用于治疗肾脏疾病的抗αvβ8整联蛋白抗体制造技术

提供了用于治疗肾脏疾病、如慢性肾脏疾病(CKD)的方法和组合物，其中这些方法和组合物包含与人αvβ8整联蛋白特异性和选择性结合的抗体或其抗原结合片段，发现该人αvβ8整联蛋白如所描述的在肾脏细胞和组织、以及特别地在患病的或纤维化的肾脏组织中高表达。披露的抗αvβ8整联蛋白抗体与肾脏中的人αvβ8整联蛋白结合并且阻断肾脏组织中TGF

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗肾脏疾病的抗
α
v
β
8整联蛋白抗体

技术介绍

[0001]肾脏疾病通常是指个体肾脏受损并且不能正常地从血液过滤废产物和过量水或帮助控制血压的病症。肾脏的功能是释放调节血压、产生维生素D并且控制红血细胞产生的激素。肾脏损害可能引起废物在体内累积并且还会引起或增加个体其他健康问题(如心脏疾病、心脏病发作、或中风)的风险。肾脏疾病的主要风险因素包括糖尿病、高血压、和肾衰竭家族史。肾脏疾病可以包括急性肾脏损伤(AKI)(涉及突然的肾脏功能丧失以及有时是暂时的肾脏功能丧失)和慢性肾脏疾病(CKD)(是指导致长时间肾脏功能降低的任何病症)。CKD可能会多年持续发展并且可能导致终末期肾脏(肾)疾病(ESRD)。
[0002]根据美国肾脏基金会(American Kidney Fund)2015年肾脏疾病统计数据，肾脏疾病是美国第九大死亡原因。在美国，约10％至14％的一般成年人群患有CKD，并且在女性中更普遍。然而，患有CKD的男性中CKD发展成肾衰竭或ESRD的可能性比女性高50％。此外，某些种族和族群比其他种族和族群患肾衰竭的风险更大。例如，与高加索人相比，非裔美国人的ESRD患病率高约3.7倍，美洲印第安人的高约1.4倍，并且亚裔美国人的高约1.5倍。西班牙裔患ESRD的可能性是非西班牙裔的将近1.5倍。
[0003]肾疾病进展通常导致功能性肾脏组织的完全破坏，这最终可能使受影响的个体需要终生透析或进行肾同种异体移植。肾疾病进展的特征在于纤维化，其使肾小球(肾小球硬化症)和肾小管(肾小管间质纤维化)遭到破坏。肾纤维化进展的关键因素是细胞因子TGF
‑
β、其相互作用的分子和受体、以及其下游细胞信号传导级联，这些下游细胞信号传导级联激活导致肾纤维化和肾功能下降的病理生理细胞机制。肾脏中TGF
‑
β表达和TGF
‑
β排泄与肾小球滤过率(GFR)下降和蛋白质渗漏(蛋白尿)相关。肾疾病进展通常导致功能性肾脏组织的完全破坏，这使受影响的个体需要终生透析或进行肾同种异体移植。在分子水平上，涉及许多病理学(包括肿瘤性疾病和炎症)及其受体和信号传导机制的TGF
‑
β之间的连接和相互作用仍不清楚。
[0004]肾脏疾病的治疗迫切需要如下TGF
‑
β活性的组织和疾病特异性调节剂，这些调节剂不会导致不期望的脱靶作用并且不会不利地影响此细胞因子对正常细胞功能的其他生理贡献。如本文所述的方法和试剂提供针对肾脏疾病的有利和有益的治疗，以及作为治疗组分的特异性靶向抗体，这些特异性靶向抗体对阻断、中和、调节和/或抑制关键整联蛋白靶标有直接作用，已发现该关键整联蛋白靶标在肾脏细胞和组织病理学以及肾脏疾病的机制中起重要作用。

