【技术实现步骤摘要】
粉末样品;
[0011]b)供试品溶液的制备:精密称取20~50mg多个批次的复方冻干粉末样品,置于量 瓶中,分别加入有机溶剂1~2.5mL,超声充分溶解,再加入相同体积1~2.5mL超纯水, 超声混匀,制成不同批次的供试品溶液;
[0012](2)UPLC特征指纹图谱的建立:吸取不同批次的供试品溶液,分别注入超高效液相 色谱仪中,按照设定的色谱条件进行测定,得到多个供试品色谱图;采用中药色谱指纹图 谱相似性评价系统软件对所述多个供试品色谱图进行评价,相似度大于0.9的图谱即为合 格特征指纹图谱;
[0013]其中,所述色谱条件如下:
[0014]色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3(2.1
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150mm,1.8μm);
[0015]流动相以0.1%甲酸为流动相A,以乙腈为流动相B;所述流动相所采用的线性梯度洗 脱条件为:0~2.0min,7%B;2.0~5.0min,7%~15%B;5.0~10.0min,15%B;10.0~ 14.0min,15%~20%B;14.0~18.0min,20%B;18.0~20min,7%B;
[0016]体积流速为0.1~0.3mL/min,检测波长为254nm、278nm或300nm,柱温为30℃~40℃, 进样量为5μL。
[0017]作为本专利技术进一步的实施方式,所述UPLC特征指纹图谱建立方法还包括以下步骤:
[0018](3)对照品溶液的制备:分别精密称取升麻素苷、山柰酚3
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【技术保护点】
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一种治疗慢性复发性湿疹的中药组合物的超高效液相(UPLC)特征指纹图谱建立方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)供试品溶液的制备:a)复方冻干粉末样品的制备:按处方比例称取多个批次的防风、金银花、槐花、莪术、生地、白术、薏苡仁、苍术饮片,加入水,煎煮,浓缩,制备成多个批次的复方冻干粉末样品;b)供试品溶液的制备:精密称取20~50mg多个批次的复方冻干粉末样品,置于量瓶中,分别加入有机溶剂1~2.5mL,超声充分溶解,再加入相同体积1~2.5mL超纯水,超声混匀,制成不同批次的供试品溶液;(2)UPLC特征指纹图谱的建立:吸取不同批次的供试品溶液,分别注入超高效液相色谱仪中,按照设定的色谱条件进行测定,得到多个供试品色谱图;采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件对所述多个供试品色谱图进行评价,相似度大于0.9的图谱即为特征指纹图谱;其中,所述色谱条件如下:色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3(2.1
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150mm,1.8μm);流动相以0.1%甲酸为流动相A,以乙腈为流动相B;所述流动相所采用的线性梯度洗脱条件为:0~2.0min,7%B;2.0~5.0min,7%~15%B;5.0~10.0min,15%B;10.0~14.0min,15%~20%B;14.0~18.0min,20%B;18.0~20min,7%B;体积流速为0.1~0.3mL/min,检测波长为254nm、278nm或300nm,柱温为30℃~40℃,进样量为5μL。2.根据权利要求1所述的UPLC特征指纹图谱建立方法,其特征在于,还包括以下步骤:(3)对照品溶液的制备:分别精密称取升麻素苷、山柰酚3
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芸香糖苷、5
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甲基维斯阿米醇苷、异绿原酸C、水仙苷、异绿原酸A、芦丁、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸对照品适量,置于量瓶中,分别加入有机溶剂溶解并稀释,制成对照品溶液;(4)对照品色谱图的测定:吸取对照品溶液,注入超高效液相色谱仪中,按照所述色谱条件进行测定,得到所述对照品色谱图;(5)特征峰的确定:将所述特征指纹图谱和所述对照品色谱图进行比较,对所述特征指纹图谱中的特征峰进行指认;其中,所述特征指纹图谱中具有10个特征峰,分别为:1号峰的新绿原酸、2号峰的绿原酸、3号峰的隐绿原酸、4号峰的升麻素苷、5号峰的芦丁、6号峰的山柰酚
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芸香糖苷、7号峰的异绿原酸A、8号峰的水仙苷、9号峰的5
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甲基维斯阿米醇苷和10号峰的异绿原酸C。3.一种治疗慢性复发性湿疹的中药组合物的UPLC主成分含量测定方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)供试品溶液的制备:a)复方冻干粉末样品的制备:按处方比例称取同一批次的防风、金银花、槐花、莪术、生地、白术、薏苡仁、苍术饮片,加入水,煎煮,浓缩,制备成复方冻干粉末样品;b)供试品溶液的制备:精密称取20~50mg同一批次的复方冻干粉末样品,置于量瓶中,加入有机溶剂1~2.5mL,超声充分溶解,再加入相同体积1~2.5mL超纯水,超声混匀,制成供试品溶液;(2)混合对照品溶液的制备:分别精密称取绿原酸、隐绿原酸、升麻素苷、芦丁、山柰酚
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芸香糖苷、异绿原酸A、水仙苷、5
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甲基维斯阿米醇苷、异绿原酸C对照品适量,分别加入有机溶剂溶解,制成不同的对照品母液;将多个对照品母液混合,制成含有预设浓度的绿原酸、隐绿原酸、升麻素苷、芦丁、山柰酚3
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芸香糖苷、异绿原酸A、水仙苷、5
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甲基维斯阿米醇苷、异绿原酸C的混合对照品溶液,加入有机溶剂溶解并逐级稀释,制成系列质量浓度的混合对照品溶液;(3)主成分含量的UPLC测定:吸取所述供试品溶液以及不同质量浓度的混合对照品溶液,分别注入超高效液相色谱仪中,按照设定的色谱条件进行测定,采用外标峰面积法,测定所述供试品溶液中绿原酸、隐绿原酸、升麻素苷、芦丁、山柰酚3
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芸香糖苷、异绿原酸A、水仙苷、5
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技术研发人员:陈达灿,莫秀梅,黎雄,晏烽根,刘俊峰,
申请(专利权)人:广东省中医院广州中医药大学第二附属医院,广州中医药大学第二临床医学院,广东省中医药科学院,
类型:发明
国别省市:
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