一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术公开了一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置，其包括空气压缩机、压力表和微生物采样器，所述空气压缩机的气体进口与所述微生物采样器的排气口通过管路连接，连接所述空气压缩机和所述微生物采样器的管路上设有所述压力表。本实用新型专利技术通过启动空气压缩机，用精细称量勺称量土样，并将称取的土样快速倒入微生物采样器顶端入口中，用手掌抵住装置入口，土样在微生物采样器中的空气抽离的作用下，会均匀平铺在培养皿中；然后经培养形成肉眼可见的菌落，对菌落进行计数并根据采样体积计算个体的浓度，可快速准确检测不同地块大丽轮枝菌微菌核的含量。测不同地块大丽轮枝菌微菌核的含量。测不同地块大丽轮枝菌微菌核的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置

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[0001]本技术涉及一种采样装置，特别是涉及一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置。

技术介绍
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[0002]向日葵黄萎病的病原菌是由大丽轮枝菌(Verticilliumdahliae)引起的，属于半知菌亚门真菌。大丽轮枝菌寄主范围广泛，可危害200多种植物，包括多种农作物、景观植物、果树和一年或多年生牧草，并且其寄主范围仍在扩大。该菌菌丝体呈明显轮枝状，有分隔，老熟时加粗变褐，后期产生黑色微菌核。微菌核是病原菌在土壤中主要的休眠结构，抵抗不良环境能力强，是土壤中病原菌长期存活及初侵染的主要形式。因为其为病害的初侵染源，微菌核的数量及存活状态决定着黄萎病的发生严重程度。
[0003]目前，土壤中黄萎病菌微菌核定量检测方法多而复杂，最为常规的检测方法为土壤稀释梯度分离法，该方法操作复杂、实验周期长并且易受主观判断影响。利用分子检测对精细度要求较高且代表性不强。用湿筛法和果胶盐选择性培养基可定量分析土壤中大丽轮枝菌的定殖情况，但对微菌核含量较少的土壤检测能力弱。而后大量研究人员通过选择用选择性培养基分离培养微菌核，但存在的弊端为培养基成分复杂且难以进行观察和统计。

