一种原位环境下噬菌体富集与分离培养装置制造方法及图纸

本发明专利技术属于微生物学领域，具体地说是一种原位环境下噬菌体富集与分离培养装置，包括上部的过滤模块和下部的噬菌体收集器；上部过滤模块主要是采用切向流过滤与垂直过滤相结合的原理，将细胞直径大于0.22微米的细菌、原生动物、微藻、浮游动物等排斥在外，从而特异性地收集噬菌体，其构造包含左右两组带孔夹板、上下两组带孔夹板以及中间的流通器，每组带孔夹板中间放置0.22微米孔径的滤膜(耗材)；下部的噬菌体收集器用于放置宿主菌平板或宿主菌培养液，进而富集并获得可特异性感染宿主菌的噬菌体。本发明专利技术装置结构简单，便于操作，可利用宿主菌在原位环境中进行其特异性噬菌体的靶向富集和分离培养，大大提高了噬菌体分离的成功率。率。率。

【技术实现步骤摘要】
一种原位环境下噬菌体富集与分离培养装置


[0001]本专利技术属于微生物学领域，具体地说是一种原位环境下噬菌体富集与分离培养装置。

技术介绍

[0002]噬菌体是生物圈中丰度最大、多样性最高的一种感染原核生物(包括细菌、古菌等)的生命有机体，其在海洋中的总数量约为10
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个，比细菌丰度高1～2个数量级。因噬菌体具有感染特异性高、繁殖能力强、副作用小等优点，在食品和饲料的病原菌清除以及养殖动物和人类细菌性疾病的预防与治疗等方面应用前景广阔。由于噬菌体对宿主菌的裂解具有较高的专一性，当前主要是依赖已经分离到的细菌作为宿主来进一步开展其噬菌体的分离。因为自然环境中约99％以上的细菌难以在实验室获得培养，而利用少量能在实验室培养的细菌作为宿主菌来进行其噬菌体的分离时，又仅有很少一部分细菌能够成功分离到其噬菌体；所以，目前人们成功获得的噬菌体相对于获得的细菌数量来说少之又少，数量十分有限，可能仅仅只占自然环境中噬菌体种类的千分之一甚至万分之一。随着人们对噬菌体应用价值的深入了解，目前针对病原菌的特异噬菌体的高效分离是限制其应用的一个关键技术瓶颈，亟待解决。
[0003]常规分离噬菌体的方法是从野外取水或组织样品，回到实验室内进行分离，成功分离获得噬菌体的概率极低。实际上，决定噬菌体能否被成功分离培养的关键因素不仅与其宿主菌的种属特征相关，也与宿主菌自身的生理代谢状态密切相关。实验室内培养的细菌与自然环境中的细菌在生理代谢状态上往往存在很大不同，而不同宿主菌生理代谢状态下噬菌体的感染能力往往存在较大差异；因此，即使自然环境下能够感染某一细菌的噬菌体也未必能在实验室条件下继续感染该菌。目前已知的纯培养的噬菌体主要是在实验室条件下利用宿主菌进行分离获得，且主要来自于水体样品；而对于沉积物中的噬菌体了解极其有限，急需填补这方面的空白。

