本发明专利技术公开的属于生物学检测技术领域，具体为一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，包括包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液、吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂、TK1校准品和TK1质控品，所述包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液是由试剂组份和去离子水及包被有TK1抗体的磁微粒制备而成，所述吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂为吖啶酯标记的抗TK1抗体，所述的吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂保存与发光物稀释液中，本发明专利技术具有信噪比高和性价比高的优势，同时方法的特异性和灵敏度亦有了很大的提升，为临床诊断快速检测提供了很好的支持。支持。支持。
【技术实现步骤摘要】
一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂
[0001]本专利技术涉及生物学检测
，具体为一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂。
技术介绍
[0002]胸苷激酶1是细胞增殖周期中嘧啶补救合成途径的关键酶之一，是一种新的细胞增殖特异性的标志物，可用于评估细胞分裂增殖周期，在肿瘤的早期筛查、肿瘤分期评估、治疗效果监测和预后评价中的作用日益受到关注，通常正常人的TK1水平平均值在1pM左右，具体值取决于个体差异，但是总的来说处于0
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2pM之间，对于异常增殖类病变，由于病变细胞缺失了凋亡调控，DNA合成剧增会导致TK1水平的异常升高，即存在恶性增殖病变患者血清内TK1酶含量会比正常人有2
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200倍的升高，因此TK1目前也被作为一种非特异性肿瘤标志物，应用于体检及临床中的恶性增殖病变筛查和治疗后的跟踪监测，TK1水平检测在监测乳腺癌、肺癌、胃癌等恶性实体瘤的监控方面应用价值较高，作为一种优选评估肿瘤细胞增殖速率的标志物，TK1在健康人血清含量极微或检测不到，但其在恶性肿瘤患者体内随着肿瘤细胞的急剧增殖而升高，因此，建立一种高效灵敏、简便快捷的TK1检测技术具有很重要的现实意义。
[0003]目前，常用测定样本中TK1含量的方法还是以酶联免疫法为主，该法仍以手工操作或半自动操作为主，比较费时费力，且对结果影响较大，同时其检测的灵敏度和线性范围也较低，仍是用于实验室分析为主，在临床的检测应用上具有较大局限性，效率低，仍无法满足临床日益增长的需求，而化学发光免疫分析是将化学发光技术与免疫分析方法相结合的一种新型分析方法，其具有高灵敏度、强特异性、操作简便快捷等优点，在多个检测领域得到了广泛应用，目前，TK1磁微粒化学发光检测方法的报道仍不多，本专利技术使用TK1抗体
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磁微粒偶联物结合并分离TK1蛋白，TK1配对抗体
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吖啶酯发光剂发光，建立了一种TK1磁微粒化学发光检测方法，为TK1的高灵敏、强特异性、准确检测提供新的一种新的技术全自动手段。
[0004]为此，我们提出一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂。
技术实现思路
[0005]鉴于上述和/或现有一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂中存在的问题，提出了本专利技术。
[0006]因此，本专利技术的目的是提供一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，通过化学发光法，免疫夹心原理，标本、标准品与吖啶酯标记的鼠单克隆抗体、包被另一株鼠单克隆抗体的磁性微球混合，形成另一株单克隆抗体的免疫复合物，能够解决上述提出现有的问题。
[0007]为解决上述技术问题，根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了如下技术方案：
[0008]一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，其包括：包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液、吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂、TK1校准品和TK1质控品；
[0009]所述包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液是由试剂组份和去离子水及包被有TK1抗体的磁微粒制备而成；
[0010]所述吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂为吖啶酯标记的抗TK1抗体，所述的吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂保存与发光物稀释液中。
[0011]作为本专利技术所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂的一种优选方案，其中：所述包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液是由0.05
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0.15mol/L的Tris
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HCl缓冲液、0.5％
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1.5％氯化钠、0.025％
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10.075％表面活性剂、1.5％
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2.5％牛血清白蛋白、3％
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5％海藻糖和磁性微球标记的TK1抗体结合物配制而成。
[0012]作为本专利技术所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂的一种优选方案，其中：所述吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂是由0.01mol/L的磷酸盐缓冲液、0.25％
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0.75％酪蛋白、0.025％
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10.075％表面活性剂、3％
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5％海藻糖和吖啶酯标记的抗TK1检测抗体配制而成。
[0013]作为本专利技术所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂的一种优选方案，其中：所述发光物稀释液设置为去离子水：100mL、Na2HPO4：0.54g、NaH2PO4·
2H2O：0.967g、NaCl：0.90g、酪蛋白：0.25％
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0.75％、海藻糖：3％
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5％、Proclin 300：0.1％
