通过在降低的氧分压下干燥来稳定氧化酶制造技术

描述了涉及通过在降低的双原子氧分压下加热(或热)干燥来稳定氧化酶的组合物和方法。这些组合物和方法允许脱水含有氧化酶的组合物且不损失酶活性。物且不损失酶活性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过在降低的氧分压下干燥来稳定氧化酶


[0001]本专利技术的组合物和方法涉及通过在降低的双原子氧分压下加热(或热)干燥来稳定氧化酶。这些组合物和方法允许干燥含有氧化酶的组合物且不损失酶活性。

技术介绍

[0002]氧化酶(EC 1.1.3)是催化氧化还原反应的酶，典型地涉及作为电子受体的双原子氧(O2)。氧化酶的实例是葡萄糖氧化酶、己糖氧化酶、单胺氧化酶、黄嘌呤氧化酶、L
‑
古洛糖酸内酯氧化酶、赖氨酰氧化酶、NADPH氧化酶、多酚氧化酶、细胞色素P450氧化酶以及漆酶。本文列出了许多另外的酶。
[0003]葡萄糖氧化酶(GOx；EC 1.1.3.4)是可在异源宿主中过表达以进行大规模生产，并且具有特别广泛范围的商业用途的氧化酶。GOx(有时称为GOD)广泛用于控制微生物污染(例如在酿酒中)，以及用于生化分析和生物传感器以测量血液和尿液中的游离葡萄糖。GOx还用于在烘焙中生产更强的面团，以去除食品包装中的氧气，并且防止某些食品(如蛋清)的褐变。
[0004]己糖氧化酶(HOx：EC 1.1.3.5)催化单糖和二糖氧化为对应的内酯，伴随将分子氧还原为过氧化氢。这种酶通过在某些甲基营养酵母中过表达来商业化生产。己糖氧化酶能够氧化多种底物，这些底物包括D
‑
葡萄糖、D
‑
半乳糖、麦芽糖、纤维二糖以及乳糖。广泛的底物特异性将这种酶与对D
‑
葡萄糖高度特异的GOx区别开。HOx还用于在烘焙中生产更强的面团。
[0005]GOx和HOx是热敏性酶，并且由于生产和储存过程中大量的活性损失，它们的商业生产变得昂贵和低效。涉及通过加热干燥的脱水过程，如喷雾干燥，对酶蛋白具有特别大的破坏性。鉴于GOx和HOx的大量用途，需要以具有成本效益的方式提高稳定化的方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的组合物和方法涉及通过在与大气条件相比下降低的氧分压条件下加热(或热)干燥来稳定氧化酶。这些组合物和方法允许脱水含有氧化酶的组合物且不损失酶活性。这些组合物和方法的方面和实施例描述于以下独立编号的段落中。
[0007]1.在一方面，提供了用于提高干燥的氧化酶组合物中回收氧化酶活性的方法，该方法包括：在低于标准大气压的氧分压条件下热干燥氧化酶，其中，在水溶液或悬浮液中重构干燥的氧化酶时，与在标准大气压的氧分压条件下干燥的氧化酶相比，在低于标准大气压的氧分压条件下干燥的相同氧化酶表现出提高的活性，其中标准大气压的氧分压条件在标准温度和压力下测量。
[0008]2.在段落1的方法的一些实施例中，干燥该氧化酶的氧分压不超过120mm
‑
Hg。
[0009]3.在段落2的方法的一些实施例中，干燥该氧化酶的氧分压不超过80mm
‑
Hg。
[0010]4.在段落3的方法的一些实施例中，喷雾干燥该氧化酶的氧分压不超过40mm
‑
Hg。
[0011]5.在段落1
‑
4中任一段落所述的方法的一些实施例中，该氧化酶的热干燥在真空
下进行。
[0012]6.在段落1
‑
4中任一段落所述的方法的一些实施例中，该氧化酶的热干燥在惰性气体下进行。
[0013]7.在段落6的方法的一些实施例中，该氧化酶的热干燥在氮气下进行。
[0014]8.在段落1
‑
7中任一段落所述的方法的一些实施例中，该氧化酶是葡萄糖氧化酶或己糖氧化酶。
[0015]9.在另一方面，提供了氧化酶，其通过如段落1
‑
8中任一段落所述的方法产生。
[0016]根据本说明书，组合物和方法的这些和其他方面和实施例将是显而易见的。
具体实施方式
[0017]I.前言
[0018]本专利技术人已经发现，在降低的分子氧分压条件下加热(或热)干燥氧化酶，在水溶液或悬浮液中重构时改善了酶的活性。在这以前，还没有描述通过在用于制备储存的酶的条件下控制氧分压来提高氧化酶的稳定性或回收活性。
[0019]II.定义和缩写
[0020]在详细地描述本专利技术的组合物和方法之前，为了清楚起见定义以下术语。未定义的术语应当符合相关领域中所使用的常规含义。
[0021]如本文所用，可互换地，“加热干燥”或“热干燥”是通过加热将基于水分蒸发的水性酶组合物脱水成所述酶的固体组合物的方法。
[0022]如本文所用，术语“颗粒”是指物质的小粒子。该粒子包含任选地具有一个或多个任选包衣层的核。
[0023]如本文所用，术语“回收活性”或“活性回收率”是指(i)在涉及一种或多种以下应激物的处理后酶的活性：加热、增压、增高pH、降低pH、储存、干燥、暴露于表面活性剂、暴露于溶剂和机械应力)与(ii)处理之前酶的活性的比率。回收活性可以表示为百分比。回收活性百分比计算如下：
[0024][0025]如本文所用，“标准温度和压力”是20℃和1atm。
[0026]如本文所用，术语“约”是指参考值的
±
15％。
[0027]为了便于参考，可以将本专利技术的组合物和方法的要素排列在一个或多个标题下。要注意的是，每个标题下的组合物和方法也适用于其他标题下的组合物和方法。
[0028]如本文所用，单数冠词“一个/一种(a/an)”以及“该/所述(the)”涵盖复数个指示物，除非上下文中另外明确指明。本文引用的所有参考文献均通过援引以其全文特此并入。除非另外说明，否则以下缩写/首字母缩略词具有以下含义：
[0029]℃
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
摄氏度
[0030]atm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
大气压
[0031]g或gm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
克
[0032]g/L
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
克/升
[0033]g/mol
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
克/摩尔
[0034]mol/mol
ꢀꢀꢀꢀꢀ
摩尔比
[0035]μmol
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
微摩尔
[0036]hr或h
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
小时
[0037]kg
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
千克
[0038]mg
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
毫克
[0039]mL或ml
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
毫升
[0040]min
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
分钟
[0041]M
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
摩尔
[0042]mM
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
毫摩尔
[0043]μm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
微米(micron)
[0044]UFC
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
超滤浓缩物
[0045]溶解的固体
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种提高干燥的氧化酶组合物中回收氧化酶活性的方法，所述方法包括：在低于标准大气压的氧分压条件下热干燥氧化酶，其中，在水溶液或悬浮液中重构干燥的氧化酶时，与在标准大气压的氧分压条件下干燥的氧化酶相比，在低于标准大气压的氧分压条件下干燥的相同氧化酶表现出提高的活性，其中标准大气压的氧分压条件在标准温度和压力下测量。2.如权利要求1所述的方法，其中干燥所述氧化酶的氧分压不超过120mm
‑
Hg。3.如权利要求2所述的方法，其中干燥所述氧化酶的氧分压不超过80mm
‑
Hg。4.如权利要求3所述的方法，其中喷雾干燥...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：丹尼斯科美国公司，
类型：发明
国别省市：