技术实现思路

[0005]如下所述，本披露的特征在于用特异性结合αvβ8整联蛋白的抗体或其抗原结合片段(即抗αvβ8整联蛋白抗体)治疗患有肾脏疾病、特别是慢性肾脏疾病(CKD)和/或其症状的受试者(特别是哺乳动物受试者，以及更特别是人受试者)的治疗方法。基于本文所述的发现，在肾脏细胞和组织、并且尤其是患病的肾脏细胞和组织(例如在患有肾脏疾病如CKD的受试者中)的αvβ8整联蛋白的高水平表达允许抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段特异
性靶向在罹患肾脏疾病(如CKD)的受试者的患病肾脏组织中表达的αvβ8整联蛋白。所描述的抗αvβ8整联蛋白抗体不与其他整联蛋白受体同种型(如αvβ1、αvβ3、αvβ5、或αvβ6)交叉反应。在实施例中，抗αvβ8整联蛋白抗体是分离的和纯化的抗体。在特定实施例中，抗αvβ8整联蛋白抗体是人源化抗体。在另一特定实施例中，将抗αvβ8整联蛋白抗体人源化并亲和力优化以具有改善的结构、结合和/或功能特性，如改善的特异性、亲和力和/或稳定性。
[0006]基于肾脏细胞和组织、特别是肾脏的上皮组织表达高水平的αvβ8整联蛋白(TGF
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β细胞因子潜伏形式(LAP
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TGF
‑
β)的受体)这一发现，开发了本文所述的抗αvβ8整联蛋白抗体和方法。特别地，如通过本文所述的实验实施例证明的，发现在肾脏上皮表达的αvβ8整联蛋白的水平升高与纤维化和/或患有肾脏疾病的人受试者和动物模型的肾脏组织中的纤维化和纤维化疾病的严重程度高度相关。特别地，如本文例示的，与正常肾脏细胞和组织相比，患有肾脏疾病(如糖尿病性肾病(DN))的个体的肾脏上皮组织中的肾小球和肾小管细胞、特别是患病肾脏的足细胞和肾小管(例如近端和远端皮质小管)中显示高水平的αvβ8整联蛋白表达。除了糖尿病性肾病，肾脏组织纤维化在肾活性和功能中产生使人衰弱的损害和功能障碍的其他非限制性肾脏疾病类型包括慢性肾脏疾病(CKD)、急性肾脏疾病、高血压相关的肾脏疾病、高血糖相关的肾脏疾病、肾纤维化、炎症相关的肾脏疾病、终末期肾病(ESRD)、自身免疫相关的肾脏纤维化(例如，狼疮性肾炎)和肾移植后的纤维化等。
[0007]对于肾脏疾病和CKD的治疗，涉及本文所述的抗体试剂的方法的实践已表明，αvβ8整联蛋白(其与处于潜伏形式的TGF
‑
β结合)是用于降低和减弱纤维化和组织损害(肾脏疾病(如CKD)的标志)的高效和有用的靶标。如本文所述和例示的，αvβ8整联蛋白在肾脏纤维化(由于αvβ8整联蛋白在肾脏细胞和组织、特别是肾脏上皮细胞和组织、例如在肾脏的肾小球足细胞和肾小管细胞中高水平表达)以及TGF
‑
β(参与患有肾脏疾病的受试者的肾脏组织纤维化并且加重了其损害作用)的活性调节中起直接的、显著的、先前未认识到的作用。在所描述方法中使用的抗αvβ8整联蛋白抗体允许特异性和选择性调节肾脏细胞和组织中αvβ8整联蛋白及其TGF
‑
β配体两者的活性，从而降低、消除、减弱、减少和/或抑制由以下引起的肾脏组织中的纤维化：αvβ8整联蛋白与其配体(潜伏TGF
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β)结合，然后能够激活/释放活性TGF
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β并且使活性TGF
‑
β发挥有害作用而造成肾脏组织纤维化。
[0008]在肾脏组织中激活TGF
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β的一种方式可以是通过其(作为潜伏相关肽(LAP)TGF
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β)与肾脏细胞膜中表达的αvβ8整联蛋白结合。如本文示出的，发现αvβ8整联蛋白的表达在患有肾脏疾病并伴随肾脏纤维化的受试者的肾脏组织中高度升高。肾脏中持续或延长的TGF
‑
β激活导致肾脏组织纤维化。通过本文所述的抗αvβ8整联蛋白抗体来靶向αvβ8整联蛋白(特别是在表达高水平的αvβ8整联蛋白的肾脏组织中)被确定为是用于肾脏疾病(例如CKD)的有效治疗性治疗，其同时避免了不加选择的TGF
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β靶向和抑制在体内其他非肾脏组织中的许多潜在的全身作用。UUO模型是纤维化模型，并且如通过本文所述的抗αvβ8整联蛋白抗体所证明的，纤维化和TGF
‑
β激活的抑制将导本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种在患有肾脏疾病的受试者中治疗肾脏纤维化的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段，从而治疗肾脏纤维化。2.一种在患有肾脏疾病的受试者中降低或减弱肾脏纤维化的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段，从而降低或减弱肾脏中的纤维化。3.一种消除与肾脏纤维化相关的αvβ8整联蛋白的活性的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段，从而消除与肾脏纤维化相关的αvβ8整联蛋白的活性。4.一种通过阻断肾脏细胞和组织中TGF
‑
β从其潜伏形式激活来治疗肾脏纤维化的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段，从而治疗该肾脏纤维化。5.一种治疗肾损害的方法，该肾损害的特征在于血浆肌酸酐和/或尿蛋白排泄水平的增加，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段，其中该抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段的所述施用消除了受试者中的血浆肌酸酐和/或尿蛋白排泄水平，从而治疗肾损伤。6.如权利要求3