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0.5％和Triton X
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100：0.025％
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0.075％。
[0014]作为本专利技术所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂的一种优选方案，其中：所述TK1校准品和TK1质控品均是由0.01mol/L的磷酸盐缓冲液、0.25％
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0.75％酪蛋白和重组人TK1蛋白质配制而成。
[0015]作为本专利技术所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂的一种优选方案，其中：所述校准品稀释液及样本稀释液配制成分为：KCl：0.30g、NaCl：12.00g、KH2PO4：0.30g、Na2HPO4：1.725g、PH：7.2
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7.6、酪蛋白：0.25％
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0.75％、去离子水：1500ml。
[0016]一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
[0017]步骤一：包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液的制备：
[0018]在去离子水中依次加入Tris
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HCl缓冲盐、氯化钠、表面活性剂、海藻糖、牛血清白蛋白、防腐剂，每次添加物料需要搅拌至完全溶解，调节pH值至6.0
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8.5，混合均匀后过0.22μm滤膜得到磁性微球稀释液，之后加入磁性微球标记的TK1抗体结合物即得到包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液；
[0019]步骤二：吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂的制备：
[0020]在去离子水中依次加入磷酸盐缓冲盐、表面活性剂、酪蛋白、海藻糖、防腐剂，每次添加物料需要搅拌至完全溶解，调节pH值至6.0
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8.5，混合均匀后过0.22μm滤膜得到发光物稀释液，之后加入吖啶酯标记的抗TK1检测抗体结合物得到吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂；
[0021]步骤三：TK1校准品和TK1质控品的制备
[0022]在去离子水中依次加入磷酸盐缓冲盐、酪蛋白、防腐剂，每次添加物料需要搅拌至完全溶解，调节pH值至6.0
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8.5，混合均匀后过0.22μm滤膜得到发光物稀释液，之后加入重组人TK1蛋白质得到对应的校准品系列和质控品系列；
[0023]步骤四：组装试剂盒：将上述制备的包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液和吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂按体积比R1本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，其特征在于：包括包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液、吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂、TK1校准品和TK1质控品；所述包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液是由试剂组份和去离子水及包被有TK1抗体的磁微粒制备而成；所述吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂为吖啶酯标记的抗TK1抗体，所述的吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂保存与发光物稀释液中。2.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，其特征在于，所述包被有抗TK1抗体的磁微粒悬液是由0.05
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0.15mol/L的Tris
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HCl缓冲液、0.5％
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1.5％氯化钠、0.025％
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10.075％表面活性剂、1.5％
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2.5％牛血清白蛋白、3％
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5％海藻糖和磁性微球标记的TK1抗体结合物配制而成。3.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，其特征在于，所述吖啶酯标记的抗TK1检测抗体的检测试剂是由0.01mol/L的磷酸盐缓冲液、0.25％
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0.75％酪蛋白、0.025％
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10.075％表面活性剂、3％
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5％海藻糖和吖啶酯标记的抗TK1检测抗体配制而成。4.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，其特征在于，所述发光物稀释液设置为去离子水：100mL、Na2HPO4：0.54g、NaH2PO4·
2H2O：0.967g、NaCl：0.90g、酪蛋白：0.25％
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0.75％、海藻糖：3％
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5％、Proclin 300：0.1％
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0.5％和Triton X
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100：0.025％
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0.075％。5.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光检测试剂，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱俊辉，刘凤林，韩东，张栋，
申请(专利权)人：山东加贝药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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