一种L-岩藻糖的检测方法及其应用技术

本发明专利技术属于糖类检测技术领域，具体涉及一种L

【技术实现步骤摘要】
一种L
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岩藻糖的检测方法及其应用


[0001]本专利技术属于糖类检测
更具体地，涉及一种L
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岩藻糖的检测方法及其应用。

技术介绍

[0002]L
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岩藻糖(L
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fucose)又名L
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褐藻糖，化学式为C6H
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O6，属于脱氧己醛糖，又称为6
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脱氧
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L
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半乳糖，为白色结晶体，微量溶解于甲醇、乙醇，易溶解于水、稀酸性和稀碱性溶液中，难溶解于丙酮、乙醚、氯仿和石油醚等溶液中，是马尾藻中含量最多的一种单糖，大多存在于岩藻聚糖(褐藻多糖硫酸酯)中。因L
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岩藻糖具有广泛的应用而受到研究学者们的青睐。如L
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岩藻糖可以检测风湿性关节炎；在糖尿病患者体内，尿中L
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岩藻糖含量水平可以表示糖复合物的代谢程度，可以作为判断是否具有肿瘤或癌症的标记等。
[0003]L
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岩藻糖的含量测定一般使用HPLC法、HPLC
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ELSD法、毛细管气相色谱法和高效阴离子交换色谱法进行检测，但这些方法都需要使用大型的、昂贵的仪器，成本需求比较高，对于一般的实验检测具有一定的限制性。Dische比色法因其具有成本低、操作简单的方法而被广泛使用，但Dische比色法测定的时间比较长，常温下测定需要等待4个小时后才能达到稳定状态进行准确检测。因此，黄桂华、叶静等人在传统Dische比色法的基础上进行改进来测定海带中岩藻聚糖的含量，该方法有效的减少了测定所需要的时间，等待40min可以达到稳定状态进行检测，但其还存在一些不足，如试剂的使用量大、不能建立微量体系、达到稳定的时间有待进一步缩短(黄桂华,叶静,肖美添,等.改进Dische比色法测定海带中的岩藻聚糖含量[J].食品与发酵工业,2018,44(7):5.)。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是克服现有测定L
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岩藻糖含量的方法还存在达到稳定的时间较长、不能建立微量体系检测的缺陷和不足，提供一种达到稳定时间短、可以建立微量体系检测的一种L
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岩藻糖的检测方法。
[0005]本专利技术的目的是提供所述L
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岩藻糖的检测方法在检测L
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岩藻糖中的应用。
[0006]本专利技术的上述目的通过以下技术方案实现：
[0007]一种L
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岩藻糖的检测方法，包括如下步骤：
[0008]在L
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岩藻糖溶液中加入体积分数为5～6.5:1的硫酸溶液，40～60℃水浴加热8～20分钟，冷却，加入5～7％L
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半胱氨酸盐酸盐溶液，摇匀，在40～60℃下静置15～25分钟，采用紫外分光光度计在396nm和427nm波长下进行检测。
[0009]优选地，所述硫酸溶液的体积分数为5.5～6:1。
[0010]优选地，所述L
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半胱氨酸盐酸盐溶液的浓度为6％。
[0011]优选地，所述水浴加热的温度为45～55℃。
[0012]优选地，所述L
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岩藻糖溶液、硫酸溶液、L
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半胱氨酸盐酸盐溶液的体积比为1：3～5:0.1～0.2。
[0013]优选地，所述硫酸溶液在冰水浴中加入。
[0014]优选地，所述水浴加热的时间为10～15分钟。
[0015]优选地，所述水浴加热前还包括在冰水中冷却至室温。
[0016]优选地，所述L
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岩藻糖的检测方法为：在L
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岩藻糖溶液中加入体积分数为6:1的硫酸溶液，45℃水浴加热8～20分钟，冷却，加入6％L
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半胱氨酸盐酸盐溶液，摇匀，在45℃下静置15～25分钟，采用紫外分光光度计在396nm和427nm波长下进行检测。
[0017]常量检测方法一般采用紫外分光光度计进行检测，微量体系检测一般采用酶标仪进行检测，但由于紫外分光光度计与酶标仪在原理、测量过程中使用的样品池、测量方法均有一定的差别，且酶标仪还根据用途的特殊性限定了范围和设置界面，这使得很多常量检测方法不能有效转化为微量体系进行检测。而本申请经过大量的创造性劳动发现，调整检测过程中硫酸溶液的体积分数、L
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半胱氨酸盐酸盐溶液的浓度及反应的温度可将采用常量检测L
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岩藻糖的方法转化为使用微量体系进行检测，可大大降低强酸硫酸溶液的使用量。
[0018]本专利技术进一步保护所述L
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岩藻糖的检测方法在检测L
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岩藻糖中的应用。
[0019]本专利技术具有以下有益效果：
[0020]本专利技术采用L
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半胱氨酸盐酸盐溶液，硫酸溶液在一定的温度下检测L
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岩藻糖的含量，该方法检测的稳定性高，可有效缩短显色稳定的时间，操作简单，且能成功转化成微量体系进行检测，大大减少检测中试剂的使用，特别是减少强酸硫酸溶液的使用，降低环境污染。
附图说明
[0021]图1为硫酸体积分数对L
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岩藻糖检测显色稳定性的影响图。
[0022]图2为L
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半胱氨酸盐酸盐浓度对L
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岩藻糖检测显色稳定性的影响图。
[0023]图3为温度对L
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岩藻糖检测显色稳定性的影响图。
[0024]图4为L
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岩藻糖检测的标准曲线。
[0025]图5为硫酸体积分数对L
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岩藻糖微量体系检测显色稳定性的影响图。
[0026]图6为L
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半胱氨酸盐酸盐浓度对L
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岩藻糖微量体系检测显色稳定性的影响图。
[0027]图7为温度对L
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岩藻糖微量体系检测显色稳定性的影响图。
[0028]图8为对比例13的检测方法转化为微量体系的检测结果图。
[0029]图9为L
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岩藻糖微量体系检测的标准曲线。
具体实施方式
[0030]以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。
[0031]除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
[0032]实施例1L
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岩藻糖的检测
[0033]分别精确量取1.0mL 40μg/mL的L
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岩藻糖到4个25mL的比色管中，冰水浴中加入4.0mL体积分数为6:1的硫酸溶液，摇匀，于冰水中放置1分钟，冷却至室温，在45℃水浴中准确加热10分钟，待溶液冷却至室温，加入0.1mL 6％L
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种L
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岩藻糖的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：在L
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岩藻糖溶液中加入体积分数为5～6.5:1的硫酸溶液，40～60℃水浴加热8～20分钟，冷却，加入5～7％L
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半胱氨酸盐酸盐溶液，摇匀，在40～60℃下静置15～25分钟，采用紫外分光光度计分别在396nm和427nm波长下进行检测。2.根据权利要求1所述L
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岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述硫酸溶液的体积分数为5.5～6:1。3.根据权利要求1或2所述L
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岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述L
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半胱氨酸盐酸盐溶液的浓度为6％。4.根据权利要求1或2所述L
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岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述水浴加热的温度为45～55℃。5.根据权利要求1或2所述L
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【专利技术属性】
技术研发人员：谌素华，孔松芝，千忠吉，廖铭能，莫晓薇，林沛纯，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：