本发明专利技术属于生物工程技术领域，公开了一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，选取无病虫害、进入开花期、植株生长健壮、高度30～40cm、具有10～15个节间的优良铁皮石斛植株，运用植物生物促进技术，经过药剂配制、节间划痕切口、蘸取、涂抹以及封口的操作步骤，在铁皮石斛茎节上获得根芽一体化植株，次年在母株上开花。本发明专利技术提高了铁皮石斛的繁殖系数，具有萌发率高，成苗快，小苗品质好、生长势强、生殖期缩短，次年开花等优势，在短时间内能够得到高品质且整齐化一的铁皮石斛种苗，为铁皮石斛的育种、种苗培育、标准化、商品化生产及物种的保护及兰科植物的可持续利用提供有效的途径。保护及兰科植物的可持续利用提供有效的途径。保护及兰科植物的可持续利用提供有效的途径。
【技术实现步骤摘要】
一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法
[0001]本专利技术属于生物工程
，尤其涉及一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法。
技术介绍
[0002]目前，铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo.)属于兰科 (Orchidaceae_)石斛属(Dendrobium SW.)多年生附生草本植物，生于海拔1600 米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒，铁皮石斛具有滋阴清热、益胃生津、润肺、止咳、改善消化系统等功效，常用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热、视力弱等多种病症，是我国传统的名贵珍稀中药材，具有很高的药用价值和市场前景。
[0003]铁皮石斛育种基础研究缺乏，盲目引种，种源混乱，且在多代组培繁殖过程中，由于连续继代培养导致品种退化严重和玻璃化现象，需要开展品种选育及小苗复状。
[0004]在自然环境条件下不同栽培模式，铁皮石斛产生了多种遗传变异类型，园艺性状及农艺性状特异性明显，导致资源质量良莠不齐，药效成分差异大，无法满足消费者对高品质石斛产品的需求，生产上急需培育出适合本地生境及气候特点的铁皮石斛优良品种，也就是本地种源的开发性挖掘。
[0005]近年来，贵州省林科院石斛研发团队依托《贵州
·
石斛属植物种质资源库》及《铁皮石斛仿野生试培试栽种植基地》等项目，对附树栽培的铁皮石斛开展了种源，附生树种，绑植季节，绑植高度，海拔，绑植带种类，绑植苔藓与否，林地清理与否及施肥，浇水，给药等多种不同试验设计，旨在培育适宜不同种植模式的铁皮石斛优良品种。
[0006]铁皮石斛优异种质资源选育和优良品种培育是目前产业发展的首要任务，铁皮石斛是一种生长缓慢、自身繁殖能力很低的兰科附生植物，种子繁殖十分困难，需与真菌共生才能萌发，而传统的分株、扦插等方式繁殖系数低，通常为1～3，因此利用选育的优良铁皮石斛枝条为材料开展无性快繁相关技术研发，形成生长周期短，提早开花，满足成苗率较高的需求，达到优良品种的快速繁育，形成品质可控的繁育技术体系，为铁皮石斛产业化发展提供优良种质。
[0007]通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：
[0008](1)铁皮石斛种子繁殖十分困难，传统的分株、扦插等方式繁殖系数低。
[0009](2)铁皮石斛育种基础研究缺乏，盲目引种，种源混乱，且在多代组培繁殖过程中，由于连续继代培养导致品种退化严重和玻璃化现象。
[0010](3)在自然环境条件下不同栽培模式，铁皮石斛产生了多种遗传变异类型，园艺性状及农艺性状特异性明显，导致资源质量良莠不齐，药效成分差异大，无法满足消费者对高品质石斛产品的需求。
技术实现思路
[0011]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方
法，尤其涉及一种生物促成铁皮石斛萌芽成苗较高的混合药剂的应用。
[0012]本专利技术是这样实现的，一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括：通过铁皮石斛优良植株的筛选，在每一节间开展人工切口等处理，并分别施以诱导芽萌发及生根的混合药剂Ⅰ和混合药剂Ⅱ，在短时间内获得大量整齐划一的健壮小苗。
[0013]进一步，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括以下步骤：
[0014]步骤一，铁皮石斛培养对象的建立：选取盆栽的生长健壮的无病虫害的铁皮石斛植株作为试验材料，开展实验前预处理；
[0015]步骤二，茎段处理：在生长健壮的铁皮石斛植株上选取一定高度的具有一定数量节间的铁皮石斛茎，用花洒喷头冲洗，用酒精消毒，无菌解剖刀在茎的每一节间处划一定深度的切口，在对侧偏下处采用同样方法切口以施混合药剂；
[0016]步骤三，诱导芽阶段：为获得更多的铁皮石斛萌芽，用滴管吸取一定浓度 6
‑
苄基氨基嘌呤(6
‑
BA)与赛苯隆(TDZ)的混合药剂Ⅰ，滴在每一节间的切口上，用石蜡封口，经20～30天培养，分化成无根小芽；
[0017]步骤四，诱导生根阶段：为获得独立生长的铁皮石斛植株，用滴管吸取一定浓度的2,4二氯苯氧乙酸(2,4
‑
D)与α
‑
萘乙酸(NAA)的混合药剂Ⅱ，滴在每一节间的对侧切口上，用石蜡封口，经10～20天培养，长成具2～3条根的完整植株；
[0018]步骤五，炼苗：当铁皮石斛小苗长至一定高度时，将有根小苗从基部剥离，置于一定稀释倍数的甲基硫菌灵溶液中浸泡一段时间，用镊子取出在温室中晾干，避免根部腐烂；
