CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种CD147作为生物标志物在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用，利用CD147在早期妊娠母体中的表达水平作为子痫前期的早期检测标志物。子痫前期是一种多因素疾病，临床表现多样，发病机制知之甚少。新标志物CD147的应用，提供了一种与传统方法相比(sFlt:PlGF比率，>20怀孕周)检测时间更早的子痫前期检测标志物，最早可于妊娠母体11

【技术实现步骤摘要】
CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药技术以及抗原检测领域，尤其涉及一种CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用。

技术介绍

[0002]子痫前期(PE)是导致产妇死亡及新生儿发病和死亡的最主要原因之一，其发病主要与胎盘发育异常有关。至今，胎盘异常诱发PE病发的机制仍不明确。PE的表型通常在妊娠中期的后期或妊娠晚期被检测到，然而PE的病理发生却始于妊娠早期。
[0003]许多子痫前期的生物学标记的研究表明，检测血管生成因子例如PlGF(胎盘生长因子)，或者sFlt
‑
1(可溶性fms样酪氨酸激酶
‑
1)与PlGF的比率可作为妊娠早期PE筛查的预测指标。这些标记物的早期(约20周妊娠)和晚期发作子痫前期的检出率分别为87.5％和48.6％，假阳性率为10％。而临床标记物和生物标记物的组合则显示出更高的检测率。然而，目前尚未有能于更早期准确预测PE发生的可靠标志物。在开发新的生物标志物以明确确定子痫前期的早期检测上，仍有改进的空间。
[0004]因此，现有技术还有待改进。

