一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法，其提取方法，能够快速、准确地提取化妆品中人表皮生长因子。本发明专利技术方法采用高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法


[0001]本专利技术涉及化妆品检测分析
，尤其涉及一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法。

技术介绍

[0002]人表皮生长因子(EGF)，又名人寡肽
‑
1，是人体内的一种活性物质，由53个氨基酸组成的活性多肽；实验研究表明，人表皮生长因子(EGF)具有多种生物活性，能刺激表皮和上皮细胞，促进表皮增生和角质化，能强烈刺激细胞分裂，增强细胞活性，促进新陈代谢。人表皮生长因子(EGF)用于角膜损伤、烫伤和手术等创面的修复和愈合取得很好的疗效。
[0003]人表皮生长因子(EGF)曾经在化妆品行业被广泛应用，但因人表皮生长因子(EGF)是单项刺激细胞增生，一味不停地刺激细胞增生可能会导致皮肤细胞出现难以预测的问题，使用过量，或者使用频次过多使皮肤过度吸收后，会有皮肤增生的风险。滥用EGF会导致肌肤生长不可控，形成“肿瘤”样结节增生。人表皮生长因子(EGF)被滥用注射，导致肌肤组织过度生长的报道时常可见。
[0004]国家药品监督管理局明确表示：人表皮生长因子(EGF)不得作为化妆品原料使用。在配方中添加或者产品宣称含有人寡肽
‑
1或人表皮生长因子(EGF)的，均属于违法产品。另一方面有一些化妆品厂家为了追求经济利益，却违规在化妆品中添加在医学领域应用的人表皮生长因子(EGF)等人表皮生长因子代替化妆品中允许添加的寡肽
‑
1等生物活性肽，混肴视听，从而引发潜在的安全性问题，给消费者带来了潜在的伤害。《化妆品安全技术规范》(2015年版)无相应检测标准，存在技术空白。目前，文献中报道的关于化妆品中人表皮生长因子的检测方法较少。《中国药典》收载了人表皮生长因子外用溶液的测定方法，该方法为采用凝胶电泳法进行定性，高效液相色谱法的归一化法进行纯度测定。该方法只能对人表皮生长因子进行定性不能定量。且该方法灵敏度低，选择性差，不适用于复杂的化妆品基质。
[0005]因此，基于有效性和安全性考虑，建立化妆品中人表皮生长因子的检测方法研究，可为化妆品中非法添加物质的监管提供快速、准确的检测方法和技术支持。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是针对现有技术中存在的对人表皮生长因子只能定性不能定量检测的缺陷。提供一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：
[0008]提供一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法，包括如下步骤：
[0009]步骤一，样品处理
[0010]膏霜、乳液、水、凝胶、粉类基质样品：精密称取样品，加入牛血清白蛋白水溶液，旋涡分散均匀，超声提取，采用牛血清白蛋白水溶液定容后离心，得供试品溶液备用；
[0011]油基质样品：精密称取样品，加入二氯甲烷，涡旋，加入牛血清白蛋白水溶液，振摇
提取，静置分层，离心后取第一上层溶液；第一下层溶液加入牛血清白蛋白水溶液，振摇提取，静置分层，离心后取第二上层溶液与所述第一上层溶液混合，用牛血清白蛋白水溶液定容，得供试品溶液备用；
[0012]步骤二，配制基质标准系列溶液
[0013]精密称取人表皮生长因子标准品，用水溶解定容，得到标准储备溶液；
[0014]精密称取空白样品，采用与步骤一所述样品处理相同的方法，得到空白基质提取液；
[0015]准确量取所述标准储备溶液，用所述空白基质提取液稀释，得到基质标准中间溶液；
[0016]分别精密量取所述基质标准中间溶液适量，用所述空白基质提取液稀释，配制得到基质标准系列溶液；
[0017]步骤三，采用高效液相色谱
‑
三重四极杆质谱联用仪进样检测。
[0018]进一步地，所述牛血清白蛋白水溶液中牛血清白蛋白的含量为1w/v％，所述牛血清白蛋白水溶液中还含有0.5w/v％的氯化钠。
[0019]进一步地，所述超声提取的时间为20
‑
30min。
[0020]进一步地，每克所述油基质样品加入所述二氯甲烷的体积为10
‑
15mL。
[0021]进一步地，所述基质标准系列溶液的浓度为50、100、200、250、500、1000μg/L。
