一种植物基食品、乳制品中γ-氨基丁酸的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种植物基食品、乳制品中γ

【技术实现步骤摘要】
一种植物基食品、乳制品中
γ
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氨基丁酸的检测方法


[0001]本专利技术涉及食品检测
，尤其涉及一种在植物基食品和乳制品中γ
‑
氨基丁酸的检测方法。

技术介绍

[0002]γ
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氨基丁酸(γ
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Amion butyric acid，简称GABA)，又称氨酪酸，是一种天然存在的非蛋白质氨基酸，广泛分布于动植物体内。GABA是哺乳动物中枢神经系统中重要的抑制性神经递质，参与脑循环生理活动，具有降压、改善脑机能、增强记忆、抗焦虑、抗衰老、助睡眠等生理功能。
[0003]健康化、功能化是食品行业发展的必然趋势，γ
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氨基丁酸作为一种医药食品中重要的功能因子，正广泛应用于食品领域中。建立γ
‑
氨基丁酸的检测方法，可以为食品研发者提供工艺数据支撑，同时有利于保证产品质量安全。
[0004]调研发现，关于GABA的测定方法，主要有氨基酸分析仪法、高效液相色谱法等，氨基酸分析仪普及率较低，由于GABA对电化学、紫外、可见光及荧光的响应强度低，直接测定较为困难，需要将其衍生化处理后再测定，高效液相色谱法已成为测定GABA的主要方法，现有的γ
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氨基丁酸检测方法液相色谱法(NY/T 2890
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2016稻米中γ
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氨基丁酸的测定；QB/T5197
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2017葡萄酒中12种游离氨基酸的测定)，两种方法主要针对的是稻米、葡萄酒等的γ
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氨基丁酸含量进行检测。
[0005]目前，常用的GABA衍生化方法主要有丹磺酰氯(DNS)法、2,4—二硝基氟苯(FDNB)法、邻苯二甲醛(OAP)法等。其中，FDNB毒性太强、灵敏度低，OAP反应不稳定，传统的DNS法操作较为复杂。
[0006]然而，目前针对大豆、豆乳等植物基食品及酸奶等乳制品研究较少，且上述以酒或稻米基质的γ
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氨基丁酸检测方法应用于植物基食品和乳制品检测时存在以下问题：1、针对酒的γ
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氨基丁酸检测方法不适用于植物基食品或乳制品的检测：对酒检测时不需要进行提取、直接进行衍生、衍生步骤繁琐、费时，并需要液相荧光检测器检测，不利于推广；2、针对稻米的γ
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氨基丁酸检测方法不适用于植物基食品或乳制品的检测：稻米提取试剂为乙醇水，运用于豆制品及乳制品提取后上机检测会出现色谱峰基线杂峰较多情况，同时，该方法中运用碳酸氢钠作为衍生试剂缓冲液，目标峰响应较低，影响检出限制定，方法衍生需70℃反应20min，衍生条件较为繁琐；另外，运用该方法进行实验时，出现标准品不溶于乙腈，标准曲线水配出现峰漂移情况，影响结果判定；并且该方法检测波长436nm，同样波长下植物基食品或乳制品则检测不出现峰位，说明稻米检测的液相色谱条件不适用于植物基食品和乳制品。
[0007]因此，有必要优化或开发新的检测方法以满足植物基食品及乳制品中γ
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氨基丁酸的检测。