‑
5中任一项所述的方法，其中该受试者患有肾脏疾病。7.如权利要求1
‑
6中任一项所述的方法，其中该肾脏疾病选自糖尿病性肾病(DN)、慢性肾脏疾病(CKD)、急性肾脏疾病、高血压相关的肾脏疾病、高血糖相关的肾脏疾病、肾纤维化、炎症相关的肾脏疾病、终末期肾病(ESRD)、自身免疫相关的肾脏纤维化(例如，狼疮性肾炎)和肾移植后的纤维化。8.如权利要求7所述的方法，其中该肾脏疾病是CKD。9.如权利要求1
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8中任一项所述的方法，其中该抗体或其抗原结合片段与在肾脏细胞和/或组织上表达的αvβ8整联蛋白结合并且阻断肾脏细胞和/或组织中TGF
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β从其潜伏形式激活。10.一种检测肾脏组织中肾脏纤维化的方法，该方法包括使肾脏组织与有效量的经可检测地标记的抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段接触，从而检测该抗αvβ8整联蛋白抗体与肾脏组织中αvβ8整联蛋白的结合。11.如权利要求1
‑
10中任一项所述的方法，其中该抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段包含：(a)重链可变区互补决定区1(CDR1)，其包含氨基酸序列：RYWMS；(b)重链可变区互补决定区2(CDR2)，CDR2包含氨基酸序列：EINPDSSTINYTSSL；和(c)重链可变区互补决定区3(CDR3)，CDR3包含氨基酸序列：LITTEDY；和(d)轻链可变区CDR1，其包含氨基酸序列：KASQDINSYLS；(e)轻链可变区CDR2，其包含氨基酸序列：YANRLVD；和(f)轻链可变区CDR3，其包含氨基酸序列：
LQYDEFPYT。12.如权利要求11所述的方法，其中该抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(V
H
)氨基酸序列：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFVFSRYWMSWVRQAPGKGLEWIGEINPDSSTINYTSSLKDRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAILITTEDYWGQGTTVTVSS；和轻链可变区(V
L
)氨基酸序列：DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDINSYLSWFQQKPGKAPKSLIYYANRLVDGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQYDEFPYTFGGGTKVEIK。13.如权利要求1
‑
10中任一项所述的方法，其中该抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段包含：(a)重链可变区CDR1，其包含氨基酸序列：RSWIS；(b)重链可变区CDR2，其包含氨基酸序列：EINPDSSTINYTSSL；和(c)重链可变区CDR3，其包含氨基酸序列：LITTEDY；和(d)轻链可变区CDR1，其包含氨基酸序列：KASQDINKYLS；(e)轻链可变区CDR2，其包含氨基酸序列：YANRLVD；和(f)轻链可变区CDR3，其包含氨基酸序列：LQYDVFPYT。14.如权利要求13所述的方法，其中该抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段包含重链可变区(V
H
)氨基酸序列：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGFVFSRSWISWVRQAPGKGLEWIGEINPDSSTINYTSSLKDRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAILITTEDYWGQGTTVTVSS，以及轻链可变区(V
L
)氨基酸序列：DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDINKYLSWFQQKPGKAPKSLIYYANRLVDGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQYDVFPYTFGGGTKVEIK。15.如权利要求1
‑
14中任一项所述的方法，其中该抗体或其抗原结合片段减弱或消除与患有肾脏疾病的受试者的肾脏组织中足细胞和间质小管细胞中αvβ8整联蛋白的表达增加相关的纤维化。16.如权利要求1
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9或11
‑
15中任一项所述的方法，其中将该抗体或其抗原结合片段与用于肾脏疾病的辅助治疗剂或治疗组合施用至该受试者。17.如权利要求16所述的方法，其中将该抗体或其抗原结合片段在施用该辅助治疗剂或治疗之前、同时或之后施用至该受试者。18.一种抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段，该抗αvβ8整联蛋白抗体或其抗原结合片段包含：(a)重链可变区CDR1，其包含氨基酸序列：
RYWMS；(b)重链可变区CDR2，其包含氨基酸序列：EINPDSSTINYTSSL；和(c)重链可变区CDR3，其包含氨基酸序列：LITTEDY；和(d)轻链可变区CDR1，其包含氨基酸序列：KASQDINSYLS；(...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：免疫医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：