专利技术的样本前处理组合物，可简化样本前处理的步骤，节约时间。
[0022]上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技 术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例并配 合附图详细说明如后。本专利技术的具体实施方式由以下实施例及其附图详细给 出。
附图说明
[0023]此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本申请的一部 分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的 不当限定。在附图中：
[0024]图1为本专利技术在步骤1.1中的SIR线性图；
[0025]图2为本专利技术在步骤1.1中的TAC线性图；
[0026]图3为本专利技术在步骤1.2中的SIR线性图；
[0027]图4为本专利技术在步骤1.2中的TAC线性图；
[0028]图5为本专利技术在步骤1.3中的SIR线性图；
[0029]图6为本专利技术在步骤1.3中的TAC线性图；
[0030]图7为本专利技术在步骤1.4中的SIR线性图；
[0031]图8为本专利技术在步骤1.4中的TAC线性图；
[0032]图9为本专利技术在步骤1.5中的SIR线性图；
[0033]图10为本专利技术在步骤1.5中的TAC线性图；
[0034]图11为本专利技术在步骤1.6中的SIR线性图；
[0035]图12为本专利技术在步骤1.6中的TAC线性图。
具体实施方式
[0036]下面，结合附图以及具体实施方式，对本专利技术做进一步描述，需要说明 的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可 以任意组合形成新的实施例。
[0037]下述实施例中，所采用的试剂如下：
[0038]1.准备仪器与试剂
[0039]1.1试剂：
[0040]表1试剂明细表
[0041][0042][0043]1.2仪器/耗材
[0044]表2仪器明细表
[0045][0046]一种用于质谱检测的样本前处理组合物，该组合物包括：内标工作液、 硫酸锌溶液、乙腈或甲醇；其中，硫酸锌溶液与乙腈或甲醇的体积比为1:3
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1:1；利用本专利技术的样本前处理组合物，可简化样本前处理的步骤，节约时间。
[0047]在一些实施例中，内标工作液ISW包括如表3所示的组成以及浓度。
[0048]表3内标工作液组分表
[0049]内标工作液浓度ISW SIR
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d31600ng/mLISW TAC
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d4400ng/mL
[0050]在一些实施例中，硫酸锌溶液与乙腈或甲醇的体积比为2:3；用该比例的 溶液可提升检测时的精密度。
[0051]在一些实施例中，硫酸锌溶液浓度为0.002mol/L
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0.2mol/L之间。优选 地，硫酸锌溶液浓度为0.005mol/L，以缓本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于质谱检测的样本前处理组合物，其特征在于，所述组合物包括：内标工作液、硫酸锌溶液、乙腈或甲醇；其中，所述硫酸锌溶液与所述乙腈或甲醇的体积比为1:3
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1:1。2.如权利要求1所述的用于质谱检测的样本前处理组合物，其特征在于，所述硫酸锌溶液与所述乙腈或甲醇的体积比为2:3。3.如权利要求1所述的用于质谱检测的样本前处理组合物，其特征在于，所述硫酸锌溶液浓度为0.002mol/L
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0.2mol/L之间。4.如权利要求3所述的用于质谱检测的样本前处理组合物，其特征在于，所述硫酸锌溶液浓度为0.005mol/L。5.一种用于质谱检测的样本前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：使用如权利要求1所述的样本前处理组合物处理待测血清样本；取处理后...

【专利技术属性】
技术研发人员：张怡铭，楚士颖，周玉松，李艳，周传贵，李艳杰，覃素姿，王天一，胡玮，程文播，
申请(专利权)人：苏州国科医工科技发展集团有限公司，
类型：发明
国别省市：