技术实现思路

[0008]为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种植物基食品、乳制品中γ
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氨基丁酸的检测方法。该方法能够对植物基食品和乳制品中的γ
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氨基丁酸进行检测，具有提取效果好、检测时间短、结果稳定准确的特点。
[0009]为了达到上述目的，本专利技术提供了一种植物基食品、乳制品中γ
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氨基丁酸的检测方法，该检测方法包括：将待测样品用提取剂提取得到待衍生的样品溶液，然后向待衍生的样品溶液中加入缓冲液、衍生剂进行衍生，对衍生后的样品溶液进行液相色谱测试，根据测试结果分析得到待测样品中γ
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氨基丁酸的含量；其中，所述提取剂包括甲醇水溶液，所述缓冲溶液包括硼酸缓冲液，所述衍生剂包括丹酰氯乙腈溶液；所述甲醇水溶液中甲醇与水的体积比为65:35
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75:25，所述硼酸缓冲液的pH值为8
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9，所述丹酰氯乙腈溶液的质量浓度为0.5mg/mL
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1mg/mL。
[0010]本专利技术研究发现，相比于常用的乙醇水溶液，本专利技术采用的甲醇水溶液对植物基食品和乳制品的提取效果更好，且上机后出峰效果更好。在一些具体实施方案中，通过控制甲醇水溶液中甲醇的比例可以进一步提高提取效果、使峰位稳定性进一步提高，检测方法的精密度、重复性、回收率、标准曲线线性都符合行业要求，并提高结果准确性。具体地，在所述甲醇水溶液中，所述甲醇与水的体积比一般控制为65:35
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75:25(优选为70：30)。
[0011]本专利技术研究发现，采用丹酰氯乙腈溶液作为衍生剂，同时控制丹酰氯乙腈溶液的浓度能够提高目标峰的峰面积，提高仪器响应程度，降低检出限。所述丹酰氯乙腈溶液的质量浓度一般可以控制为0.5mg/mL
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1mg/mL，例如可以是0.625mg/mL。
[0012]在本专利技术的具体实施方案中，一般采用碱性的缓冲溶液与丹酰氯乙腈溶液配合，有助于丹酰氯发挥衍生作用。同时，本专利技术研究发现，通过选择合适的缓冲液种类和pH值范围可以提高样品对仪器的响应性、获得较大的目标峰峰面积。在一些具体实施方案中，所述缓冲溶液一般选择硼酸缓冲液(包括硼酸、pH调节剂、水)，所述硼酸缓冲液的pH值为8
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9，优选为9。
[0013]本专利技术研究发现，调节缓冲溶液采用的碱的种类会影响目标峰的峰型质量。本专利技术一般采用氢氧化钠溶液作为硼酸缓冲液的pH调节剂，即所述硼酸缓冲液一般包括硼酸、氢氧化钠和水，以获得较好峰型。在一些具体实施方案中，所述硼酸缓冲液中硼酸的质量浓度可以为10g/L
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15g/L，作为pH调节剂的氢氧化钠溶液的浓度可以是5M。
[0014]在上述检测方法中，所述提取过程一般包括：将待测样品与提取剂混合，第一次超声、第一次离心，收集上清液至容量瓶；然后将第一次离心获得的残渣与提取剂混合，第二次超声、第二次离心，收集上清液至容量瓶；再将第二次离心获得的残渣与提取剂混合，第三次超声、第三次离心，收集上清液至容量瓶，将上述三次离心后的上清液的混合后利用提取剂定容(一般定容至25mL)，得到待衍生的样品溶液。
[0015]在本专利技术的具体实施方案中，上述提取过程中进行“加入提取剂
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超声
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离心
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收集上清液”的循环次数可以根据实际情况调整，一般在3次以上。
[0016]在上述提取过程中，第一次离心采用的转速可以是10000rpm、时间可以是10min；第一次离心之后的离心(例如第二次离心、第三次离心)采用的转速可以是10000rpm、时间可以是5min。第一次超声的时间一般较长，可以是10min
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20min；第一次超声之后的超声(例如第二次超声、第三次超声)的时间相对较短，可以是5min。在一些具体实施方案中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物基食品、乳制品中γ
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氨基丁酸的检测方法，该检测方法包括：将待测样品用提取剂提取得到待衍生的样品溶液，然后向待衍生的样品溶液中加入缓冲液、衍生剂进行衍生，对衍生后的样品溶液进行液相色谱测试，根据测试结果分析得到待测样品中γ
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氨基丁酸的含量；其中，所述提取剂包括甲醇水溶液，所述缓冲液包括硼酸缓冲液，所述衍生剂包括丹酰氯乙腈溶液；所述甲醇水溶液中甲醇与水的体积比为65:35
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75:25，所述硼酸缓冲液的pH值为8
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9，所述丹酰氯乙腈溶液的质量浓度为0.5mg/mL
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1mg/mL。2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述硼酸缓冲液包括硼酸、氢氧化钠和水，所述硼酸缓冲液中硼酸的质量浓度优选为10g/L
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15g/L，所述硼酸缓冲液的pH值优选为9。3.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述丹酰氯乙腈溶液的质量浓度为0.625mg/mL。4.根据权利要求1所述的检测方法，其中，在进行提取时，所述待测样品与所述提取剂的比例为(0.5g
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5g):(5mL
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10mL)，优选地，提取过程中采用的提取剂的总体积为25mL以下；优选地，在进行衍生时，所述待衍生的样品溶液与缓冲液、衍生剂的体积比为0.5:1.5:3；更优选地，所述待衍生的样品溶液、缓冲液、衍生剂的总体积为1mL以上。5.根据权利要求1
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4任一项所述的检测方法，其中，在进行衍生时，所述衍生的时间为2min<...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰丽，王丽云，刘亚鹏，徐红，冯春霞，张彩霞，高万东，巴根纳，樊启程，孙超，刘华，兰宏旺，闫盘炜，
申请(专利权)人：内蒙古伊利实业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：