一种保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法及其应用，所述益生菌灭活方法包括如下步骤：调节益生菌培养液的温度至5

【技术实现步骤摘要】
一种保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，涉及一种保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法及其应用。

技术介绍

[0002]益生菌主要包含乳酸杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌及酵母等，由益生菌菌种经发酵、浓缩或离心、干燥等方式所制备的原料菌剂可称作益生菌菌剂，其中包括活菌体、死菌体、菌体成分及代谢产物。益生菌主要涉及功能性食品、膳食补充剂、发酵食品、日化护理、农用饲料、生态环保及预防医学等领域的应用产品开发，摄入足够数量的益生菌，对宿主起有益健康的作用。
[0003]益生菌细胞壁组分中的肽聚糖、多糖和磷壁酸，以及其代谢产物（维生素和游离氨基酸等）都能够增强免疫反应。这些成分在菌体失去活性后依然能够发挥作用，它们能诱导B淋巴细胞分泌多种抗体，还能够激活巨噬细胞，使之吞噬功能增强，并分泌多种具有抗击肿瘤功能的效应分子，如TNF
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α、IL
‑
6、IL
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12等，以此来增强机体免疫。
[0004]灭活菌是一种通过特殊的灭活技术，保留有益菌原有结构及特性，但不再具备生长繁殖能力的有益菌。“灭活”，就是采用物理或化学的方法将微生物的活细胞、或者活体（如病毒）杀死，使其不再具有生长与繁殖能力，但仍然保持细胞的形态。灭活的益生菌菌体抗病源微生物的能力主要源于两方面：一是有效增强机体的免疫力；二是靠灭活后细胞表面暴露更多的吸附位点，可以吸附在机体粘膜表面实现对病原菌的竞争性排斥。
[0005]目前，在灭活益生菌产品的实际应用场景中，由于其无活性指征，更多的在家庭日化、口腔护理、外用栓剂得到法规允许及行业青睐，但上述情况由于绝大多数情况下并非直接服用或长期接触吸收，而只是短暂接触后进行清洗去除，导致在实际益生菌功效发挥方面遭遇阻碍，特别的，在益生菌菌剂自身还未完全崩解溶出时无法有效进行位点吸附，导致最终只具备概念性，而无实质作用。
[0006]总体来看，现有技术在灭活型益生菌菌种制剂方面存在以下问题：（1）菌剂崩解释放缓慢：短暂条件接触下益生菌无法完全释放并进行位点结合；（2）无完整细胞结构：常规灭活工艺通常会导致细胞壁破裂，结构损伤明显，丧失基本菌种功能，显著影响益生菌功效发挥基础；（3）单位细胞含量较低：作为产品核心质量指标，需要满足其灭活型益生菌菌剂中关键单位细胞含量达到有效摄入量。
[0007]因此，对于本领域而言，需要优化益生菌灭活工艺，提供一种具备快速释放溶出、安全可靠、高菌量的灭活益生菌菌剂来满足在实际应用场景中的需求。

