水痘带状疱疹病毒融合蛋白以及包含该融合蛋白的免疫原性组合物制造技术

本发明专利技术涉及水痘带状疱疹病毒融合蛋白以及包含该融合蛋白的免疫原性组合物，更具体而言，涉及包含水痘带状疱疹病毒(Varicella Zoster Virus，VZV)的糖蛋白E(glycoprotein E，gE)以及免疫球蛋白分子的恒定区的融合蛋白以及包含该融合蛋白的免疫原性组合物。本发明专利技术不仅显着提高水痘带状疱疹病毒

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】水痘带状疱疹病毒融合蛋白以及包含该融合蛋白的免疫原性组合物


[0001]本专利技术涉及水痘带状疱疹病毒融合蛋白以及包含该融合蛋白的免疫原性组合物，更具体而言，涉及包含水痘带状疱疹病毒(Varicella Zoster Virus，VZV)的糖蛋白E(glycoprotein E，gE)以及免疫球蛋白分子的恒定区的融合蛋白以及包含该融合蛋白的免疫原性组合物。

技术介绍

[0002]水痘带状疱疹病毒(Varicella Zoster Virus，VZV)是一种水痘病毒(varicellovirus)属(genus)的人类甲型疱疹病毒(human alphaherpesvirus)之一，它会引起水痘(varicella，chickenpox)和带状疱疹(zoster，shingles)。水痘带状疱疹病毒的原发感染发生在上呼吸道黏膜(upper respiratory mucosa)的上皮细胞(epithelial cell)中，经过10～21天的潜伏期，在全身皮肤中出现以水疱疹(vesicular rash)为特征的水痘(chickenpox)。在最初感染(primary infection)过程中，水痘带状疱疹病毒通过轴突运输(axonal transport)从受感染的皮肤或血液进入宿主的神经节(ganglia)的感觉神经细胞(sensory nerve cell)中，引起多年的潜伏感染(latent infection)。潜伏可在神经节中的水痘带状疱疹病毒在宿主的免疫力降低时会再活化(reactivation)，引起带状疱疹疾病。已知，带状疱疹在神经节分布的皮节(dermatome)中伴有剧烈疼痛和水疱样皮疹，如果治疗不当，则可引起严重的后遗症，例如带状疱疹后遗神经痛(post
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herpetic neuralgia，PHN)等。
[0003]水痘带状疱疹病毒基因组(genome)是一种线性双螺旋DNA结构，其长度约为125000bp，编码最少71个开放阅读框(ORF，open reading frame)和启动子(promoter)。已知，其中9个组成病毒包膜表面糖蛋白(gB、gC、gE、gH、gI、gK、gL、gN以及gM)，并参与病毒复制以及进入。
[0004]目前用于预防带状疱疹的疫苗主要有减毒活疫苗(live attenuated vaccine)或包含免疫增强剂的重组蛋白疫苗。减毒活疫苗是使用减毒活病毒的早期方式，包含免疫增强剂的重组蛋白疫苗是在蛋白抗原中包含免疫增强剂的方式。
[0005]包含免疫增强剂的重组蛋白疫苗方式是旨在通过如下方式弥补现有减毒活疫苗方式的缺点，在减毒活疫苗的情况下，存在对预防带状疱疹和带状疱疹后遗神经痛的效力相对较低，且随着年龄增长，其效力会大大减少的缺点，然而通过临床试验，已证实包含免疫增强剂的重组蛋白疫苗与年龄无关地表现出高的效力和防御力。此外，减毒活疫苗的缺点在于，由于使用即使去除病毒的致病性也仍活着的病毒来制备，因此不能用于免疫力低下的患者，然而包含免疫增强剂的重组蛋白疫苗具有可用于免疫力低下的人的优点。
[0006]这种包含免疫增强剂的重组蛋白疫苗是一种在减毒活疫苗的效力以及安全性方面得以改善的疫苗。然而，该疫苗的带状疱疹预防率约是90％的水平，而且由于使用皂甙类免疫增强剂，因此可能会引发局部性疼痛。同时，众所周知，为了预防带状疱疹以及带状疱
疹后遗神经痛，对水痘带状疱疹病毒抗原的体液免疫应答(humoral immune response)的诱导以及细胞介导免疫原性(cell
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mediated immunity，CMI)的激活在预防中起到直接作用。
[0007]因此，需要研发一种新型带状疱疹疫苗组合物，该新型带状疱疹疫苗组合物不具有减毒活疫苗和包含皂甙类免疫增强剂重组蛋白疫苗的缺点，更安全，可选择性增加细胞介导免疫原性。
[0008]例如，目前在全世界广泛接种的带状疱疹疫苗左斯塔巴斯(Zostavax)是一种具有代表性的减毒活疫苗，其使用一种名为OKA的疫苗病毒株经过动物细胞培养以及纯化工艺来制备。这类疫苗的缺点在于，效力低，特别是随着年龄的增长效力急剧下降，并且不能用于免疫功能低下的患者。此外，广泛使用的带状疱疹疫苗欣安立适(Shingrix)是一种具有代表性的包含免疫增强剂重组蛋白疫苗，gE糖蛋白是通过动物细胞培养以及纯化工艺来制备，其中包含AS01免疫增强剂(包含脂质体、单磷酰脂质A(MPL)以及QS21)。据报道，效力约是90％，具有由免疫增强剂而引起的局部疼痛的副作用。
[0009]如上所述的常规疫苗在效力以及安全性上存在问题，因此存在预防的效果有些局限，并且引发局部疼痛等问题。