技术实现思路
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[0004]本技术的目的在于提供一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置。
[0005]本技术的目的由如下技术方案实施：一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置，其包括空气压缩机、压力表和微生物采样器，所述空气压缩机的气体进口与所述微生物采样器的排气口通过管路连接，连接所述空气压缩机和所述微生物采样器的管路上设有所述压力表。
[0006]所述的一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置，还包括有采样器固定座，所述微生物采样器置于所述采样器固定座上方，所述微生物采样器的底部与所述采样器固定座的边缘之间设有至少两根弹性挂钩，所述弹性挂钩的一端固定在所述微生物采样器的底部，另一端拉紧钩挂在所述采样器固定座的边缘。
[0007]本技术的优点：本技术通过启动空气压缩机，用精细称量勺称量土样，并将称取的土样快速倒入微生物采样器顶端入口中，用手掌抵住装置入口，土样在微生物采样器中的空气抽离作用下，会均匀平铺在培养皿中；其是基于撞击法原理，按一定流量抽取空气，使气流中的土壤微生物粒子加速撞击到含营养选择性培养基的培养皿表面，然后经培养形成肉眼可见的菌落，对菌落进行计数并根据采样体积计算个体的浓度，可快速准确检测不同地块大丽轮枝菌微菌核的含量。
附图说明：
[0008]图1为一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置示意图；
[0009]图2为培养基改良前后微菌核分离结果比较图，图中，a：MESA培养基；b：MNP
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10培养基；c：本技术改良后培养基；
[0010]图3为土壤中微菌核的检测结果，图中a：培养12h；b：培养14d；c：微菌核菌落镜检图；
[0011]图4为不同地块土壤中微菌核数量比较箱线图；
[0012]图5为利用Q
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PCR技术检测土壤中大丽轮枝菌生物量柱状图。
[0013]图6为本技术装置进行检测的检测结果与Q
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PCR检测结果对比柱状图。
[0014]图7基于采样器
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干筛法与q
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PCR检测结果的相关性分析图。
[0015]空气压缩机1，压力表2，微生物采样器3，采样器固定座4，弹性挂钩5。
具体实施方式：
[0016]一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置，其包括空气压缩机1、压力表2和微生物采样器3，空气压缩机1的气体进口与微生物采样器3的排气口通过管路连接，连接空气压缩机1和微生物采样器3的管路上设有压力表2。
[0017]在一具体实施方式中，其还包括有采样器固定座4，微生物采样器3置于采样器固定座4上方，微生物采样器3的底部与采样器固定座4的边缘之间设有三根弹性挂钩5，弹性挂钩5的一端固定在微生物采样器3的底部，另一端拉紧钩挂在采样器固定座4的边缘，将微生物采样器3通过弹性挂钩5固定在采样器固定座4上，避免微生物采样器3在采样过程中受气流冲击导致移位，影响检测结果。
[0018]使用方法：
[0019]将微生物采样器3与空气压缩机1用气管相连接，连接好后将压强稳定至
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0.06MPa。上述培养皿放入微生物采样器3中，微生物采样器3中放置两层培养皿，下层培养皿用于接住上层培养皿取样过程中漏下的菌，保证检测结果的准确性。
[0020]启动空气压缩机1，用精细称量勺称量0.1克土样，快速倒入微生物采样器3顶端入口中，用手掌抵住装置入口5
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10s，土样在微生物采样器3中的空气抽离作用下，会均匀平铺在培养皿中。
[0021]取出培养皿，将培养皿放置在霉菌培养箱中黑暗培养14天。培养后用自来水轻轻冲洗培养基表面，以去除土壤颗粒。洗过的培养皿镜检，显微镜下观察大丽轮枝菌微菌核。最后子样本单元计数，并换算每克土中所含微菌核的多少。
[0022]检测效果实验：
[0023]1材料与方法
[0024]1.1实验材料
[0025]1.1.1土样的采集
[0026]用于检测向日葵黄萎病菌微菌核的土壤采集自内蒙古巴彦淖尔市乌拉特前旗西小召镇贾头圪旦村不同农作田。
[0027]1.1.2实验设备和培养基
[0028]微生物采样器3采用微生物ANDESON采样器(LD
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FC01,山东莱恩德智能科技有限公
司)；空气压缩机1采用无油静音空气压缩机(OL550A，网购)；
[0029]90mm一次性培养皿；50mL无菌离心管。
[0030]参照MSEA培养基即2g NaNO3、1g KH2PO4、0.5g MgSO4·
7H2O、0.5g KCl、0.01g FeSO4·
7H2O、2g多聚半乳糖醛酸、1mL tergitol NP10(Sigma，UK)和15g琼脂(Fluka，UK)用蒸馏水定容至1L，添加琼脂前用1mol/L KOH调pH值至6.4和MNP
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10
[19]培养基即5g PGA、1.2gNaOH、1g KNO3、1g KH2PO4、0.5g KCl、0.5MgSo4、15g Agar、0.5mL Tergitol、Chloramphenicol 50mg/L、Streptomycin 50mg/L、Chorletracycline 50mg/L，将二者结合后优化得到新的改良培养基NP
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10培养基：
[0031]PartⅠ：5g Polygalacturonic Acid(P
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3889，SIGMA)、1.4g NaOH，500mL蒸馏水；
[0032本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于快速检测土壤中大丽轮枝菌微菌核的采样装置，其特征在于，其包括空气压缩机、压力表和微生物采样器，所述空气压缩机的气体进口与所述微生物采样器的排气口通过管路连接，连接所述空气压缩机和所述微生物采样器的管路上设有所述压力表。2.根据权利要求1所述的一种用于快速检测土壤中大...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨剑锋，张键，赵君，贾硕，张文兵，冯伊彤，贾瑞芳，曼德拉，张之为，郑国华，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：新型
国别省市：