[0022]进一步地，色谱条件为：
[0023]色谱柱：C
18
柱，100mm
×
2.1mm，1.6μm，或等效色谱柱；
[0024]流动相：A为0.02v/v％甲酸，B为乙腈；梯度洗脱；
[0025]流速：0.3mL/min；
[0026]柱温：30℃；
[0027]进样量：10μL。
[0028]进一步地，所述梯度洗脱具体为：
[0029][0030]进一步地，质谱条件为：
[0031]离子源：电喷雾离子源；
[0032]监测模式：正离子多反应监测模式。
[0033]本专利技术采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
[0034]本专利技术化妆品中人表皮生长因子的检测方法，其提取方法，能够快速、准确地提取化妆品中人表皮生长因子。
[0035]本专利技术方法采用高效液相色谱
‑
质谱法测定化妆品中人表皮生长因子，不仅可以对化妆品中的人表皮生长因子进行定性测定，同时还可以进行定量分析，方法简便、易操作，通用性强，重现性好，更适合实验室之间的方法的普及和应用。
附图说明
[0036]图1为人表皮生长因子标准溶液高效液相色谱
‑
质谱提取离子图。
具体实施方式
[0037]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，但不作为本专利技术的限定。需要说明的是，在不冲突的情况下，本专利技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0038]本专利技术提供了一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法，具体如下：
[0039]1.试剂材料
[0040]除另有规定外，本方法中所用试剂均为分析纯及以上规格，水为符合GB/T6682规定的一级水。
[0041]1.1乙腈，色谱纯。
[0042]1.2甲酸，色谱纯。
[0043]1.3牛血清白蛋白，色谱纯。
[0044]1.4氯化钠，分析纯。
[0045]1.5二氯甲烷，分析纯。
[0046]1.6 0.1％牛血清白蛋白(含0.5％氯化钠)水溶液：称取0.1g牛血清白蛋白(1.3)和0.5g氯化钠(1.4)，用水溶解并稀释至100mL，混匀。
[0047]1.7 0.02％甲酸溶液：取甲酸(1.2)0.2mL，加水1000mL，混匀，即得。
[0048]1.8标准品：人表皮生长因子标准品，纯度均≥98％。标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式详见表A。
[0049]表A
[0050][0051]1.9标准储备溶液：称取人表皮生长因子标准品10mg(精本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种化妆品中人表皮生长因子的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，样品处理膏霜、乳液、水、凝胶、粉类基质样品：精密称取样品，加入牛血清白蛋白水溶液，旋涡分散均匀，超声提取，采用牛血清白蛋白水溶液定容后离心，得供试品溶液备用；油基质样品：精密称取样品，加入二氯甲烷，涡旋，加入牛血清白蛋白水溶液，振摇提取，静置分层，离心后取第一上层溶液；第一下层溶液加入牛血清白蛋白水溶液，振摇提取，静置分层，离心后取第二上层溶液与所述第一上层溶液混合，用牛血清白蛋白水溶液定容，得供试品溶液备用；步骤二，配制基质标准系列溶液精密称取人表皮生长因子标准品，用水溶解定容，得到标准储备溶液；精密称取空白样品，采用与步骤一所述样品处理相同的方法，得到空白基质提取液；准确量取所述标准储备溶液，用所述空白基质提取液稀释，得到基质标准中间溶液；分别精密量取所述基质标准中间溶液适量，用所述空白基质提取液稀释，配制得到基质标准系列溶液；步骤三，采用高效液相色谱
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三重四极杆质谱联用仪进样检测。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述牛血清白蛋白水...

【专利技术属性】
技术研发人员：许勇，韩晶，俞灵，郑荣，彭兴盛，
申请(专利权)人：上海市食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：