技术实现思路

[0005]鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用，利用CD147作为子痫前期的早期检测标志物，通过检测早期妊娠母体中CD147表达水平作为子痫前期的早期检测，为目前子痫前期早期检测试剂盒提供了一种新的生物标志物。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
>[0007]CD147作为生物标志物在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用。
[0008]一种子痫前期早期检测试剂盒，其中，所述试剂盒包括用于检测CD147蛋白含量的物质。
[0009]所述的试剂盒，其中，所述试剂盒包括CD147特异性抗体、抗人CD147特异的生物素化检测多克隆抗体、抗生物素蛋白
‑
生物素
‑
过氧化物酶复合物、显色剂以及洗涤液。
[0010]一种子痫前期早期检测试剂盒的应用，其中，将如上任一所述的试剂盒应用于测量人体体液或体外细胞培养上清液中的可溶性CD147蛋白的含量。
[0011]所述的子痫前期早期检测试剂盒的应用，其中，测量可溶性CD147蛋白含量的方法包括以下步骤：
[0012]1.1取待测样本，离心后获得上清液；
[0013]1.2将所述上清液制备成标准和梯度稀释样品；
[0014]1.3将CD147特异性抗体预涂在ELISA微孔板上，并将等体积的所述标准和梯度稀释样品分别加入到不同的孔中，密封后在37℃下孵育90min或4℃下孵育过夜；
[0015]1.4孵育完成后，向每个孔中加入等体积的抗人CD147特异的生物素化检测多克隆
抗体，重新密封后在37℃下第二次孵育60min；
[0016]1.5第二次孵育完成后，对每个孔进行洗涤；
[0017]1.6洗涤完成后，向每个孔中加入等体积的抗生物素蛋白
‑
生物素
‑
过氧化物酶复合物溶液，重新密封后在37℃下第三次孵育30min；
[0018]1.7第三次孵育完成后，对每个孔进行再次洗涤；
[0019]1.8再次洗涤完成后，向每个孔中加入等体积的3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺底物显色剂，重新密封后在37℃避光下第四次孵育5
‑
30min；
[0020]1.9第四次孵育完成后，加入终止溶液，并在30min内读取光密度；
[0021]1.10根据光密度计算所述标准和梯度稀释样品中可溶性CD147蛋白的含量。
[0022]有益效果：本专利技术提供了一种CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用，利用CD147在早期妊娠母体中的表达水平作为子痫前期的早期检测。子痫前期是一种多因素疾病，临床表现多样，发病机制知之甚少。新标志物CD147的应用，提供了一种与传统方法相比(sFlt:PlGF比率,>20怀孕周)检测时间更早的子痫前期检测标志物(CD147,11
‑
14怀孕周)，有助于对子痫前期进行更具体的早期检测以及临床管理，并为子痫前期的预防和早期干预提供新的科学依据，具有重要的理论意义和重大的社会意义。
附图说明
[0023]图1为本专利技术实施例中CD147在早期妊娠血压正常和子痫前期胎盘绒毛样本中的表达示意图。
[0024]图2为本专利技术实施例中CD147在小鼠(妊娠第16.5天)和人(足月)胎盘中的表达示意图。
[0025]图3为本专利技术实施例中利用ELISA来测量可溶性CD147蛋白含量的原理示意图。
[0026]图4为本专利技术实施例中利用ELISA测定的血压正常妊娠和子痫前期患者的妊娠早期血清中CD147表达水平。
具体实施方式
[0027]本专利技术提供一种CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0028]CD147是细胞表面的I型跨膜糖蛋白，可以和其他膜蛋白相互作用形成蛋白复合物，参与多种生理和病理过程。研究发现，CD147基因敲除小鼠的后代数量减少、体型瘦弱，可能与胎盘发育不全相关。在人的整个孕期中，CD147都可以在胎盘中检测到，并且在妊娠晚期PE患者胎盘中CD147呈现低表达。然而，临床上收集早期妊娠胎盘受到极大限制。另一方面，CD147可以在早期妊娠血清中以可溶形式检测到，但早期妊娠母体血清中可溶性CD147与PE之间的关联尚没有报道。本专利技术的前期初步数据表明，在正常妊娠中，孕早期的胎盘中和早期妊娠母体血清中CD147呈现高表达，而在PE病人胎盘中的CD147则显著下调。如图1所示为CD147在早期妊娠血压正常和子痫前期胎盘绒毛样本中的表达，其中，正常血压N＝8，PE N＝6，比例尺＝100μm。通过Image
‑
Pro Plus软件进行定量分析。可以看出，PE病人胎盘中的CD147含量显著下调。如图2所示为CD147在小鼠(妊娠第16.5天)和人(足月)胎
盘中的表达，比例尺＝100μm，其中小鼠胎盘(4
×
)比例尺＝600μm。可以看出，CD147在人和小鼠胎盘上表达，并主要存在于细胞滋养层和合体滋养层。
[0029]基于前期初步数据，本专利技术实施例提供了一种CD147作为生物标志物在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用，利用CD147在早期妊娠母体中的表达水平进行子痫前期的早期检测。
[0030]研究表明，大龄孕妇的糖代谢和高血压风险加大，而糖代谢和高血压与妊娠疾病如PE(子痫前期)、早产、妊娠糖尿病密切相关。虽然目前对PE的发生原因有初步的了解，但对其发病的分子机制仍不明确，且缺乏有效预防和治疗PE的方法。目前，终止妊娠取出胎儿和胎盘仍是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.CD147作为生物标志物在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用。2.一种子痫前期早期检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于检测CD147蛋白含量的物质。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括CD147特异性抗体、抗人CD147特异的生物素化检测多克隆抗体、抗生物素蛋白
‑
生物素
‑
过氧化物酶复合物、显色剂以及洗涤液。4.一种子痫前期早期检测试剂盒的应用，其特征在于，将如权利要求2
‑
3任一所述的试剂盒应用于测量人体体液或体外细胞培养上清液中的可溶性CD147蛋白的含量。5.根据权利要求4所述的子痫前期早期检测试剂盒的应用，其特征在于，测量可溶性CD147蛋白含量的方法包括步骤：1.1取待测样本，离心后获得上清液；1.2将所述上清液制备成标准和梯度稀释样品；1.3将CD147特异性抗体预涂在ELISA微孔板上，并将等体积的所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李卓伦，赵志昂，刘小凤，
申请(专利权)人：香港大学深圳医院，
类型：发明
国别省市：