一种石胆酸的用途制造技术

本发明专利技术公开一种已知化合物石胆酸的用途，即石胆酸在制备抑制缓症链球菌药物中的应用。本发明专利技术实验表明，石胆酸对缓症链球菌有良好的抗菌活性，是一种潜在的可代替现有抗生素抑制缓症链球菌的药物。缓症链球菌的药物。

【技术实现步骤摘要】
一种石胆酸的用途


[0001]本专利技术涉及一种已知化合物―石胆酸的用途。

技术介绍

[0002]石胆酸是肠道中最重要的次级胆汁酸之一，石胆酸分子式：C24H40O3，结构：
[0003][0004]胆汁酸是胆汁里的一个有效成分，是参与胆汁消化功能的重要成分之一，其含量变化在肝脏病诊断中具有重要的参考价值。此外有文献披露，石胆酸还具有抑制肿瘤的效果。
[0005]中国专利技术专利申请202111019726.6公开了石胆酸类化合物具有抗金葡菌生物被膜生长作用，对金葡菌MRSA和MSSA具有抑菌活性。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供一种石胆酸的用途，即石胆酸在制备抑制缓症链球菌药物中的应用。
[0007]缓症链球菌属于α
‑
溶血性链球菌(亦称甲型溶血性链球菌)，通常是人体口腔、消化道、生殖道等部位的正常菌群之一，该菌是一种条件致病菌，可致中毒性休克综合征，亚急性心内膜炎，前列腺炎等，此外，还可致肺炎、心包炎、腹膜炎、唾腺炎、口面部感染、牙源性感染、中耳炎、鼻窦炎等。据报道在发病猪体内可分离到此病原菌，并且导致仔猪发病和死亡严重，说明缓症链球菌对猪也是有致病性。在儿科常用抗生素中，缓症链球菌对氨曲南、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸钾均有不同程度耐药，耐药率达到42.3％
‑
48.1％。这些抗生素目前仍然是儿童肺炎的常用药物。细菌耐药是全球问题，但相应的抗生素的开发则进展缓慢，形式非常严峻，因此迫切需要一种新的抗菌药物或抗菌产品来抑制细菌。
[0008]本专利技术实验表明，石胆酸对缓症链球菌有良好的抗菌活性，是一种潜在的可代替现有抗生素抑制缓症链球菌的药物。
附图说明
[0009]图1：石胆酸浓度与缓症链球菌生长抑制率关系图。
[0010]图2：氯霉素浓度与缓症链球菌生长抑制率关系图.
具体实施方式
[0011]以下结合本专利技术的相关实验进行解说。下述本专利技术实验中采用微量肉汤二倍稀释
法对石胆酸进行了体外抗菌活性测试，考察其对缓症链球菌的抗菌活性，并与阳性对照氯霉素进行比较。
[0012]1.供试品及对照
[0013]1.1供试品
[0014]名称：石胆酸，采用市售产品
[0015]供试品临用前用乙醇配制成最大浓度20mg/mL，依次对倍稀释。
[0016]1.2对照品
[0017]名称：氯霉素，市售品。
[0018]2.测试菌株及其培养方法
[0019]2.1菌株：缓症链球菌ATCC49456
[0020]2.2菌种来源：购于北京百欧博伟生物技术有限公司。
[0021]2.3培养条件：Todd
‑
Hewitt Broth，37℃孵育24h
‑
48h。
[0022]2.4菌种开启接种并培养
[0023]用75％酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖。缓慢开启胶塞，用75％酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入0.5ml液体培养基复溶冻干粉末，将悬液接种在培养基上，37℃培养24小时后，挑取单个菌落于液体培养基中在相同的培养条件下培养增菌。
[0024]2.5菌液工作液的准备
[0025]当OD600值达到0.5左右(约108CFU/ml)，经THB肉汤梯度稀释(0、10、100、1000、10000、100000、10000倍)后，取100μL菌悬液接种于固体培养基上，培养24h后计数活菌数，计算菌悬液浓度，再将此混悬菌液进行稀释，使菌悬液最终浓度约为2
×
106CFU/ml。菌种操作均在无菌条件下进行，实验完毕，所有耗材经灭菌再做丢弃处理。
[0026]3.最低抑菌浓度的测定
[0027]3.1测试方法：采取微量肉汤稀释法，进行最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)的测定。
[0028]实验分为阳性对照组(即不含药物的菌悬液)、阴性对照组(含溶媒乙醇的培养基)和实验组(含不同浓度的石胆酸菌悬液)。以上各组均设置3个平行组。将浓度为100μg/ml的石胆酸实验液按对倍稀释溶于液体培养基中，使其终浓度为100μg/ml、50μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml、6.25μg/ml、3.125μg/ml、0μg/ml。浓度为2
×
106CFU
·
mL
‑1菌悬液与各组药液按比例1∶1各100μL，分别接种于无菌96孔板中，使菌悬液的终浓度为1
×
106CFU/ml，置于适当的培养条件下培养20h。同时设置对照品氯霉素，使其终浓度分别为32μg/ml、16μg/ml、8μg/ml、4μg/ml、2μg/ml、1μg/ml、0μg/ml。培养结束后，在黑色背景下进行肉眼观察，平皿内未见细菌生长的最低药物浓度即为石胆酸的最低抑菌浓度(MIC)。所有菌种的MIC测定实验重复3次。悬浮菌体测OD600值，不同浓度的供试品及对照抑菌率的计算方法：抑菌率(％)＝1
‑
(供试品OD值—阴性对照OD值)/(阳性对照OD值—阴性对照OD值)
×
100％。通过曲线拟合得函数计算而得MIC50，MIC50指能抑制50％受试菌所需最低抑菌浓度(MIC)。
[0029]3.2结果判断
[0030]本次试验结果见表1，抑制率图见图1。当阳性对照孔(即不含药物)内细菌明显生长，试验才有意义。结果显示，阳性对照孔(即不含药物)内细菌正常生长，溶媒对照培养基
孔无菌生长。对照品氯霉素对缓症链球菌的MIC值为4μg/ml，参见表2和图2，符合美国临床实验室标准化委员会(National committee for clinical library standardization,NCCLS)2001年的《抗微生物药物敏感试验的执行标准：第十一版信息增刊》M100
‑
S11中氯霉素对缓症链球菌≤4μg/ml的标准，说明本实验方法是可靠的。
[0031]统计结果表明：石胆酸对受试的缓症链球菌的MIC50为11.06μg/ml。综上所述，石胆酸有良好的抑制缓症链球菌活性。
[0032]表1:不同浓度石胆酸对缓症链球菌生长影响的吸光值测定
[0033][0034]表2：不同浓度氯霉素对缓症链球菌生长影响的吸光值测定
[0035]
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.石胆酸在制备抑制缓症链球...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭爱疆，王帅，王玉桂，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：