马齿苋活性提取物、马齿苋活性多酚的制备及应用制造技术

本发明专利技术公开了根据活性追踪法分离、富集并最终确定其结构的马齿苋活性多酚的制备方法；本发明专利技术还公开了含此类马齿苋活性多酚的组合物及其在舒缓、抗炎、止痒类化妆品和/或药品上的应用，这种应用是通过提高NHDF细胞活力、抑制NHDF细胞内ROS含量、抑制NHDF细胞炎性细胞因子分泌、抑制NHDF细胞MAPKs/NF

【技术实现步骤摘要】
鲸蜡硬脂醇2～3份、尿囊素0.1～0.2份、透明质酸钠0.3～0.8份、 牛油果树果脂油3～5份、加去离子水至100份。该专利通过动物实 验即二甲苯至小鼠耳廓肿胀模型，具有较好的抗炎抗敏效果，对激素 依赖性皮炎、痤疮等损容性皮肤病皮肤屏障恢复有辅助治疗作用。
[0009]中国专利201610269896.2公开了一种用于婴幼儿敏感肌肤护理 的组合物，主要针对婴幼儿湿疹、痱子、蚊虫叮咬等病症，该组合物 包括马齿苋活性提取物0.1
‑
10份、苦参提取物0.1
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10份、白鲜根皮 提取物0.1
‑
10份、黄芩提取物0.1
‑
10份、透明质酸0.01
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1份。该 专利临床验证疗效确切，可克服西药副作用大，婴幼儿不宜大面积、 长时间使用的缺点。组合物中的透明质酸组分，与其他中药提取物组 分相互配合，使得组合物在起到清热解毒、除湿止痒、抗菌消炎作用 的同时，还具有保湿、促进组织修复、保护皮肤屏障的作用。
[0010]研究发现，马齿苋活性提取物可以通过与细胞因子的相互作用和 信号通路介导炎症细胞反应，具有抗炎的功效。然而，马齿苋活性提 取物成分复杂，非多酚类物质可能会影响其抗炎、舒缓等活性的发挥。
[0011]因此，有必要基于活性追踪方法对马齿苋抗炎、舒缓类活性成分 进行分离、提取，获得抗炎、舒缓类活性更佳马齿苋活性提取物，或 者将马齿苋活性提取物与具有抗炎、舒缓类马齿苋多酚类化合物联合 用药，开发具有重要应用价值的抗皮肤瘙痒、抗炎、舒缓类的化妆品 或者药物。

