定向缀合技术制造技术

除其它外，本公开提供了用于将各种所关注部分与靶药剂定点缀合的技术。在一些实施例中，本公开利用靶标结合部分来提供高缀合效率和选择性。在一些实施例中，所提供的技术可用于制备抗体缀合物。于制备抗体缀合物。于制备抗体缀合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】定向缀合技术
[0001]相关申请交叉引用
[0002]本申请要求于2019年11月18日提交的美国临时申请第62/937,131号和于2020年8月10日提交的美国临时申请第63/063,902号的优先权，所述申请中的每个申请的全部内容均通过引用并入本文中。

技术介绍

[0003]缀合物，例如蛋白质缀合物，如抗体
‑
药物缀合物，可用于各种目的，例如，作为诊断试剂、治疗剂(例如，抗原靶向治疗剂)等。

技术实现思路

[0004]除其它外，本公开涵盖现有缀合技术可能遭受各种挑战的认识。例如，将所关注部分(例如，检测部分、药物部分等)与靶分子(例如，用于抗体
‑
药物缀合物的抗体)缀合的反应可能效率低和/或选择性低(例如，在靶分子的各种位置(例如，抗体的各种氨基酸残基)处缀合)，并且产物缀合物组合物通常是高度异质的，包括多个单独的缀合物类型，所述多个缀合物类型各自独立地具有其自己的所关注部分拷贝数、缀合位置(例如，蛋白质的不同的氨基酸残基)等。在一些实施例中，缀合物的制造涉及多个步骤并且包含各种反应，如还原、氧化、水解等，并且此类反应可能引起不期望的转化，例如，在靶药剂部分的一个或多个位置处(例如，在抗体部分的一个或多个残基和/或一种或多种修饰(例如，聚糖)处)。此类不期望的转化可以进一步降低效率和/或增加产物缀合物组合物的异质性，使表征、评估和/或纯化过程复杂化并增加产物成本。
[0005]在一些实施例中，本公开提供了用于将各种所关注部分与靶标(例如，蛋白质)缀合的缀合技术。在一些实施例中，所提供的技术提供了定向缀合，因为所关注部分在靶标(例如，蛋白质，如抗体)的某些位置处选择性地缀合。在一些实施例中，所提供的技术利用更少的步骤。在一些实施例中，所提供的技术利用温和的反应条件。在一些实施例中，所提供的技术不包含如还原、氧化和/或水解等反应条件。在一些实施例中，所提供的技术包含基本上不从包括靶药剂部分和所关注部分的缀合物分子切割(例如，不从靶药剂部分、所关注部分和/或连接子部分切割基团)。在一些实施例中，所关注部分是可检测部分(例如，FITC)。在一些实施例中，所关注部分是药物部分(例如，抗体
‑
药物缀合物中利用的各种药物部分)。在一些实施例中，所关注部分是蛋白质部分(例如，与其它抗体药剂缀合的抗体药剂(作为靶药剂部分))。在一些实施例中，所关注部分是或包括反应基团。在一些实施例中，所关注部分是或包括反应基团，使得其它所关注部分可以通过反应基团处的反应进一步并入。
[0006]本公开的技术可以提供各种优势。在一些实施例中，本公开提供了提高的效率和/或选择性、降低的异质性水平和/或降低的不期望的转化(例如，通过更少的反应步骤(在一些实施例中，仅一个反应步骤)，避免某些反应条件(例如，还原、氧化、水解等)。
[0007]在一些实施例中，本公开提供了包括在靶药剂部分的某些位置处缀合的所关注部
分的药剂。在一些实施例中，本公开提供了与来自参考技术(例如，如所提供的方法中所描述的不使用靶标结合部分(例如，LG)的技术)的组合物相比，均质性增加的组合物。