[0019]步骤六，移栽：待根部失水变白，栽植到预先经过消毒处理且由锯末和珍珠岩组成的混合基质的育苗盘中，适宜条件下铁皮石斛即可正常生长；移栽成活后，生长季节浇施花多多，薄肥勤施，加强病虫害管护，铁皮石斛次年开花，从而缩短开花时间，在短时间内满足商品化优良种苗的需求。
[0020]进一步，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法还包括：
[0021]通过根茎剥离，分离小苗栽植于盛有基质的育苗盘上，短时间内在一定的栽培环境条件下获得大量整齐划一的铁皮石斛开花植株。
[0022]进一步，所述步骤一中的铁皮石斛培养对象的建立包括：
[0023]选取盆栽的，生长健壮的，具有生长势强，药效成分含量高，无病虫害的铁皮石斛植株作为母株，置于70％遮阳的温室内，在花芽分化前的30～40天内，摘取铁皮石斛各枝条的顶芽，去掉顶端优势，抑制高生长，获得培养材料。
[0024]进一步，所述步骤二中的茎段的处理包括：
[0025]针对所筛选的铁皮石斛植株，选取高度为20～30cm，具有10～15个节间的铁皮石斛茎，用花洒喷头冲洗5min，用棉签蘸75％的酒精消毒每一茎节间，用无菌解剖刀在茎节间处划一切口，深1mm，同样方法在对侧偏下也划一相同深度的切口。
[0026]进一步，所述步骤三中的6
‑
苄基氨基嘌呤与赛苯隆的质量比为1：1，所述混合药剂Ⅰ的浓度为1.0mg/L；经20～30天培养，在节上分化小芽数达1～2株。
[0027]进一步，所述步骤四中的2,4二氯苯氧乙酸与α
‑
萘乙酸的质量比为1：1，所述混合药剂Ⅱ的浓度为0.5mg/L；经10～20天培养，长成具有2～3条根、3～4片叶的完整植株。
[0028]进一步，所述步骤五中的炼苗包括：
[0029]当铁皮石斛小苗长至8～10cm，具有4～6条根时，将生根小苗从基部剥离，置于50％甲基硫菌灵可湿性粉剂1500倍液中浸泡3～5min，温室中晾干2～3天。
[0030]进一步，所述步骤六中的移栽包括：
[0031]待根部失水变白，栽植到预先经过50％多菌灵500倍液消毒且由锯末和珍珠岩按体积比3：1配置组成的混合基质的育苗盘中，每盘栽植120株，浇足定根水，将育苗盘置于温室中，保持20～28℃温度、60％湿度、70％遮阳并通风条件，铁皮石斛即可正常生长，成苗本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，其特征在于，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括：通过铁皮石斛优良植株的筛选，在每一节间开展划痕切口等人工处理，并实施诱导芽萌发及生根的混合药剂Ⅰ和混合药剂Ⅱ，在短时间内获得大量整齐划一的健壮小苗。2.如权利要求1所述的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，其特征在于，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法还包括：通过根茎剥离，分离小苗栽植于盛有基质的育苗盘上，短时间内给予一定的栽培环境条件获得大量整齐划一的铁皮石斛开花植株。3.如权利要求1所述的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，其特征在于，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括以下步骤：步骤一，铁皮石斛培养对象的建立：选取盆栽的生长健壮的无病虫害的铁皮石斛植株作为试验材料，开展实验前预处理；步骤二，茎段处理：在生长健壮的铁皮石斛植株上选取一定高度的具有一定数量节间的铁皮石斛茎，用花洒喷头冲洗，用酒精消毒，无菌解剖刀在茎的每一节间处划一定深度的切口，对侧偏下采用同样方法处理；步骤三，诱导芽阶段：为获得更多的铁皮石斛萌芽，用滴管吸取一定浓度6
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苄基氨基嘌呤与赛苯隆的混合药剂Ⅰ，滴在每一节间的切口上，用石蜡封口，经一段时间培养，分化成小芽；步骤四，诱导生根阶段：为获得独立生长的铁皮石斛植株，用滴管吸取一定浓度2,4二氯苯氧乙酸与α
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萘乙酸混合药剂Ⅱ，滴在对侧偏下的切口上，用石蜡封口，经一段时间培养，长成完整植株；步骤五，炼苗：当铁皮石斛小苗长至一定高度时，将有根小苗从基部剥离，置于一定稀释倍数的甲基硫菌灵溶液中浸泡，用镊子取出在温室中晾干；步骤六，移栽：待根部失水变白，栽植到预先经过消毒处理且由锯末和珍珠岩组成的混合基质的育苗盘中，铁皮石斛正常生长；小苗移栽成活后，生长季节浇施花多多，薄肥勤施，加强病虫害管护，铁皮石斛次年开花。4.如权利要求3所述的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，其特征在于，所述步骤一中的铁皮石斛培养对象的建立包括：选取盆栽的，生长健壮的，具有生长势强，药效成分含量高，无病虫害的铁皮石斛植株作为母株，置于70％遮阳的温室内，在花芽分化前的30～40天内，摘取铁皮石斛各枝条的顶芽，去掉顶端优势，抑制高生长，获得培养材料。5.如权利要求3所述的铁皮石斛茎节诱导芽的快...
【专利技术属性】
技术研发人员：王莲辉，杨焱冰，江荣慧，田凡，颜凤霞，
申请(专利权)人：贵州省林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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