技术实现思路

[0008]针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法及其应用。
[0009]为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
第一方面，本专利技术提供一种保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法，所述保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法包括如下步骤：调节培养液温度至5
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25℃，调节培养液的pH至6.5
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7.0，离心，收集菌泥，与热激保护剂混合2
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3 h后，采用瞬时高温杀菌的方式进行灭活；所述热激保护剂包括胶体和甘氨酸盐；所述胶体包括明胶、卡拉胶或阿拉伯胶中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如明胶和卡拉胶的组合、卡拉胶和阿拉伯胶的组合、卡拉胶和阿拉伯胶的组合，其他任意的组合方式均可。
[0010]优选地，所述混合的温度为5
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25℃。
[0011]上述5
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25℃中的具体数值例5℃、6℃、7℃、8℃、9℃、10℃、11℃、12℃、13℃、14℃、15℃、17℃、20℃、22℃、25℃等。
[0012]上述6.5
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7.0中的具体数值例如6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7等。
[0013]上述2
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3 h中的具体数值例如2 h、2.1 h、2.2 h、2.3 h、2.4 h、2.5 h、2.6 h、2.7 h、2.8 h、2.9 h、3 h等。
[0014]优选地，所述益生菌包括乳杆菌属益生菌、双歧杆菌属益生菌、链球菌属益生菌、肠球菌属益生菌、乳球菌属益生菌、片球菌属益生菌、葡萄球菌属、明串珠菌属益生菌或酵母益生菌中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如乳杆菌属益生菌与双歧杆菌属益生菌的组合、乳球菌属益生菌与片球菌属益生菌的组合、双歧杆菌属益生菌与链球菌属益生菌的组合等，其他任意的组合方式均可。
[0015]优选地，所述乳杆菌属益生菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、德式乳杆菌（包括德式乳杆菌保加利亚亚种）、唾液乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、清酒乳杆菌、卷曲乳杆菌或费氏丙酸杆菌（包括费氏丙酸杆菌谢氏亚种）中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌的组合、发酵乳杆菌和格氏乳杆菌的组合、詹氏乳杆菌和清酒乳杆菌的组合等，其他任意的组合方式均可。
[0016]所述双歧杆菌属益生菌包括动物双歧杆菌（包括动物双歧杆菌乳亚种）、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌或两歧双歧杆菌中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如长双歧杆菌和短双歧杆菌的组合、婴儿双歧杆菌和两歧双歧杆菌的组合、动物双歧杆菌和婴儿双歧杆菌的组合，其他任意的组合方式均可。
[0017]所述链球菌属益生菌包括嗜热链球菌。
[0018]所述肠球菌属益生菌包括粪肠球菌和/或屎肠球菌。
[0019]所述乳球菌属益生菌包括乳酸乳球菌。
[0020]所述乳酸乳球菌包括乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种或乳酸乳球菌双乙酰亚种中的任意一种或至少两种的组合。
[0021]所述片球菌属益生菌包括乳酸片球菌和/或戊糖片球菌。
[0022]所述葡萄球菌属益生菌包括小牛葡萄球菌、木糖葡萄球菌或肉葡萄球菌中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如小牛葡萄球菌和木糖葡萄球菌的组合、木糖葡萄球菌和肉葡萄球菌的组合、小牛葡萄球菌和肉葡萄球菌的组合等，其他任意的组合方式均可。
[0023]所述明串珠菌属益生菌包括肠膜明串珠菌。
[0024]所述酵母益生菌包括布拉迪酵母和/或马克斯克鲁维酵母。
[0025]优选地，所述热激保护剂包括明胶和甘氨酸亚铁。
[0026]优选地，以菌泥的重量为1份，胶体的加入量为0.8
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1.8份，甘氨酸盐的加入量为0.03
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0.1份。
[0027]上述0.8
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1.8份中的具体数值例如0.8份、0.9份、1份、1.1份、1.2份、1.3份、1.4份、1.5份、1.6份、1.7份、1.8份等。
[0028]上述0.03
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0.1份中的具体数值例如0.03份、0.04份、0.05份、0本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法，其特征在于，所述保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法包括如下步骤：调节益生菌培养液的温度至5
‑
25℃，调节益生菌培养液的pH至6.5
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7.0，离心，收集菌泥，与热激保护剂混合2
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3 h后，采用瞬时高温杀菌的方式进行灭活；所述热激保护剂包括胶体和甘氨酸盐；所述胶体包括明胶、卡拉胶或阿拉伯胶中的任意一种或至少两种的组合。2.如权利要求1所述的保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法，其特征在于，所述益生菌包括乳杆菌属益生菌、双歧杆菌属益生菌、链球菌属益生菌、肠球菌属益生菌、乳球菌属益生菌、片球菌属益生菌、葡萄球菌属、明串珠菌属益生菌或酵母益生菌中的任意一种或至少两种的组合。3.如权利要求2所述的保持细胞结构完整性的益生菌灭活方法，其特征在于，所述乳杆菌属益生菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、德式乳杆菌、唾液乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、清酒乳杆菌、卷曲乳杆菌或费氏丙酸杆菌中的任意一种或至少两种的组合；所述双歧杆菌属益生菌包括动物双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌或两歧双歧杆菌中的任意一种或至少两种的组合；所述链球菌属益生菌包括嗜热链球菌；所述肠球菌属益生菌包括粪肠球菌和/或屎肠球菌；所述乳球菌属益生菌包括乳酸乳球菌；所述片球菌属益生菌包括乳酸片球菌和/或戊糖片球菌；所述葡萄球菌属益生菌包括小牛葡萄球菌、木糖葡萄球菌或肉葡萄球菌中的任意一种或至少两种的组合；所述明串珠菌属益生菌包括肠膜明串珠菌；所述酵母益生菌包括布拉迪酵母和/或马克斯克鲁维酵母。4.如权利要求1
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3中任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：方曙光，陈珂可，王勇，冯胜鹏，严涛，刘春，
申请(专利权)人：微康益生菌苏州股份有限公司，
类型：发明
国别省市：