一种小秦艽组织培养繁育方法技术

一种小秦艽组织培养繁育方法，包括如下步骤：(1)取小秦艽种子作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽。采用本发明专利技术所述的培养方法得到的小秦艽丛生芽增殖系数达到15

【技术实现步骤摘要】
一种小秦艽组织培养繁育方法


[0001]本专利技术涉及一种植物繁殖方法，特别是一种小秦艽组织培养繁育方法。

技术介绍

[0002]小秦艽，拉丁名Gentiana dahurica Fisch.，又称达乌里秦艽，为龙胆科龙胆属植物，是我国重要的传统中药之一。主产于我国西北、华北大部。其干燥根入药，主要成分为龙胆苦苷，是治疗结核病、黄疸、荨麻疹、风湿性关节炎等症的主药之一，具有重要的开发应用价值。随着小秦艽药理药效的深入研究及临床应用量的增加，大量的野生资源被掠夺性采挖，而小秦艽一般通过种子进行繁殖，但在初步的种苗繁育工作中发现，小秦艽的种子繁殖存在发芽率低、发芽不整齐、种苗质量不稳定等问题，严重制约了小秦艽的规范化种植和生产。采用生物技术组织培养技术，可以有效快速地提高小秦艽种苗的繁殖速度和质量，实现小秦艽优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种小秦艽组织培养繁育方法，它能够快速繁殖出大量适合移栽的优良小秦艽种苗、满足生产需要。
[0004]本专利技术通过以下技术方案达到上述目的：一种小秦艽组织培养繁育方法，包括以下步骤：
[0005](1)外植体的选择与消毒：取小秦艽饱满果实，剥去果皮后取出种子作为外植体，作为外植体，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15
‑
30min、添加入2
‑
3滴吐温
‑
20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
‑<br/>10min、无菌水冲洗3
‑
5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到无菌外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
[0006](2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的无菌外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23
‑
27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
‑
10小时/天的条件下培养45天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加1.0mg/L的6
‑
苄基腺嘌呤6
‑
BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
[0007](3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23
‑
27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
‑
10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5
‑
2.5mg/L的6
‑
苄基腺嘌呤6
‑
BA、0.1
‑
0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1
‑
1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
[0008]本专利技术的突出优点在于：
[0009](1)采用生物技术对小秦艽进行组织培养快速繁殖，通过小秦艽丛生芽的繁殖，在短时间内可培育出大量适合栽培种植的小秦艽幼苗，保障小秦艽种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。
[0010](2)采用本专利技术所述的培养方法得到的小秦艽丛生芽增殖系数达到15
‑
25倍，丛生
芽健壮，接种到生根培养基后容易生根。
具体实施方式
[0011]下面结合实施例对本专利技术的技术方案进一步说明。
[0012]实施例1
[0013]本专利技术所述的小秦艽的组织培养快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤：
[0014](1)外植体的选择与消毒：取小秦艽饱满果实，剥去果皮后取出种子作为外植体，作为外植体，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15
‑
30min、添加入2
‑
3滴吐温
‑
20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
‑
10min、无菌水冲洗3
‑
5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到无菌外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
[0015](2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的无菌外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23
‑
27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
‑
10小时/天的条件下培养45天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加1.0mg/L的6
‑
苄基腺嘌呤6
‑
BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
[0016](3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23
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27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
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10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5mg/L的6
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苄基腺嘌呤6
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BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，生长倍率为7.0倍，丛生芽增殖系数为15.5。
[0017]实施例2
[0018]本专利技术所述的小秦艽的组织培养快速繁殖方法的另一个实例，包括以下步骤：
[0019](1)外植体的选择与消毒：取小秦艽饱满果实，剥去果皮后取出种子作为外植体，作为外植体，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15
‑
30min、添加入2
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3滴吐温
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20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
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10min、无菌水冲洗3
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5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到无菌外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
[0020](2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的无菌外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23
‑
27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
‑
10小时/天的条件下培养45天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加1.0mg/L的6
‑
苄基腺嘌呤6
‑
BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
[0021](3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23
‑
27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
‑
10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加1.5mg/L的6
‑
苄基腺嘌呤6
‑
BA、0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小秦艽组织培养繁育方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)外植体的选择与消毒：取小秦艽饱满果实，剥去果皮后取出种子作为外植体，作为外植体，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15
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30min、添加入2
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3滴吐温
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20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8
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10min、无菌水冲洗3
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5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到无菌外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的无菌外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23
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27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
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10小时/天的条件下培养45天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加1.0mg/L的6
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苄基腺嘌呤6
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BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23
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27℃，光照强度1500lux，光照时间为8
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10小时/天的条件下培养75天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文静，王剑，郝博文，徐建文，任康达，孔妍，徐建平，白小荣，马岩，
申请(专利权)人：张文静，
类型：发明
国别省市：