技术实现思路

[0012]本专利技术的专利技术目的之一是提供利用活性追踪法制备的马齿苋活 性多酚及其制备方法；本专利技术的另一专利技术目的是提供通过活性分析制 备的马齿苋活性提取物；本专利技术的再一专利技术目的是提供上述马齿苋活 性多酚的组合物以及马齿苋活性提取物在制备舒缓、抗炎、止痒类化 妆品或药品中的应用。
[0013]一方面，为了实现上述的专利技术目的，本专利技术提供了由马齿苋通过 活性追踪法制备的、下述结构式中式I至式III所示的马齿苋活性多 酚，其中：
[0014]式I所示的马齿苋活性多酚命名为马齿苋活性多酚
‑
1，简写为 MDP
‑
1,其结构式如下所示：
[0015][0016]式II所示的马齿苋活性多酚命名为马齿苋活性多酚
‑
2，简写为 MDP
‑
2，其结构式如下所示：
[0017][0018]式III所示的马齿苋活性多酚命名为马齿苋活性多酚
‑
3，简写为 MDP
‑
3，其结构式
如下所示：
[0019][0020]另一方面，为了实现上述的专利技术目的，本专利技术还提供了一种制备 上述马齿苋活性多酚的方法，该活性多酚是在下述的马齿苋活性提取 物的基础上制得的。其中，马齿苋活性提取物是通过包括如下过程的 方法利用活性分析法制备的：
[0021](1)将马齿苋粉碎；
[0022](2)粉碎后的马齿苋用乙醇
‑
水进行渗漉提取；
[0023](3)合并减压浓缩步骤(2)所得的提取液，得到浸膏；
[0024](4)用水混悬步骤(3)所得的浸膏，得到混悬液；
[0025](5)步骤(4)所得的混悬液用乙酸乙酯进行萃取，萃取液浓缩 后得乙酸乙酯萃取物；
[0026](6)将乙酸乙酯萃取物通过硅胶柱层析分离，采用石油醚
‑
乙酸 乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，得到若干馏分；
[0027](7)构建2,4
‑
二硝基氯苯诱导的正常人皮肤成纤维细胞(NHDF) 的损伤模型，评价步骤(6)所得各馏分的活性；
[0028]步骤(7)所得的具有最佳保护活性的馏分即为马齿苋活性提取 物。
[0029]其中，步骤(5)中选用乙酸乙酯进行萃取也是在活性分析的基 础上选择的：第一步，先将步骤(4)所得的混悬液依次用石油醚、 乙酸乙酯进行萃取，将各萃取液浓缩后分别得石油醚萃取物、乙酸乙 酯萃取物；第二步，基于构建的2,4
‑
二硝基氯苯暴露正常人皮肤成 纤维细胞(NHDF)的损伤模型，评价第一步中所得石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物的保护活性，发现乙酸乙酯萃取物具有更佳的保护活性。
[0030]进一步地，本专利技术在制备上述马齿苋活性提取物的基础上，制备 出上述的马齿苋活性多酚，其方法包括：
[0031]A、提供上述的马齿苋活性提取物；
[0032]B、步骤A中的马齿苋活性提取物先后采用凝胶柱及制备型HPLC 分离纯化得式I所示的马齿苋活性多酚
‑
1、式II所示的马齿苋活性多 酚
‑
2、式III所示的马齿苋活性多酚
‑
3。
[0033]在本专利技术的制备过程中，步骤(1)所使用的马齿苋半干的或新 鲜的，优选为新鲜马齿苋。
[0034]在本专利技术的制备过程中，步骤(2)中马齿苋与乙醇
‑
水的质量比 可以为1:(10
‑
100)。
[0035]在本专利技术的制备过程中，步骤(2)中所采用的乙醇
‑
水为30％
‑
80％ 的乙醇，优选为35％
‑
75％的乙醇，更优选为40％
‑
60％的乙醇，例如50％ 的乙醇。此处，所说的乙醇浓度为体积浓度，例如50％的乙醇是指乙 醇与水的体积比为50:50。
[0036]在本专利技术的制备过程中，步骤(6)中乙酸乙酯萃取物经硅胶柱 色谱分离时，选用
的硅胶可为80
‑
100目或200
‑
300目或300
‑
400目， 优选的硅胶为200
‑
300目或300
‑
400目，更优选的硅胶为或300
‑
400 目。
[0037]在本专利技术的制备过程中，步骤B中用凝胶柱分离时，可采用 Sephadex LH
‑
20凝胶柱色谱分离，用氯仿
‑
甲醇进行梯度洗脱。
[0038]作为本专利技术制备方法的一种具体实施方式，可采用鲜马齿苋10 kg，粉碎，用乙醇(50％)渗漏提取24小时，合并减压浓缩提取液， 得浸膏。总浸膏用适量水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取， 将各萃取液浓缩后分别得石油醚萃取物，乙酸乙酯萃取物；基于构建 的2,4
‑
二硝基氯苯暴露正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)损伤模型，评 价石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物保护活性；将具有更佳保护活性的 乙酸乙酯萃取物通过硅胶(300
‑
400目)柱层析分离，采用石油醚
‑
乙 酸乙酯混合溶剂梯度洗脱，得到馏分Fr.1
‑
8；基于前期构建的2,4
‑ꢀ
二硝基氯苯暴露正常人皮肤成纤维细胞(NH本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.由马齿苋通过活性追踪法制备的、下述结构式中式I至式III所示的马齿苋活性多酚之一：2.一种制备马齿苋活性提取物的方法，该方法包括如下的过程制备：(1)将马齿苋粉碎；(2)粉碎后的马齿苋用乙醇
‑
水进行渗漉提取；(3)合并减压浓缩步骤(2)所得的提取液，得到浸膏；(4)用水混悬步骤(3)所得的浸膏，得到混悬液；(5)步骤(4)所得的混悬液用乙酸乙酯进行萃取，萃取液浓缩后得乙酸乙酯萃取物；(6)将乙酸乙酯萃取物通过硅胶柱层析分离，采用石油醚
‑
乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，得到若干馏分；(7)构建2,4
‑
二硝基氯苯诱导的正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)的损伤模型，评价步骤(6)所得各馏分的活性；其中，步骤(7)中具有最佳保护活性的馏分为马齿苋活性提取物。3.一种制备如权利要求1中所述的马齿苋活性多酚的方法，该方法包括：A、提供如权利要求2所述的马齿苋活性提取物；B、步骤A中的马齿苋活性物先后采用凝胶柱及制备型HPLC分离纯化得式I所示的马齿苋活性多酚
‑
1、式II所示的马齿苋活性多酚
‑
2、式III所示的马齿苋活性多酚
‑
3。4.如权利要求2或3所述的制备方法，其中，步骤(2)中所采用的乙醇
‑
水为30％
‑
80％的乙醇，优选为35％
‑
75％的乙醇，更优选为40％
‑
60％的乙醇。5.一种用于抗炎、止痒的马齿苋活性多酚的组合物，该组合物包括如权利要求1中所述的式I至式III所示的马齿苋活性多酚中的至少一种。6.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱晓锋，郑冯锋，周志刚，李嘉欣，
申请(专利权)人：诺斯贝尔化妆品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：