一种用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络及其应用，特点是为circRNA

【技术实现步骤摘要】
一种用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络及其应用


[0001]本专利技术涉及肺癌辅助诊断
，尤其是涉及一种用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络及其应用。

技术介绍

[0002]众所周知，肺癌是世界范围内癌症死亡的主要原因，5年生存时间只有20%
‑
30%。非小细胞肺癌(Non
‑
small cell lung cancer, NSCLC)是肺癌最常见的组织学亚型(约占85%)，其中肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)和肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma, LUSC)是两种主要亚型。肺癌的高致死率和低生存率是由于大多数肺癌患者被诊断为晚期，从而失去了手术机会。因此，肺癌的早期筛查对提高生存率和降低肺癌死亡率至关重要。
[0003]事实上，除了传统的肿瘤标志物，如癌胚抗原（CEA）、CA125、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21
‑
1）等，肺癌的非侵入性早期筛查主要基于低剂量CT和液体活检生物标志物，包括循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）、 微小RNA（microRNAs），长链非编码RNA（lncRNAs），环状RNA（circRNAs）和外泌体（exosomes）。在过去的二十年中，大量的文献表明循环miRNAs、lncRNAs和circRNAs在非小细胞肺癌的早期发现、治疗管理和预后预测中具有广阔的潜力。
[0004]大量的研究表明，非编码RNA(如miRNAs、lncRNAs和circRNAs)作为液体活检的非侵袭性生物标志物，在癌症的诊断和预后价值中发挥着重要作用。特别是在癌症中，ceRNA模式极大地扩展了人类生理和病理条件下的基因调控网络。最近，circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA信号级联已被证实参与了肿瘤的发生和发展，因此被认为具有作为一种新的肿瘤生物标志物的潜力，其与单纯的circRNA或miRNA相比，具有更高的敏感性和特异性。有重要研究表明，circRNAs通过与MREs结合在NSCLC的发生和发展中发挥重要作用，导致miRNAs对其靶肿瘤相关基因的去抑制。例如，据报道，在NSCLC组织中，高表达的circ
‑
CPA4作为let
‑
7 miRNA海绵，从而上调程序性细胞死亡配体
‑
1（programmed cell death ligand
‑
1，PD
‑
L1），从而促进细胞生长、迁移和上皮
‑
间充质转化。Zhu和同事在体外和体内鉴定了一种新型circRNA hsa_circRNA_103809，该RNA可以通过解除miR
‑
377
‑
3p对天冬氨酸转氨基酶1的抑制来增加NSCLC细胞的顺铂耐药。因此，考虑到circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA信号级联对NSCLC的重要贡献，我们认为circRNA
‑
miRNA调控轴可能反映一个更全面的调控网络，从而对NSCLC有更高的敏感性和特异性。目前，国内外鲜有关于ceRNA网络分析与非小细胞肺癌相关的研究报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是提供一种特异性强、灵敏度高的用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络及其应用，其中hsa
‑
miR
‑
4482
‑
3p和hsa
‑
miR
‑
146a
‑
3p表达量与非小细胞肺癌患病呈负相关，hsa_circ_0008167和hsa_circ_0003317表达量与非小
细胞肺癌患病风险呈正相关。
[0006]本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为：1、一种用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络，所述的ceRNA调控网络为circRNA
‑
miRNA调控网络，所述的circRNA基因为 hsa_circ_0008167和/或hsa_circ_0003317，所述的miRNA基因为hsa
‑
miR
‑
4482
‑
3P和/或hsa
‑
miR
‑
146a
‑
3p。
[0007]2、上述用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测药物方面的应用。
[0008]进一步，所述的药物在肺癌早期诊断或检测中促进hsa_circ_0008167和/或hsa_circ_0003317的表达，同时抑制hsa
‑
miR
‑
4482
‑
3p和/或hsa
‑
miR
‑
146a
‑
3p基因的表达。
[0009]3、上述用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测试剂盒方面的应用。
[0010]进一步，所述的试剂盒包括hsa_circ_0008167荧光定量PCR特异性上游引物：5
’‑
CATCTTGAGGGAAACAGCAAATG
‑3’
；hsa_circ_0008167荧光定量PCR特异性下游引物：5
’‑
TAAGGACTTGCAGGACCACC
‑3’
；hsa_circ_0003317荧光定量PCR特异性上游引物：5
’‑
CCCGGAGTTCTTGTATGTGG
‑3’
；hsa_circ_0003317荧光定量PCR特异性下游引物：5
’‑
CCGTAGCTTGGTAATTCTGACA
‑3’
；hsa
‑
miR
‑
4482
‑
3p特异性逆转录茎环引物：5
’‑
CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGCGAGCCCC
ꢀ‑3’
；hsa
‑
miR
‑
4482
‑
3p荧光定量PCR特异性上游引物：5
’‑
TCGGCAGGTTTCTATTTCTCAG
‑3’
；hsa
‑
miR
‑
146a
‑
3p特异性逆转录茎环引物：5
’‑
CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGCCTGAAGA
‑3’
；hsa
‑
miR
‑
14本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络，其特征在于：所述的ceRNA调控网络为circRNA
‑
miRNA调控网络，所述的circRNA基因为 hsa_circ_0008167和/或hsa_circ_0003317，所述的miRNA基因为hsa
‑
miR
‑
4482
‑
3P和/或hsa
‑
miR
‑
146a
‑
3p。2.一种权利要求1所述的用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测药物方面的应用。3.根据权利要求2所述的用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测药物方面的应用，其特征在于：所述的药物在肺癌早期诊断或检测中促进hsa_circ_0008167和/或hsa_circ_0003317的表达，同时抑制hsa
‑
miR
‑
4482
‑
3p和/或hsa
‑
miR
‑
146a
‑
3p基因的表达。4.一种权利要求1所述的用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测试剂盒方面的应用。5.根据权利要求4所述的用于非小细胞肺癌早期诊断或检测的ceRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测试剂盒方面的应用，其特征在于：所述的试剂盒包括hsa_circ_0008167荧光定量PCR特异性上游引物：5
’‑
CATCTTGAGGGAAACAGCAAATG
‑3’
；hsa_circ_0008167荧光定量PCR特异性下游引物：5
’‑
TAAGGACTTGCAGGACCACC
‑3’
；hsa_circ_0003317荧光定量PCR特异性上游引物：5
’‑
CCCGGA...

【专利技术属性】
技术研发人员：马欣怡，孟小丹，赵一锴，姚群圣，李乐怡，何翊瑜，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：