附图说明
[0008]图1.蛋白质印迹数据表明，所提供的技术可以提供各种优势(例如，提高效率、提高选择性等，而无需额外的反应步骤)。使用10M当量的指定试剂在碳酸氢盐缓冲液pH8.3中在37℃下使用达土木单抗建立反应持续2小时。反应配偶体：1：I
‑
1；2：I
‑
2；3：I
‑
3；4：I
‑
4；5：I
‑
9；6：I
‑
10；7：I
‑
11；8：I
‑
15；9：I
‑
14。
[0009]图2.蛋白质印迹数据表明，所提供的技术可以提供各种优势(例如，提高效率、提高选择性等，而无需额外的反应步骤)。使用30M当量的指定试剂在硼酸盐缓冲液pH 8.3中在37℃下使用达土木单抗建立反应持续20小时。1：达土木单抗。泳道2
‑
9的反应配偶体：2：I
‑
10；3：I
‑
11；4：I
‑
46；5：I
‑
24；6：I
‑
25；7：I
‑
35；8：I
‑
36；以及9：I
‑
37。
[0010]图3.蛋白质印迹数据表明，所提供的技术可以提供各种优势(例如，提高效率、提高选择性等，而无需额外的反应步骤)。使用5M当量的指定试剂在碳酸氢盐缓冲液pH8.3中在37℃下使用达土木单抗建立反应持续20小时。1：达土木单抗。泳道2
‑
10的反应配偶体：2：I
‑
6；3：I
‑
5；4：I
‑
13；5：I
‑
17；6：I
‑
7；7：I
‑
8；8：I
‑
12；9：I
‑
16；以及10：I
‑
35。
[0011]图4.蛋白质印迹数据表明，所提供的技术可以提供各种优势(例如，提高效率、提高选择性等，而无需额外的反应步骤)。使用2.5M当量的指定试剂在磷酸盐缓冲盐水pH 7.4中在25℃下使用达土木单抗建立反应持续4小时。1和2：达土木单抗。泳道3
‑
14的反应配偶体：3：I
‑
38；4：I
‑
39；5：I
‑
40；6：I
‑
47；7：I
‑
48；8：I
‑
49；9：I
‑
18；10：I
‑
50；11：I
‑
51；12：I
‑
52；13：I
‑
9；以及14：I
‑
45。
[0012]图5.蛋白质印迹数据表明，所提供的技术可以提供各种优势(例如，提高效率、提高选择性等，而无需额外的反应步骤)。反应如表30
‑
8中所描述。1：达土木单抗；2：I
‑
45，2.5当量，1mg/ml；3：I
‑
45，3.0当量，1mg/ml；4：I
‑
45，3.5当量，1mg/ml；5：I
‑
9，2.5当量，1mg/ml；6：I
‑
9，3.0当量，1mg/ml；7：I
‑
9，3.5当量，1mg/ml；8：I
‑
45，2.5当量，4mg/ml；9：I
‑
45，3.0当量，4mg/ml；10：I
‑
45，3.5当量，4mg/ml；11：I
‑
9，2.5当量，4mg/ml；12：I
‑
9，3.0当量，4mg/ml；13：本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种化合物，其具有式R
‑
I结构：LG
‑
RG
‑
L
RM
‑
MOI，(R
‑
I)或其盐，其中：LG是包括与靶药剂结合的靶标结合部分的基团，RG是反应性基团；L
RM
是连接子；并且MOI是所关注部分。2.一种化合物，其具有式R
‑
I结构：LG
‑
RG
‑
L
RM
‑
MOI，(R
‑
I)或其盐，其中：LG是R
LG
‑
L
LG
；R
LG
是R
c
‑
(Xaa)z
‑
、核酸部分或小分子部分；每个Xaa独立地为氨基酸或氨基酸类似物的残基；t为0