技术实现思路

[0010]专利技术要解决的技术问题
[0011]对此，本专利技术人通过确认新型疫苗组合物的功效以完成了本专利技术，该疫苗组合物显着提高功效的同时减少由施用疫苗而引起的副作用。
[0012]因此，本专利技术要解决的技术问题是提供一种包含水痘带状疱疹病毒(Varicella Zoster Virus，VZV)的糖蛋白E(glycoprotein E，gE)以及免疫球蛋白分子的恒定区的融合蛋白。
[0013]并且，本专利技术要解决的再一技术问题是提供一种编码上述融合蛋白的核酸分子。
[0014]并且，本专利技术要解决的另一技术问题是提供一种包含上述核酸分子的表达载体。
[0015]并且，本专利技术要解决的还一技术问题是提供一种用上述表达载体转化的宿主细胞。
[0016]并且，本专利技术要解决的又一技术问题是提供一种上述融合蛋白的制备方法。
[0017]并且，本专利技术要解决的又一技术问题是提供一种包含上述融合蛋白的免疫原性组合物。
[0018]并且，本专利技术要解决的又一技术问题是提供一种包含上述免疫原性组合物的试剂盒。
[0019]并且，本专利技术要解决的又一技术问题是提供通过施用上述免疫原性组合物来诱导免疫应答的方法。
[0020]同时，本专利技术要解决的又一技术问题是提供通过施用上述免疫原性组合物来预防水痘带状疱疹或带状疱疹后遗神经痛的方法。
[0021]用于解决技术问题的手段
[0022]为了解决上述问题，本专利技术提供一种包含水痘带状疱疹病毒的糖蛋白E(gE)和免疫球蛋白分子的恒定区的融合蛋白。
[0023]根据本专利技术的融合蛋白，所述水痘带状疱疹病毒的糖蛋白E可被截短(truncated)以去除C
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末端锚定区域。根据本专利技术的融合蛋白的糖蛋白E可以是通过序列号1记载的糖蛋白E。
[0024]根据本专利技术的融合蛋白，所述免疫球蛋白分子的恒定区(例如，Fc位点)可以与Fc受体结合以增进免疫原性。根据本专利技术的融合蛋白的所述免疫球蛋白分子的恒定区可以是免疫球蛋白重链的恒定位点，但不限于此。所述免疫球蛋白可以是选自由IgG、IgM、IgA、IgD以及IgA组成的组中的任意一个，但不限于此。一具体例中，所述免疫球蛋白可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种融合蛋白，其中，所述融合蛋白包含水痘带状疱疹病毒的糖蛋白E以及免疫球蛋白分子的恒定区。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述水痘带状疱疹病毒的糖蛋白E被截短以去除C
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末端锚定区域。3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述水痘带状疱疹病毒的糖蛋白E具有序列号1的序列。4.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白为选自由IgG、IgM、IgA、IgD以及IgA组成的组中的任意一个。5.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白为IgG。6.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述IgG为选自由Ig G1、IgG2、IgG3以及IgG4组成的组中的任意一个。7.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白分子的恒定区为IgG1重链的恒定区。8.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白分子的恒定区包含IgG1的铰链区域、CH2结构域以及CH3结构域。9.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白分子的恒定区还包括IgG1的CH1结构域。10.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述免疫球蛋白分子的恒定区包括Fc位点。11.根据权利要求10所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc位点与Fc受体结合以增进免疫原性。12.根据权利要求10所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc位点包含Fc变异体。13.根据权利要求12所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变异体为选自由G236A、S239D、A330L、以及I332E组成的组中的至少一种变异。14.根据权利要求12所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc变异体包含G236A/S239D/A330L/I332E变异。15.根据权利要求10所述的融合蛋白，其特征在于，所述Fc位点包含序列号2或序列号3的序列。16.根据权利要求12所述的融合蛋白，其特征在于，所述F...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳东均，金昄谦，卢憪美，朴根秀，李修泳，沈恩英，金玟秀，罗浣根，
申请(专利权)人：赛特瑞恩股份有限公司，
类型：发明
国别省市：