技术实现思路

[0004]为了解决现有噬菌体分离方面存在的上述问题，弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种原位环境下噬菌体富集与分离培养装置。该装置能够在淡水、海洋以及沉积物等原位环境下富集并分离噬菌体，结构简单，操作方便，大大提高了利用特定宿主菌进行噬菌体分离的成功率。
[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：
[0006]本专利技术的噬菌体富集与分离培养装置置于原位环境中，包括相互连接的过滤模块及噬菌体收集器，所述过滤模块的中间为流通器，所述流通器上设有多个开孔，所述流通器内部设有与各个开孔均连通的通路；所述流通器上的每个开孔处均密封连接有带孔夹板组，每个所述带孔夹板组包括两个带孔夹板及放置在两个带孔夹板之间的滤膜，原位环境中的噬菌体可由所述滤膜通过，每个所述带孔夹板组均与流通器相连；所述噬菌体收集器
上开设有用于放入培养好的宿主菌平板或宿主菌液的空间，任意一组带孔夹板组中的一块带孔夹板与所对应的流通器上的开孔密封连接，同组中另一块带孔夹板密封连接于所述噬菌体收集器上开设的空间处，所述流通器中的噬菌体经过与噬菌体收集器密封连接的带孔夹板组的滤膜后收集并富集。
[0007]其中：所述噬菌体收集器上开设的空间为凹槽，即所述噬菌体收集器的外表面向内凹陷，进而形成所述凹槽。
[0008]所述噬菌体收集器为长方体或正方体，该长方体或正方体的上表面向内凹陷，进而形成所述凹槽，所述凹槽为圆柱形。
[0009]所述流通器为长方体或正方体，所述流通器内部的通路为“十”字形通路，即在长方体或正方体的所述流通器的上表面、下表面、左侧面、右侧面分别开设有所述开孔，各所述开孔通过所述“十”字形通路相连通。
[0010]所述带孔夹板组为四个，分别与长方体或正方体的所述流通器的上表面、下表面、左侧面、右侧面密封，并分别通过螺丝与所述流通器固定。
[0011]每个所述带孔夹板组中的带孔夹板形状、结构均相同，所述带孔夹板上开设有多个通孔，每组带孔夹板组中的滤膜与带孔夹板上开设的所述通孔相对应。
[0012]所述通孔开设在带孔夹板的中间位置，各所述带孔夹板组分别通过螺丝与被围在中间的所述流通器固定。
[0013]本专利技术的优点与积极效果为：
[0014]本专利技术能够在原位环境中利用宿主菌来靶向分离水体或者沉积物中的噬菌体，装置结构简单，便于操作，可在原位环境中进行噬菌体的快速富集分离，便于实验运用，大大提高了噬菌体分离的成功率，具有十分广阔的应用前景。
附图说明
[0015]图1为本专利技术的立体结构示意图；
[0016]图2为本专利技术的爆炸图；
[0017]图3为本专利技术噬菌体收集器的结构示意图；
[0018]图4为本专利技术带孔夹板的结构示意图；
[0019]图5为本专利技术流通器的结构示意图；
[0020]其中：1为噬菌体收集器，2为下方带孔夹板A，3为下方带孔夹板B，4为右侧带孔夹板A，5为右侧带孔夹板B，6为流通器，7为上方带孔夹板A，8为上方带孔夹板B，9为左侧带孔夹板A，10为左侧带孔夹板B，11为凹槽，12为通孔，13为开孔，14为通路，15为螺丝。
具体实施方式
[0021]下面结合附图对本专利技术作进一步详述。
[0022]如图1及图2所示，本专利技术的噬菌体富集与分离培养装置置于原位环境中，包括相互连接的过滤模块及噬菌体收集器1，过滤模块的中间为流通器6，流通器6上设有多个开孔13，流通器6内部设有与各个开孔13均连通的通路14；流通器6上的每个开孔13处均密封连接有带孔夹板组，每个带孔夹板组包括两个带孔夹板及放置在两个带孔夹板之间的滤膜，原位环境中的噬菌体可由滤膜通过，每个带孔夹板组均与流通器6相连；噬菌体收集器1上
开设有用于放入培养好的宿主菌平板或宿主菌液的空间，任意一组带孔夹板组中的一块带孔夹板与所对应的流通器6上的开孔13密封连接，同组中另一块带孔夹板密封连接于噬菌体收集器1上开设的空间处，流通器6中的噬菌体经过与噬菌体收集器1密封连接的带孔夹板组的滤膜后收集并富集。
[0023]如图1、图2、图4及图5所示，本实施例的流通器6为长方体或正方体，流通器6内部的通路14为“十”字形通路，即在长方体或正方体的流通器6的上表面、下表面、左侧面、右侧面分别开设有开孔13，各开孔13通过“十”字形通路相连通，使得不同方向流入的水样汇聚到一起，便于经过底部的带孔夹板组中0.22微米孔径的滤膜收集并富集噬菌体。相应地，本实施例的带孔夹板组为四个，分别与长方体或正方体的流通器6的上表面、下表面、左侧面、右侧面通过O型橡胶密封圈进行密封，并分别通过螺丝15与流通器6固定。具体为，流通器6的右侧面密封连接的带孔夹板组为在右侧带孔夹板A4和右侧带孔夹板B5中间放入1张0.22微米孔径的滤膜，流通器6左侧面密封连接的带孔夹板组为在左侧带孔夹板A9和左侧带孔夹板B10中间放入1张0.22微米孔径的滤膜，并将这两组带孔夹板与流通器6用螺丝15拧紧固定；同样的，流通器6的上表面密封连接的带孔夹板组为在上方带孔夹板A7和上方带孔夹板B8中间放入1张0.22微米本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种原位环境下噬菌体富集与分离培养装置，其特征在于：该噬菌体富集与分离培养装置置于原位环境中，包括相互连接的过滤模块及噬菌体收集器(1)，所述过滤模块的中间为流通器(6)，所述流通器(6)上设有多个开孔(13)，所述流通器(6)内部设有与各个开孔(13)均连通的通路(14)；所述流通器(6)上的每个开孔(13)处均密封连接有带孔夹板组，每个所述带孔夹板组包括两个带孔夹板及放置在两个带孔夹板之间的滤膜，原位环境中的噬菌体可由所述滤膜通过，每个所述带孔夹板组均与流通器(6)相连；所述噬菌体收集器(1)上开设有用于放入培养好的宿主菌平板或宿主菌液的空间，任意一组带孔夹板组中的一块带孔夹板与所对应的流通器(6)上的开孔(13)密封连接，同组中另一块带孔夹板密封连接于所述噬菌体收集器(1)上开设的空间处，所述流通器(6)中的噬菌体经过与噬菌体收集器(1)密封连接的带孔夹板组的滤膜后收集并富集。2.根据权利要求1所述的原位环境下噬菌体富集与分离培养装置，其特征在于：所述噬菌体收集器(1)上开设的空间为凹槽(11)，即所述噬菌体收集器(1)的外表面向内凹陷，进而形成所述凹槽(11)。3.根据权利要求2所述的原位环境下噬菌体富集与分离培养装置，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：张永雨，史桐妹，王增猛，赵久龙，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：