‑
50；z为1
‑
50；每个R
c
独立地为
‑
L
a
‑
R
′
；每个L
a
独立地为共价键或选自具有1
‑
5个杂原子的C1‑
C
20
脂肪族或C1‑
C
20
杂脂肪族的任选地经取代的二价基团，其中所述基团中的一个或多个亚甲基单元任选地且独立地被以下替代：
‑
C(R
′
)2‑
、
‑
Cy
‑
、
‑
O
‑
、
‑
S
‑
、
‑
S
‑
S
‑
、
‑
N(R
′
)
‑
、
‑
C(O)
‑
、
‑
C(S)
‑
、
‑
C(NR
′
)
‑
、
‑
C(O)N(R
′
)
‑
、
‑
N(R
′
)C(O)N(R
′
)
‑
、
‑
N(R
′
)C(O)O
‑
、
‑
S(O)
‑
、
‑
S(O)2‑
、
‑
S(O)2N(R
′
)
‑
、
‑
C(O)S
‑
或
‑
C(O)O
‑
；每个
‑
Cy
‑
独立地为任选地经取代的二价单环、双环或多环基团，其中每个单环独立地选自C3‑
20
脂环族环、C6‑
20
芳基环、具有1
‑
10个杂原子的5到20元杂芳基环和具有1
‑
10个杂原子的3到20元杂环基环；L
LG
为
‑
L
LG1
‑
、
‑
L
LG1
‑
L
LG2
‑
、
‑
L
LG1
‑
L
LG2
‑
L
LG3
‑
或
‑
L
LG1
‑
L
LG2
‑
L
LG3
‑
L
LG4
‑
；RG为
‑
L
RG1
‑
L
RG2
‑
、
‑
L
LG4
‑
L
RG1
‑
L
RG2
‑
、
‑
L
LG3
‑
L
LG4
‑
L
RG1
‑
L
RG2
‑
、
‑
L
LG2
‑
L
LG3
‑
L
LG4
‑
L
RG1
‑
L
RG2
‑
；L
LG1
、L
LG2
、L
LG3
、L
LG4
、L
RG1
、L
RG2
和L
RM
中的每一个独立地为L；每个L独立地为共价键或二价任选地经取代的直链或支链C1‑
100
基团，所述二价任选地经取代的直链或支链C1‑
100
基团包括一个或多个脂肪族部分、芳基部分、各自独立地具有1
‑
20个杂原子的杂脂肪族部分、各自独立地具有1
‑
20个杂原子的杂芳香族部分或此类部分中的任何一个或多个部分的任何组合，其中所述基团中的一个或多个亚甲基单元任选地且独立地被以下替代：C1‑6亚烷基、C1‑6亚烯基、具有1
‑
5个杂原子的二价C1‑6杂脂肪族基团、
‑
C≡C
‑
、
‑
Cy
‑
、
‑
C(R
′
)2‑
、
‑
O
‑
、
‑
S
‑
、
‑
S
‑
S
‑
、
‑
N(R
′
)
‑
、
‑
C(O)
‑
、
‑
C(S)
‑
、
‑
C(NR
′
)
‑
、
‑
C(O)N(R
′
)
‑
、
‑
C(O)C(R
′
)2N(R
′
)
‑
、
‑
N(R
′
)C(O)N(R
′
)
‑
、
‑
N(R
′
)C(O)O
‑
、
‑
S(O)
‑
、
‑
S(O)2‑
、
‑
S(O)2N(R
′
)
‑
、
‑
C(O)S
‑
、
‑
C(O)O
‑
、
‑
P(O)(OR
′
)
‑
、
‑
P(O)(SR
′
)
‑
、
‑
P(O)(R
′
)
‑
、
‑
P(O)(NR
′
)
‑
、
‑
P(S)(OR
′
)
‑
、
‑
P(S)(SR
′
)
‑
、
‑
P(S)(R
′
)
‑
、
‑
P(S)(NR
′
)
...

【专利技术属性】
技术研发人员：L，
申请(专利权)人：克莱奥药品有限公司，
类型：发明
国别省市：